方法名稱： |
復(fù)方靈芝降糖膠囊及靈芝—靈芝酸B的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方靈芝降糖膠囊及靈芝中靈芝酸B的含量。 本方法適用于復(fù)方靈芝降糖膠囊及靈芝科真菌赤芝Ganoderma lucidum及紫芝Ganoderma japonicum的干燥子實(shí)體。 |
方法原理： |
取供試品置索氏提取器中，加氯仿提取，提取液蒸干溶劑，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ�，搖勻，經(jīng)0.45濾膜濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。注入高效液相色譜儀，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，記錄靈芝酸B的響應(yīng)值，計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 乙腈 3. 氯仿 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 E. Merk Lichrospher (250 ×4mm, 5μm)。 1.3紫外檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相： 甲醇 0.5%高氯酸 = 50 50 2.3 柱溫：40℃ 2.4 檢測(cè)波長(zhǎng)：254 2.5 流速：0.7mL/min |
試樣制備： |
1.稱取供試品 復(fù)方靈芝降糖膠囊內(nèi)容物研碎，精密稱取粉末0.5g；精密稱取過(guò)40目篩80℃下干燥6小時(shí)的靈芝藥材0.5g。 2.對(duì)照品溶液的制備 精密稱取靈芝酸B對(duì)照品適量于10mL容量瓶中，以甲醇溶解稀釋至刻度，得到濃度為0.16mg/mL的對(duì)照品溶液。 3.供試品溶液的制備 取供試品置索氏提取器中，加80mL氯仿提取4小時(shí)，提取液蒸干溶劑，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜?mL，搖勻，經(jīng)0.45濾膜濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取上述對(duì)照品溶液1、2、3、5、7μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)器，于254nm檢測(cè)靈芝酸B吸收值，以靈芝酸B的進(jìn)樣量對(duì)靈芝酸B的峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取上述供試品溶液8μL入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)器，于254nm檢測(cè)靈芝酸B吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
丁平，曾元兒，賴小平等. 復(fù)方靈芝降糖膠囊中靈芝酸B的含量測(cè)定. 中成藥，1999，21（11)：566-568. |
