方法名稱:
枳實(shí)導(dǎo)滯丸-橙皮苷的測(cè)定-薄層掃…" />
方法名稱: |
枳實(shí)導(dǎo)滯丸-橙皮苷的測(cè)定-薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用薄層掃描法測(cè)定枳實(shí)導(dǎo)赤丸中橙皮苷的含量。 本方法適用于枳實(shí)導(dǎo)滯丸中橙皮苷含量的測(cè)定。 |
方法原理: |
供試品于索氏提取器中經(jīng)甲醇加熱回流,過(guò)濾,濾液蒸干,殘?jiān)眉状既芙,制成供試液,點(diǎn)樣、展開,以1%三氯化鋁的甲醇溶液顯色,用薄層掃描儀進(jìn)行熒光掃描。于激發(fā)波長(zhǎng)λ=300 nm測(cè)量橙皮苷(C28H34O15)熒光強(qiáng)度的積分值,計(jì)算其含量。 |
試劑: |
1. 甲醇 2. 1%三氯化鋁的甲醇溶液 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1索氏提取器 1.2薄層掃描儀 1.3點(diǎn)樣器 一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。 1.4展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸,底部平底或雙槽,蓋子須密閉。 2 材料 2.1聚酰胺薄膜 |
試樣制備: |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取橙皮苷對(duì)照品適量,加甲醇制成每1mL含0.05mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約 0.5g,置索氏提取器中,加甲醇 90mL,加熱回流4小時(shí),趁熱濾過(guò)至100mL量瓶中,用少量甲醇洗滌容器,洗液與濾液合并,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取 5mL,置 25mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1. 薄層板制備 用商品預(yù)制板-聚酰胺薄膜。 2. 點(diǎn)樣 精密吸取供試品溶液5μL、對(duì)照品溶液2μL與5μL,分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上,如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上,一般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊1.0~1.5cm,樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。 3. 展開 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,以甲醇為展開劑,展開,展距約3cm,取出,晾干,噴以1%三氯化鋁的甲醇溶液,放置3小時(shí)。 4. 含量測(cè)定 在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板,周圍用膠布固定,選擇反射方式,進(jìn)行熒光掃描,激發(fā)波長(zhǎng):λ=300 nm, 測(cè)量供試品熒光強(qiáng)度的積分值與對(duì)照品熒光強(qiáng)度的積分值,計(jì)算。 用外標(biāo)法測(cè)定時(shí),若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線時(shí),可用一點(diǎn)法校正,如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正,必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。 |
參考文獻(xiàn): |
中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編、化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部p. 515。 |