| 公開(公告)號(hào) | CN1888065A |
| 公開(公告)日 | 2007.01.03 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610036646.0 |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.07.21 |
| 專利名稱 | 重組美洲大蠊過敏原蛋白的表達(dá)方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/09(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 何韶衡;張忠芳 |
| 地址 | 515031廣東省汕頭市新陵路22號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州粵高專利代理有限公司 |
| 代理人 | 陳 衛(wèi) |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組美洲大蠊過敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01的表達(dá)方法，其特征在于包括如下步驟： (1)從美洲大蠊組織中提取總RNA； (2)合成引物： pET-Per a 1.0101-P1 CATATGGAGTTCCAGAGCATTATCTCAAC pET-Per a 1.0101-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAG pET-Per a 1.0102-P1 CATATGAGCATTATCTCAACTCTAAATGCCATGCC pET-Per a 1.0102-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACAAGCTGC pET-Per a 1.0104-P1 CATATGGTTGGTGTCGATGGTCTCATAGAC pET-Per a 1.0104-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACCAG pET-Per a 7.01-P1 GAATTCGACGCGATCAAGAAGAAGATG pET-Per a 7.01-P2 GCGGCCGCGTTGCCAATAAGTTCGGTGAAAG (3)以總RNA為模板，通過RT-PCR獲得美洲大蠊過敏原蛋白編碼基因片段； (4)將編碼基因克隆入原核表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)化宿主菌，培養(yǎng)所得重組工程菌，然后誘導(dǎo)其表達(dá)目的蛋白； (5)采用親和層析方法對(duì)目的蛋白進(jìn)行純化，從而獲得重組美洲大蠊過敏原蛋白Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104或Per a 7.01。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種重組美洲大蠊過敏原蛋白的表達(dá)方法。本發(fā)明的目的是針對(duì)蟑螂過敏原浸提液進(jìn)行免疫耐受治療的不足，從常見的蟑螂種屬美洲大蠊組織中提取總RNA，擴(kuò)增出美洲大蠊主要過敏原基因Per a1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的編碼基因，通過基因工程手段，在大腸桿菌中低溫誘導(dǎo)表達(dá)重組蟑螂過敏原蛋白，可用于蟑螂引起的過敏反應(yīng)疾病的診斷和治療，避免了天然提取物的非單一性及標(biāo)準(zhǔn)化難的障礙。 |
| 國際公布 |
