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含黃芩制劑—小柴胡湯—黃芩苷的含量測定方法—HPLC-DAD-TOF/MS

  
方法名稱:
  含黃芩制劑—小柴胡湯—黃芩苷的含量測定—HPLC-DAD-TOF/MS
應(yīng)用范圍:
  用于小柴胡湯中黃芩苷的含量測定。
方法原理:
 本品用70%乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜儀分離,按外標(biāo)法計算含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  Agilent1100高效液相色譜儀;二極管陣列檢測器。

色譜條件  色譜柱:Agilent Zorbax XDB-C18,(2.1mm×50mm,1.8μm);流動相:水(0.025%,A液)-甲醇(0.025%甲酸,B液),梯度洗脫程序如下:0~1min:70%A~30%B;1~45min:25%A~75%B;45~55min:20%A~80%B;55~65min:100%B.流速:0.15ml/min;柱溫:25℃;進(jìn)樣量0.25μl,運(yùn)行時間:75min,離子源:APCIESI源,正離子方式監(jiān)測,用于定量分析的離子m/z803.4200~803.4900,干燥氣溫度:350℃,霧化氣壓力:275792Pa,霧化氣流速:10L/min,碰撞碎片電壓:200V。
試樣制備:
 

對照品溶液的配制   分別精密稱取黃芩苷對照品13.65mg,置于10ml量瓶中用甲醇溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液。取儲備液各5.0ml25ml量瓶中,經(jīng)稀釋,配成標(biāo)準(zhǔn)溶液,黃芩苷濃度為455.0,303.3,151.675.80,37.907.58,0.758μg/ml.

供試品溶液的制備   分別取自制的小柴胡湯0.5g,精密稱定,置100ml平底燒瓶中,加70%乙醇,回流40min,放冷至室溫,過濾,收集濾液,重復(fù)提取3次,合并濾液,揮干,甲醇定容至10ml,進(jìn)樣前用0.22um濾膜過濾,棄去初濾液,取續(xù)濾液進(jìn)樣測定。
操作步驟:
  精密吸取對照品及供試品溶10μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積,以外標(biāo)法含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:quanxiangyun.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  趙白云,朱臻宇。王彬等. HPLC-DAD-TOF/MS法測定小柴胡湯中柴胡皂苷a黃芩苷和甘草酸的含量.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報.2007.28(5):527~530
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