方法名稱： |
七味解毒活血膏—兒茶素—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于七味解毒活血膏中兒茶素含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品經(jīng)石油醚脫脂后，用甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在280nm測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 Agilent HP-1100型高效液相色譜儀；VWD可變波長(zhǎng)檢測(cè)器。 色譜條件 色譜柱：Alltech Alltima C18 （4.6 ×250mm)； 流動(dòng)相：乙腈- 0.2 %磷酸( 8∶92 )；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；流速：1.0ml/ min； 柱溫：35℃。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取兒茶素對(duì)照品(置五氧化二磷為干燥劑的干燥器中，減壓干燥48h) 5.50mg，置10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml中含兒茶素0.55mg 的對(duì)照品貯備液；精密量取1ml，稀釋至10ml，得每1ml 中含兒茶素55μg 的對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 取本品4g，精密稱定，加石油醚(30～60℃) 50ml，超聲處理10min，使全部溶散，放置1h，將上層石油醚液小心傾出，水層再用石油醚30ml洗滌1次，水層置水浴上揮盡石油醚，放冷，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理5min 使溶散，放置1h，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心(3 000r/ min,10min)，取上清液，即得供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算兒茶素的含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
耿家玲，孟芹， 姚青等. HPLC法測(cè)定七味解毒活血膏中兒茶素的含量. 云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).2005，28（1)：16～17 |
