洋地黃毒苷的測定—分光光度法

本方法采用分光光度法測定洋地黃毒苷（C₄₁H₆₄O₁₃)的含量。

本方法適用于洋地黃毒苷。

取本品適量，經(jīng)過自裝填料為硅藻土的色譜柱分離后，收集部分經(jīng)純化，加入新制的堿性三硝基苯酚試液，搖勻，在22-25℃的暗處放置30分鐘，照紫外-可見分光光度法，立即在485nm波長處，測定吸光度，計算，即得。

1. 乙醇

2. 堿性三硝基苯酚

3. 三氯甲烷

4. 苯

1. 可見分光光度計

2. 自制色譜柱

取長約200mm，內(nèi)徑約25mm、下端具有活塞的色譜管，底部填少許脫脂棉，取處理過的硅藻土（取色譜用的硅藻土150g，加稀鹽酸1000mL，煮沸10分鐘，放冷，濾過，用水洗滌至洗液遇pH試紙顯中性，在105℃干燥后，再在500℃熾灼2小時，放冷)2g，加水1mL，充分混合，分次裝入色譜管內(nèi)，每次均用平頭玻璃棒輕壓使平；另取處理過的硅藻土3g，加甲酰胺2mL與水1mL，充分混勻，同法裝柱，上覆一小塊脫脂棉，輕壓使平。

供試品溶液的制備

精密稱取本品10mg，置50mL量瓶中，加三氯甲烷10mL溶解后，加苯（同上法處理)稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，加入色譜注中，以苯（同上法處理)-三氯甲烷（3：1)洗脫，流速為每分鐘不超過4mL，收集洗脫液于250mL量瓶中，至近刻度時，另加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

供試品的測定

精密量取上述洗脫液25mL與對照品溶液5mL，分別置錐形瓶中，在水浴上蒸干，殘渣中各加乙醇0.5mL，蒸干，放冷至室溫精密加入70%乙醇5mL，密塞，在22-25℃放置15分鐘，并時時振搖，在精密加新制的堿性三硝基苯酚試液3mL，搖勻，在22-25℃的暗處放置30分鐘，照紫外-可見分光光度法，在485nm波長處，依法測定吸光度，計算，即得。