醫(yī)學(xué)全在線
醫(yī)學(xué)全在線首頁-醫(yī)師-藥師-護士-衛(wèi)生資格-高級職稱-考試題庫-網(wǎng)校-考研-圖譜-下載-招聘  
分類
國家級省級浙江省各省雜志
科技核心北大核心CSCDCSCD擴展
工具
期刊知識寫作指導(dǎo) 論文投稿推薦期刊
期刊驗證論文檢測 錄用通知往期目錄
SCI
SCI指導(dǎo)影響因子
期刊點評基金動態(tài)
其它
經(jīng)濟教育計算機
建筑體育農(nóng)業(yè)
北京|天津|河北|山西|湖北|江蘇|安徽|山東|上海|浙江|江西|福建|湖南|寧夏|內(nèi)蒙古|河南
四川|重慶|貴州|云南|遼寧|吉林|廣東|廣西|海南|陜西|甘肅|新疆|青海|衛(wèi)生部直屬|黑龍江|兵團
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 醫(yī)學(xué)論文 > 論文投稿 > 正文:醫(yī)學(xué)免費論文:天花粉蛋白誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及APC基因去甲基化
    

醫(yī)學(xué)免費論文:天花粉蛋白誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡及APC基因去甲基化

來源:本站原創(chuàng) 更新:2013-9-27 論文投稿平臺

M1:TCS處理前甲基化產(chǎn)物;U1:處理前非甲基化產(chǎn)物;M2:80 mg/L TCS處理后甲基化產(chǎn)物;U2:80 mg/L TCS處理后非甲基化產(chǎn)物;N:水對照;PM:甲基化對照;PU:非甲基化對照

3 討論

TCS為247個氨基酸殘基組成的單一多肽鏈, TCS屬于RNA N-糖苷酶型,專一水解核糖體28S rRNA第4324位腺苷酸的N-C糖苷鍵,從而引起核糖體某些區(qū)域構(gòu)象的改變,影響核糖體的生物學(xué)功能,從而發(fā)揮腫瘤抑制作用[3]。TCS對HeLa細(xì)胞增殖有明顯抑制作用,呈量效關(guān)系。TCS濃度與HeLa細(xì)胞增殖抑制率存在線性回歸關(guān)系(P<0.01),TCS 160 mg/L作用72 h抑制率最大,為79.79%。

一個細(xì)胞周期包括有絲分裂期(M)和分裂間期(G1、S、G2),調(diào)控關(guān)鍵在分裂間期。TCS作用HeLa細(xì)胞48 h后,隨TCS濃度增大,S期細(xì)胞百分比對照組明顯增加(P<0.01),G2/M期細(xì)胞明顯減少(P<0.05)。提示HeLa細(xì)胞阻滯于S期,不能順利地進入G2/M期。細(xì)胞的DNA不能在S期得到準(zhǔn)確的復(fù)制,從而影響細(xì)胞增殖。細(xì)胞周期的進行由不同的周期蛋白(Cyclins)所調(diào)控。TCS作用于何種周期蛋白及其作用機制尚需進一步研究。

細(xì)胞增殖失控和凋亡受阻是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的主要原因,抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是腫瘤治療的重要手段之一。TCS能誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡,且TCS濃度與凋亡率之間存在量效關(guān)系。有研究表明,天花粉蛋白具有核酸內(nèi)切酶功能,能夠切割細(xì)胞DNA超螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細(xì)胞損傷[4]。另外,TCS可能通過與受體結(jié)合,引起細(xì)胞內(nèi)信號途徑的激活或抑制,從而啟動細(xì)胞內(nèi)的凋亡信號,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[5]醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站quanxiangyun.cn。

最近研究直接分析了基因啟動子的CpG島甲基化,并與雜合性丟失或突變分析相結(jié)合, 證實啟動子高甲基化是抑癌基因失活的第三種機制,并且在某些情況下是抑癌基因失活的唯一機制[6-7]。甲基化的核苷酸序列并未改變,僅通過個別堿基的修飾影響基因轉(zhuǎn)錄,且甲基化過程是可以逆轉(zhuǎn)的。APC基因是Wnt信號傳導(dǎo)通路中重要的抑癌基因,該基因啟動子甲基化引起的基因表達缺失可導(dǎo)致Wnt信號傳導(dǎo)通路的異常從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。APC基因啟動子高甲基化及基因轉(zhuǎn)錄缺失已見于結(jié)、直腸癌、食道癌、胃癌、肺癌乳腺癌、胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、T淋巴細(xì)胞瘤等腫瘤[2]。本課題組以往研究發(fā)現(xiàn)APC基因啟動子高甲基化在宮頸癌組織標(biāo)本DNA中為頻發(fā)事件(95例宮頸癌標(biāo)本陽性率為56.8%),在宮頸癌各階段均有發(fā)生,且APC甲基化陽性率隨腫塊增大及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而增高[8]。逆轉(zhuǎn)APC基因啟動子高甲基化狀態(tài),從而使APC基因轉(zhuǎn)錄激活,恢復(fù)APC基因表達,可能為宮頸治療提供新的途徑。本研究發(fā)現(xiàn),TCS處理前,HeLa細(xì)胞APC基因啟動子處于半甲基化狀態(tài),即MSP檢測APC基因啟動子甲基化產(chǎn)物及非甲基化產(chǎn)物均為陽性。20、40 mg/LTCS處理細(xì)胞48 h后甲基化狀態(tài)未改變。80 mg/L TCS處理HeLa細(xì)胞48 h后,處于半甲基化狀態(tài)的APC基因啟動子出現(xiàn)了去甲基化(圖1)。APC基因啟動子甲基化可導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄失活而致APC mRNA和APC蛋白表達缺失。當(dāng)APC蛋白缺失,則不能和β-catenin結(jié)合,累積的β-catenin轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核和Tcf4結(jié)合成復(fù)合體,啟動增殖相關(guān)基因(如C-MYC)轉(zhuǎn)錄,最終導(dǎo)致細(xì)胞生長失控[9]。而APC基因啟動子去甲基化可恢復(fù)HeLa細(xì)胞中APC基因表達,并恢復(fù)HeLa細(xì)胞膜上β-catenin的表達[10]。TCS誘導(dǎo)APC基因啟動子去甲基化作用可能為TCS抑制HeLa細(xì)胞增殖的作用機制之一。王艷華等[11]發(fā)現(xiàn)TCS 對HeLa細(xì)胞中啟動子發(fā)生子甲基化失活的TSLC1(Tumor suppressor in lung cancer1) 基因也有去甲基化作用。TCS去甲基化作用為其抗宮頸癌作用提供了新的機制,也為TCS抗宮頸癌臨床應(yīng)用提供了新的實驗依據(jù)。

現(xiàn)今最常用的甲基化抑制劑為5-氮雜-2′-脫氧胞苷等胞苷類似物,由于較強致突變性臨床應(yīng)用受限。TCS作為引產(chǎn)藥已應(yīng)用于臨床,在抗絨癌方面研究也相當(dāng)廣泛,其副作用較一般化療藥明顯為小。TCS具有抑制宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖的作用,可抑制細(xì)胞周期,誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡及APC基因去甲基化,有良好的臨床應(yīng)用前景。其早日應(yīng)用于臨床抗宮頸癌治療,將為宮頸癌患者康復(fù)帶來新的希望。


上一頁  [1] [2] [3] [4] [5] 下一頁

...
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP備12017320號
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會員實名網(wǎng)站 360認(rèn)證可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗證