方法名稱: |
火絨草—咖啡酸和原兒茶醛的含量測定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
用于火絨草中咖啡酸和原兒茶醛含量的測定 |
方法原理: |
本品經(jīng)5%甲酸的甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在280nm(13min以前)和323nm(13min以后)處測定,以外標(biāo)法計(jì)算咖啡酸和原兒茶醛的含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 Aglient 1100高效液相色譜儀; 色譜條件 色譜柱:Alltech alltima C18 (4.6mm×250mm,5μm);流動(dòng)相: 甲醇-0.05% 磷酸水溶液(25∶75);流速: 1.0 ml·min-1;檢測波長: 13min 以前為280nm,13min 后為323 nm;柱溫:25℃。 |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取二苯乙烯苷2.00mg,以50%的乙醇超聲振蕩溶解并定容于5ml量瓶中,制得0.400mg/ ml的對照品溶液。 供試品溶液的制備 取樣品約0.40g,精密稱定,置圓底燒瓶中,加入50%乙醇50ml,稱定重量,浸泡1.5h,回流0.5h,放冷,用50%乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,上清液用0.45μm微孔濾膜過濾,作為供試品溶液。 |
操作步驟: |
精密吸取對照液以及供試品溶液1OμL,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定,按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
朱華,黃權(quán)芳,周燕華等.HPLC-UV法測定廣西不同產(chǎn)地何首烏中二苯乙烯苷的含量. 廣西中醫(yī)藥.2006,29(6):52~54 |