| 公開(公告)號(hào) | CN1807631A |
| 公開(公告)日 | 2006.07.26 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610023234.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.01.12 |
| 專利名稱 | 用轉(zhuǎn)錄因子提高長(zhǎng)春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/29(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/29(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 上海交通大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 唐克軒;龔一富;廖志華;苗志奇;孫小芬 |
| 地址 | 200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海交達(dá)專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 王錫麟;王桂忠 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種用轉(zhuǎn)錄因子提高長(zhǎng)春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法，其特征在于，從長(zhǎng)春花中克隆orca3和g10h基因，構(gòu)建含所述DNA分子的植物表達(dá)載體，用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)，將orca3和g10h基因同時(shí)導(dǎo)入長(zhǎng)春花細(xì)胞并再生出毛狀根，PCR和熒光定量PCR檢測(cè)外源目的基因orca3和g10h的整合和表達(dá)情況，液相色譜測(cè)定長(zhǎng)春花毛狀根中生物堿含量。 |
| 摘要 | 本發(fā)明是一種生物技術(shù)領(lǐng)域的用轉(zhuǎn)錄因子提高長(zhǎng)春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法。本發(fā)明從長(zhǎng)春花中克隆str和g10h基因，構(gòu)建含str和g10h基因的植物表達(dá)載體，遺傳轉(zhuǎn)化長(zhǎng)春花獲得轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)春花毛狀根，液相色譜法測(cè)定長(zhǎng)春花毛狀根中生物堿含量，熒光定量PCR測(cè)定長(zhǎng)春花毛狀根生物堿生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。本發(fā)明獲得的轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)春花毛狀根中重要生物堿的含量顯著提高，其中長(zhǎng)春堿含量比非轉(zhuǎn)化對(duì)照根提高了234倍，從而提供了一種提高長(zhǎng)春花毛狀根生物堿的方法，也為生產(chǎn)具重要臨床需求的抗癌藥物長(zhǎng)春堿和長(zhǎng)春新堿提供了一種新方法。 |
| 國(guó)際公布 |
