更年安片 –大黃素的測(cè)定--高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定更年安片中大黃素的含量。

本方法適用于中成藥更年安片。

供試品加甲醇，熱回流提取，濾過(guò)，取續(xù)濾液減壓回收至干。殘?jiān)�加水，加鹽酸及氯仿，加熱回流，分取氯仿層，水層用氯仿提取多次后，合并氯仿提取液，減壓回收至干。殘?jiān)�加甲醇溶解，并稀釋至一定體積，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，于波長(zhǎng)437nm處檢測(cè)大黃素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2.冰醋酸

3 .甲醇

4 .鹽酸

5 .氯仿

1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 水 冰醋酸 = 60 40 1

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：437nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，求得每片平均重量，研細(xì)，精密稱取粉末約5g。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取大黃素對(duì)照品約10mg, 置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25mL，置200mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻（每1mL中含大黃素12.5μg)。

3. 供試品溶液的制備

供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25mL，減壓回收至干，殘?jiān)�加�?0mL，加鹽酸2mL，加氯仿20mL，加熱回流30分鐘，放冷，分取氯仿層，水層再用氯仿振搖提取3次，每次10mL，合并氯仿液，減壓回收至干，殘?jiān)�加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL，注入高效液相色譜儀，紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，于波長(zhǎng)437nm處測(cè)定大黃素（C₁₅H₁₀O₅)的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p.469。