山銀花－綠原酸的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定山銀花中綠原酸的含量。

本方法適用于忍冬科植物灰氈毛忍冬 Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.、紅腺忍冬 Lonicera hypoglauca Miq. 或華南忍冬Lonicera confusa DC.的干燥花蕾或帶初開的花。

供試品于具塞錐形瓶中，加50%甲醇超聲提取，過濾，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長327nm處檢測綠原酸的吸收值，計算出其含量。

1. 50%甲醇

2. 0.4%磷酸溶液

3. 乙腈

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈 0.4%磷酸溶液 ＝12 88

2.2檢測波長：327nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過四號篩)0.5g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色瓶中，加50%甲醇溶液制成每1mL含40mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過四號篩)0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率35kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置25 mL棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長327nm處測定綠原酸（C₁₆H₁₈O₉)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p21。