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維生素D2膠丸—維生素D2的測定—高效液相色譜法

醫(yī)藥數據庫中心 藥學論壇 維生素D2膠丸—維生素D2的測定—高效液相色譜法
方法名稱:
維生素D2膠丸—維生素D2的測定—高效液相色譜法
應用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測定維生素D2膠丸中維生素D2的含量。

本方法適用維生素D2膠丸。

方法原理:

供試品和內標均制成甲醇溶液,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測維生素D2(C28H44O)和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值,計算出其含量。

試劑:

1.異辛烷

2. 正己烷

3. 正戊醇

儀器設備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

硅膠為填充劑,維生素D2峰與內標物質峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:正己烷+正戊醇= 997 3

2.2 檢測波長:254nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. 稱取供試品

取裝量差異項下內容物適量,精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取維生素D2對照品和維生素D3對照品25mg,置100mL棕色量瓶中,加異辛烷80mL,避免加熱,超聲處理1分鐘使完全溶解,并加異辛烷至刻度,搖勻,沖氮密塞,避光,0℃以下保存。

3. 內標溶液的制備

取鄰苯二甲酸二甲酯25mg,置25mL量瓶中,加正己烷溶解并稀釋至刻度,即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加正己烷溶解并定量稀釋制成每1mL中約含有0.25mg的溶液,搖勻,精密量取上述溶液與內標溶液各5mL,置50mL棕色量瓶中,加正己烷至刻度,搖勻,即得供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

分別精密吸取上述供試品溶液與對照品溶液,20μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處測定維生素D2和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值,按內標法以峰面積計算,即得。

參考文獻:

中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005年版,二部,p673。

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