苯甲酸雌二醇原料藥－苯甲酸雌二醇－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定苯甲酸雌二醇原料藥中苯甲酸雌二醇的含量。

本方法適用于苯甲酸雌二醇原料藥。

供試品經(jīng)甲醇溶解并定量稀釋，加入內(nèi)標(biāo)后再經(jīng)甲醇定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處檢測苯甲酸雌二醇的峰面積，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 丙酸睪酮

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按苯甲酸雌二醇峰計算應(yīng)不低于4500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20

2.2 檢測波長：230nm

2.3 柱溫：室溫

1. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取丙酸睪酮約48mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為內(nèi)標(biāo)溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取苯甲酸雌二醇對照品25mg，置25mL量瓶中，加甲醇微溫使溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品25mg，置25mL量瓶中，加甲醇微溫使溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長230nm處測定苯甲酸雌二醇（C₂₅H₂₈O₃)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.319。