方法名稱: |
金銀花藥材-綠原酸,當(dāng)藥苷,忍冬苷的含量測定-HPLC |
應(yīng)用范圍: |
用于金銀花藥材中綠原酸,當(dāng)藥苷,忍冬苷的含量測定 |
方法原理: |
本品粉末加水回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在327 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 Ahilent-1100高效液相色譜儀:包括四元泵,自動進樣器,柱溫箱,DAD二級管陣列監(jiān)測器,Agilent chemstation 試劑 當(dāng)藥苷,忍冬苷對照品為本所自制,經(jīng)光譜分析和HPLC面積歸一化法測定純度均在99 % 色譜條件 色譜柱:YMC-Pack ODS-A-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:乙腈(A)-1 %冰醋酸水溶液(B);梯度:0 min(5 %A)→13 min(10%A)→30 min(25 %A);流速:1.0 mL/min;檢測波長:0~17min,用325 nm檢測綠原酸;17~22min,用237 nm檢測當(dāng)藥苷;22~25 min用245 nm檢測忍冬苷;柱溫:20 ℃ |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取對照品綠原酸,當(dāng)藥苷,忍冬苷各10 mg,分別置20 mL量瓶中,加水定容,制成0.5 mg/mL的對照品貯備液。 供試品溶液制備 精密稱取藥材粉末(過40目篩)1 g置于100 mL圓底燒瓶中,精密加水50 mL,稱重,加熱回流1 h,放冷后再稱重并用水補足重量差,濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液用0.45 μm濾膜過濾,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取綠原酸,當(dāng)藥苷,忍冬苷對照液以及金銀花供試品溶液各15 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算綠原酸,當(dāng)藥苷,忍冬苷含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
楊蓓蓓,劉超,王素娟等,. 高效液相色譜法測定金銀花藥材中3種成分的含量. 藥物分析雜志. 2006,26(2):168~167。 |