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紅芪-異黃酮的含量測定方法-RP-HPLC

  
方法名稱:
  紅芪-異黃酮的含量測定-RP-HPLC
應用范圍:
  用于紅芪中兩種異黃酮類成分的含量測定
方法原理:
 本品細粉加14%甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在225nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備 Waters 600E高效液相色譜儀系列:在線脫氣機,四元泵,2996二級管陣列檢測器,Millen2num32色譜工作站,自動進樣器,柱溫箱, KromasilODS21柱(5μm,416mm×250mm),Kromasil ODS保護柱(5μm,416 mm×10mm); KQ3200DB 超聲波清洗器

色譜條件   Kromasil C18色譜柱(5μm ,4.6mm×250mm) , Kromasil C18保護柱(5μm ,4.6mm×10mm) ,流動相為甲醇-水,梯度洗脫,檢測波長254nm,流速110ml/min,柱溫25℃。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備   分別精密稱取毛蕊異黃酮和柄花素1.88mg、1.86mg,加甲醇超聲溶解,定容于2ml 容量瓶中,作為貯備液,分別精密吸取這兩種對照品貯備液0.1ml,定容至1ml,再分別稀釋成5個系列濃度的對照品溶液,

供試品溶液的制備  用四分法取樣,精密稱取紅芪樣品2.500g,以甲醇為溶劑超聲提取3次(每次20min),提取液蒸去甲醇,用30 ml蒸餾水溶解,用水飽和的正丁醇(30、30、20、15 ml) 萃取四次,合并正丁醇部分,減壓蒸干,殘渣用甲醇定容至5ml,用0.45μm微孔濾膜過濾。
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對照品和供試品溶液各5μl進樣,測定峰面積值,按外標法計算含量
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:quanxiangyun.cn)
備注:
 
參考文獻:
  胡芳弟,封士蘭,趙健雄. RP-HPLC 法測定紅芪中兩種異黃酮類成分的含量.陜西中醫(yī). 2006,27(8):1003~1334
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