第三章 中藥藥理實驗設(shè)計
第一節(jié) 中藥藥理作用的特點
提問：與化學(xué)合成藥相比，中藥藥理作用特點主要表現(xiàn)在哪些方面？
1、中藥作用的兩重性
中藥對機體既可產(chǎn)生治療作用又可產(chǎn)生不良反應(yīng)。
在疾病的治療原則上，傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)特別強調(diào)既要治病求本，又要標本同治，即所謂“急則治其標，緩則治其本”。由于中藥作用的多效性，應(yīng)用中更能顯示其標本兼顧的優(yōu)勢。如清熱藥治療感染性疾病，既能通過解熱、鎮(zhèn)痛等作用緩解發(fā)熱、頭痛等癥狀，產(chǎn)生對癥治療，又能通過抗菌、抗病毒等作用產(chǎn)生對因治療。
（*解釋中藥作用的多效性：
中藥成分復(fù)雜，一味中藥本身就是一個小復(fù)方，導(dǎo)致中藥作用的多效性。
如：人參中已發(fā)現(xiàn)皂苷、揮發(fā)油、多糖、有機酸、微量元素等，其中人參皂苷有30余種，作用各不相同，人參全藥應(yīng)用時對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、物質(zhì)代謝等均可產(chǎn)生影響。
相比而言，西藥也可同時表現(xiàn)幾種作用，如阿托品有解痙、抑制腺體分泌等多種藥理作用，但從作用機理分析，都是M-R阻斷作用。因而，中藥作用的面比西藥要廣泛得多。)
中要之有毒無毒、十八反、十九畏、禁忌等，強調(diào)了中藥的不良反應(yīng)和毒性，傳統(tǒng)口服給藥方法顯示中藥具有毒性低，不良反應(yīng)少的特點。近年來，隨著中藥單體制劑和靜脈注射劑的應(yīng)用，中藥的不良反應(yīng)和毒性問題也越來越突出，常見有胃腸道反應(yīng)、過敏反應(yīng)、肝腎毒性等。
2、中藥作用的差異性
中藥作用的差異性表現(xiàn)在種屬差異和個體差異。
（1)中藥藥理學(xué)是實驗藥理學(xué)，通過研究中藥對動物（正常動物和病理模型動物)的作用來揭示中藥藥理作用的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)。
大多數(shù)中藥對人和動物的作用基本一致，如動物實驗發(fā)現(xiàn)黃連有抗心律失常作用，臨床用于治療心律失常也有效；丹參對人和動物抗血栓作用一致等。
但差異性也同樣存在，如人口服茯苓煎劑可出現(xiàn)利尿作用，但家兔和大鼠灌胃均未發(fā)現(xiàn)有明顯的利尿作用。
由此提示，動物實驗結(jié)果尚不能完全顯示中藥對人的作用�？煽紤]是方法學(xué)的問題影響了中藥作用在動物身上的表達。
（2)中藥作用的個體差異除與年齡、性別、精神狀態(tài)等因素有關(guān)外，中醫(yī)藥理論還特別強調(diào)人的體質(zhì)對用藥的影響，如陽盛陰虛或陽虛陰盛之體，其實質(zhì)尚待研究。
（ *中藥作用的差異性可理解為作用的相對不穩(wěn)定性
中藥的藥理作用相對不穩(wěn)定，不同批號的藥物其作用表現(xiàn)較大的差異性。主要由于不同批號藥物因品種、產(chǎn)地、采收季節(jié)、炮制方法、工藝等原因，影響有效成分含量所致。)
3、中藥作用的量效關(guān)系
中藥藥理作用存在量效關(guān)系。然而，由于方法學(xué)等問題，大多數(shù)中藥尤其是粗制劑的有效劑量的范圍往往比較窄，量效關(guān)系很難表現(xiàn)。某些中藥有效成分作用的量效關(guān)系比較明確。
對化學(xué)藥物而言，劑量和效應(yīng)間的相關(guān)性是基本規(guī)律，即在一定劑量范圍內(nèi)，機體對藥物的反應(yīng)大小與藥物的劑量成正比。
但對中藥而言，盡管在一定條件下也可以表現(xiàn)這樣的關(guān)系，但有時量效關(guān)系不典型，常出現(xiàn)小劑量和大劑量作用相反的情況。如人參對離體心臟的作用小劑量興奮，大劑量抑制；木香總生物堿小劑量使離體兔耳血管擴張，大劑量卻收縮。
原因：主要由于中藥的多成分性，特別是可能有對抗作用成分的存在，使中藥量效關(guān)系更為復(fù)雜。
4、中藥作用的時效關(guān)系
中藥藥理作用存在時效關(guān)系，某些中藥有效成分或注射劑，可通過藥代動力學(xué)的研究，顯示其時效關(guān)系（時量關(guān)系)。但中藥煎劑口服給藥作用的潛伏期、峰效時間以及生物半衰期等是經(jīng)常困擾我們的問題。在尚無理想方法揭示中藥粗制劑時效關(guān)系的情況下，近來有學(xué)者通過中藥血清藥理研究，提出多數(shù)中藥煎劑給動物灌胃后1—2小時采血，可能得到血藥濃度較高的血清。起效較慢的中藥灌胃，每日2次，連續(xù)給藥2日，第3日給藥1次，即連續(xù)給藥5次，可基本達到穩(wěn)態(tài)血藥濃度。
（中藥作用的時效關(guān)系可理解中藥為何作用相對緩慢、溫和
同化學(xué)合成藥物相比，大多數(shù)中藥起效慢，有些需經(jīng)多次反復(fù)給藥才顯示藥理作用。如鉤藤煎劑對自發(fā)性高血壓大鼠連續(xù)灌服5周才見血壓明顯下降。
中藥的作用還多表現(xiàn)溫和，作用持續(xù)時間相對較長。如人參能增強心肌收縮力，但與西藥強心苷相比作用較弱；天麻對實驗性癲癇的作用較苯妥英鈉慢，但持續(xù)時間長。)
5、中藥作用的雙向性
中藥具有雙向作用，同一種中藥可產(chǎn)生相反的藥理作用。中藥作用的雙向性與所用劑量大小和所含不同化學(xué)成分有關(guān)，可出現(xiàn)小劑量興奮，大劑量抑制，或大劑量興奮，小劑量抑制的現(xiàn)象。如人參對中樞神經(jīng)系統(tǒng)既有興奮作用又有抑制作用，既有升壓作用又有降壓作用。人參這種雙向作用的產(chǎn)生與所用劑量和不同化學(xué)成分有關(guān)。一般認為，人參小劑量興奮中樞，大劑量抑制中樞；以Rb1為代表的人參二醇型皂甙和以Rg1為代表的人參三醇型皂甙，對中樞的作用相反，Rg1有興奮作用，Rb1則為抑制作用。
中藥的雙向調(diào)節(jié)作用一詞曾被廣泛使用，其嚴格的定義是指某一中藥既可使機能亢進狀態(tài)向正常轉(zhuǎn)化，也可使機體從機能低下狀態(tài)向正常轉(zhuǎn)化，因機體所處病理狀態(tài)之不同而產(chǎn)生截然相反的藥理作用，最終使機體達到平衡狀態(tài)。通過嚴格實驗設(shè)計來證明中藥的這種雙向調(diào)節(jié)作用的例子并不多。
（補：詳細解釋中藥的雙向調(diào)節(jié)作用
雙向調(diào)節(jié)作用：同一中藥，既可使機體機能亢進狀態(tài)向正常狀態(tài)轉(zhuǎn)化，又可使低下的機能狀態(tài)向正常狀態(tài)轉(zhuǎn)化，即調(diào)節(jié)截然相反的兩種病理狀態(tài)。
如：人參對低血壓或休克患者可使血壓回升，而對于高血壓患者則常表現(xiàn)降壓作用。
枳實在胃腸運動呆滯時，表現(xiàn)興奮作用，可促進胃腸道的推進性運動，而在胃腸平滑張力過高，呈痙攣傾向時，又具有解痙止痛作用。
雙向調(diào)節(jié)的機理尚未完全清楚。具體藥物應(yīng)具體分析，但與中藥的多成分性和機體的機能狀態(tài)具有密切關(guān)系。
1)同一中藥中，有時存在作用相反的兩種成分。
人參皂苷Rg1有中樞興奮作用，Rb1有中樞抑制作用；當(dāng)歸揮發(fā)油，阿魏酸抑制子宮平滑肌的作用，另有一些水溶性或醇溶性的非揮發(fā)性物質(zhì)具有興奮子宮平滑肌的作用。
2)當(dāng)作用相反的兩種成分同時作用于機體時，機體的反應(yīng)在很大程度上取決于當(dāng)時的機能狀態(tài)。
機體的機能狀態(tài)對藥物反應(yīng)性影響，早在本世紀五十年代已由Wilder氏提出，稱原初值定律（Law of initiate value)，認為當(dāng)機體受到刺激（藥物作用)時，如果當(dāng)時的狀態(tài)處于興奮時（即原初興奮水平較高)則對興奮性刺激的反應(yīng)性較小，而對抑制性刺激的反應(yīng)較強，反之，原初水平較低時，則對抑制性刺激的反應(yīng)較弱，而對興奮性刺激的反應(yīng)較強。
如：在心血管方面，人參既有增強心肌收縮力的作用（人參三醇型皂苷為主)，又有擴張血管的作用（人參二醇型皂苷為主)。當(dāng)血壓過低或休克時，衰弱心臟對人參強心成分的反應(yīng)增強，因而衰現(xiàn)血壓回升，反之，當(dāng)血壓升高時，血管痙攣，對人參擴張血管的成分反應(yīng)增強，因而血壓下降。)
6、中藥藥理作用與中藥功效的關(guān)系（一致性、差異性)
提問：何謂中藥藥理作用？何謂中藥功效？
中藥藥理作用是借助現(xiàn)代科學(xué)方法（現(xiàn)代科學(xué)知識和實驗手段)對中藥作用的再認識。其主要從實驗藥理學(xué)開始，進一步研究對人體的作用和作用機制。
中藥功效是我國勞動人民在長期與疾病作斗爭中不斷總結(jié)出的對藥物作用性質(zhì)的認識。它是以病理狀態(tài)的人為對象，從臨床觀察總結(jié)出的藥物作用和作用機理。
中藥的功效是中藥對人體作用的反映，而中藥的藥理作用同樣是中藥對機體作用的反映，盡管由于理論體系不同，兩者在語言表述方面不一樣，但其實質(zhì)應(yīng)該是一致的，所表達的都是中藥對機體的作用以及機體對藥物的作用。但兩者所處歷史階段科學(xué)發(fā)展水
平不同，研究手段不同，語言表述也不同，因此對藥物作用的認識必然是既有相關(guān)性，又有不完全一致之處。
1)中藥藥理作用與功效的相關(guān)性
幾十年來，隨著中藥藥理研究的不斷深入，通過對大量同類功效中藥的藥理作用進行分析、比較和歸納，不難看出，中藥的功效是其藥理作用的體現(xiàn)。中藥藥理作用和中藥功效往往一致。如解表藥抗病原微生物、抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛，及提高機體免疫功能等作用。如：
具有解表功效的中藥：麻黃、桂枝、柴胡、生姜、薄荷等，大多含大量揮發(fā)油，有擴張外周血管，興奮汗腺分泌，并有一定解熱、抗病原微生物等作用。
具有瀉下功效的中藥：大黃、芒硝、番瀉葉等，大多具有瀉下作用。
2)中藥藥理作用與功效的差異性
（中藥藥理作用與中藥功效之間存在差異性（中藥的功效是中藥對人體作用的反映，理論上應(yīng)同用現(xiàn)代科學(xué)方法發(fā)現(xiàn)的藥理作用結(jié)果完全一致。但事實上，從目前已有的中藥藥理研究的結(jié)果來看，盡管兩者具有明顯的一致性，已如上述，但另一方面，也都或多或少地存在著兩者結(jié)果的差異性)一方面，中藥藥理研究結(jié)果未能證實與某些中藥功效相關(guān)的藥理作用。如中醫(yī)認為，大多數(shù)數(shù)辛溫解表藥具有較強的發(fā)汗作用，但除麻黃、桂枝、生姜等被證實具有促進汗腺分泌或擴張血管促進發(fā)汗外，其他解表藥則未（或尚未)被證實有促進汗腺分泌作用。另一方面，通過現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)了某些與傳統(tǒng)中藥功效無明顯關(guān)系的藥理作用。如：黃連：功效：清熱燥濕、瀉火解毒、殺蟲。藥理研究發(fā)現(xiàn)，黃連具有廣泛的抗病原微生物作用，對革蘭氏陽性、陰性細菌、某些病毒和多種致病性皮膚真菌、阿米巴原蟲均有抑制作用，并有抗炎、鎮(zhèn)靜、降體溫、利膽、健胃、降壓、抗心律失常和擴張冠脈等作用�，F(xiàn)代藥理關(guān)于心血管作用的發(fā)現(xiàn)，在古代醫(yī)籍中并無明確記載。)
主要指：現(xiàn)有藥理實驗所發(fā)現(xiàn)的某些中藥的作用在古代醫(yī)籍中并無明確的記載；古代醫(yī)籍中所記載的某些中藥的功效目前尚未能被藥理實驗結(jié)果所證實。如：
黃連：功效清熱燥濕，瀉火解毒、殺蟲
藥理作用：抗病原微生物作用、抗類、解熱、降壓、抗心律失常，抗癌等。其對心血管系統(tǒng)藥理作用歷代本草均來明確記載。從發(fā)展角度看，此差異性是某些中藥作用的新發(fā)現(xiàn)，新進展。
提問：試分析中藥藥理作用與功效的差異性產(chǎn)生原因？
3)中藥藥理作用與功效與尚存在差異性原因
①不同給藥途徑形成的差異
歷代文獻中所載的中藥功效是通過傳統(tǒng)的給藥途徑，觀察人體對中藥的反應(yīng)所得到的結(jié)果，現(xiàn)代藥理可以采用注射等多種其它途徑給藥。
如：枳實、青皮因含有對羥福林，靜注可激動腎上腺素α-R，產(chǎn)生明顯升壓作用；口服給藥該成分易被堿性腸消化液破壞而不起作用。
桃仁提取物靜注可用于治療纖維化，所含大量苦杏仁苷可大部分的原形排出，少量在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為無毒的硫氰酸鹽排出體外；但該藥不能口服，因口服時苦杏仁在胃腸道內(nèi)轉(zhuǎn)化為氫氰酸，量大時足以致死。
②動物實驗或體外實驗同人體效應(yīng)的差異
A動物實驗的結(jié)果多數(shù)可在人體重復(fù)，但由于種屬差異，病理模型、手術(shù)、麻醉等實驗操作，動物實驗有效而臨床無效的情況也偶有出現(xiàn)。
如：丹皮酚對某些動物有降壓作用，而對人體卻無效；垂盆草治肝炎，總黃酮部分動物試驗有效，但臨床卻無明顯效果。
B體外實驗排除了體內(nèi)多種因素的干擾，結(jié)果易于分析，重復(fù)性好，用藥量和用動物省，在中藥藥理研究特別是機理研究中具有重要的地位。但體外實驗結(jié)果同體內(nèi)實驗不一致現(xiàn)象時有發(fā)現(xiàn)（體外實驗受影響因素與體內(nèi)試驗不盡相同)
如：現(xiàn)氣藥陳皮、青皮等對胃腸平滑肌的作用，離體實驗都表現(xiàn)抑制作用，這主要是其橙皮苷和對羥福林等成分對平滑肌的作用；口服該類藥物的煎劑，在一般情況下易出現(xiàn)胃腸運動興奮效應(yīng)，其原因是除了這些成分的吸收作用可能會引起平滑肌抑制外，藥物所含揮發(fā)油對胃腸道粘膜的刺激，會通過局部腸壁內(nèi)的反射引起胃腸道平滑肌興奮（驅(qū)風(fēng)作用)。
丁香體外對胰酶消化淀粉，蛋白質(zhì)和脂肪都有抑制作用，但丁香浸出液給犬灌胃后，胃蛋白酶活力明顯升高。
又如：中藥中有些成分本身作用并不明顯，體內(nèi)代謝后才表現(xiàn)藥理作用，這種作用只有通達體內(nèi)實驗才能得到反映，如梔子苷利膽作用很弱，而其代謝產(chǎn)物京尼平卻有很好的利膽作用。因此，動物實驗?zāi)壳拔茨茏C實的功效，不能輕易地否定。
③中藥某一有效部位或有效成分同全藥作用的差異。
①中藥有些有效成分（或部位)基本上可以代表全藥或全藥某一方面的作用。
如：麻黃堿基本上可代表麻黃的平喘作用；小檗堿可以代表黃連的抗菌作用，青蒿素可以代表青蒿的抗瘧作用。
②有些成分的作用與全藥并不相同，這可能有兩種情況：
A、某些中藥內(nèi)存在相互對抗性成分，全藥使用時其中某一成分作用被掩蓋。
如：麻黃中含麻黃次堿能降低血壓，而麻黃并無這種作用，其原因是麻黃中含有大量升高血壓的麻黃堿。
B、有些成分含量較少或活性較低，全藥使用時其活性難以被檢測出來，經(jīng)過分離用純度較高的提取物實驗時，其作用方顯示出來。
如：當(dāng)歸所含阿魏酸具有抗血小板聚集和抗血栓形成作用，因而具活血化瘀功效；甘草雖也含阿魏酸，但因量少，全藥活血化瘀療效并不明顯。
四氫巴馬汀不僅在延胡素內(nèi)有，在黃連、黃柏等藥內(nèi)也含有，但含量極低，故黃連，黃柏并無明顯鎮(zhèn)痛作用。
總之，中藥中某一成分綜合作用的結(jié)果。生物活性強含量高的成分在全藥中可起主要作用。
（小結(jié)：原因：是多方面的，其中最重要的原因是：歷代文獻中所載的中藥功效是通過傳統(tǒng)的給藥途徑，觀察人體對全藥的反映所得到的結(jié)果，這同現(xiàn)代藥理研究可以通過口服、注射等多種給藥途徑，體內(nèi)、體外多種實驗方法，觀察對象——動物；實驗材料可以是全藥也可以是多種不同提取物。)
中藥藥理學(xué)補充和完善了傳統(tǒng)中藥的功效理論。
4)中藥藥理作用的研究為中藥功效的現(xiàn)代表述起溝通作用
中藥功效是以中醫(yī)藥學(xué)的術(shù)語表達的，是藥性理論在具體藥物上的反映；中藥藥理作用是借助現(xiàn)代科學(xué)知識和技術(shù)手段得出的結(jié)果，以現(xiàn)代科學(xué)的術(shù)語進行表達，以使中醫(yī)藥理論更廣泛地被當(dāng)今世界理解和接受。
現(xiàn)已揭示的中藥藥理作用與功效相關(guān)性及內(nèi)在聯(lián)系，溝通了兩者之間的關(guān)系，利于中藥的推廣應(yīng)用，也為指導(dǎo)臨床處方譴藥，提高療效提供了理論依據(jù)。
如：柴胡的保肝利膽作用與疏肝解郁功效；丹參的改善微循環(huán)、抗血栓形成作用與活血化瘀功效。
5)中藥藥理作用研究促進中藥功效的發(fā)展
中藥的傳統(tǒng)功效是古代醫(yī)家從臨床經(jīng)驗總結(jié)而來的，隨人們認識水平及科學(xué)發(fā)展，對同一中藥功效認識也不盡相同（更加深入、全面、正確)。
中藥藥理學(xué)運用現(xiàn)代科學(xué)知識和實驗手段研究中藥作用及其機理，為不斷發(fā)現(xiàn)中藥的新作用、新用途，豐富中藥功效主治的內(nèi)容起著極重要作用。
如：雷公藤，近代藥理研究發(fā)現(xiàn)具抗炎、免疫抑制、抗腫瘤等作用，用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等多種疾病取得良好療效。絞股藍降血脂而用于治療高脂血癥。
第二節(jié) 影響中藥藥理作用的因素
影響中藥藥理作用的因素主要有：藥物因素、機體因素、環(huán)境因素。
一、藥物因素
（一)中藥基原
基原—原植物、動物、礦物
主要表現(xiàn)：品種混亂、假藥
1、品種混亂：出現(xiàn)代用品，混淆品和混雜品。
1)代用品 與正品有關(guān)似化學(xué)或分和作用的親緣品種
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同屬不同種混用 用川姜樸代厚樸 同木蘭屬
同科不同屬混用 用馬尾連代黃連 同毛莨科
用正品的非入藥部位代入藥部位 黃連葉代根莖
2)混淆品 外形與正品相似，相混作為正品使用，造成張冠李戴
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無毒品的混淆
3)混雜品 正品藥中混入其它少量藥物，影響正品劑量，從而影響療效
連錢葉中混入馬蹄草
由于品種混亂，所含化學(xué)成分含量差異大，從而影響了其藥理作用。
如 正品大黃—掌葉大黃，唐古特大黃中，結(jié)合型蒽苷含量高，瀉下作用明顯。
混雜品種—華北大黃、天山大黃中，結(jié)合型蒽苷含量低，瀉下作用差。（見表)
2、 假藥 唯利是圖者采用貴重藥材的偽品：如土豆代天麻
表：不同品種大典蒽醌含量及瀉下作用比較
| 品種 | 結(jié)合型蒽醌含量（%) | 瀉下作用ED50（mg/kg) |
| 掌葉大黃 | 2.00 | 326~493 |
| 2.91 | ||
| 4.44 | ||
| 唐古特大黃 | 3.16 | 437~1072 |
| 0.82 | ||
| 0.94 | ||
| 藥用大黃 | 1.69 | 678 |
| 2.13 | ||
| 1.29 | 3579 | |
| 華北大黃 | 0.32 | >5000 |
| 天山大黃 | 0.90 | >3500 |
（二)、產(chǎn)地
歷代醫(yī)家都重視藥材產(chǎn)地，許多名貴材都有特定的產(chǎn)地（某地產(chǎn)某種藥材，因其質(zhì)量高、療效好，因而素有盛名)故歷史上早已形成“道地藥材”的概念，古時藥店門口掛上“道地藥材”的牌子；此外，在臨床處方中常在藥名前冠以產(chǎn)地：浙貝、川黃連、廣陳皮等。
近代研究表明：藥理作用決定于中藥所含成分的質(zhì)和量。成分則受地區(qū)的自然地理環(huán)境（土壤、水質(zhì)、氣候、日照、雨量)等影響，尤其是土質(zhì)成分明顯影響著中藥化學(xué)成分的質(zhì)和量，故產(chǎn)地不同，藥材的效用就有差異。
如黨參由于產(chǎn)地不同，其藥理作用有差別：璐黨參的解熱與抗炎作用顯著；板黨參有一定的鎮(zhèn)痛作用；文黨參鎮(zhèn)痛作用顯著。
吉林省七個地區(qū)所采人參莖葉樣品中，人參皂苷含量從7.15~16.3%不等。
（三)、采收季節(jié)
各種植物的根、莖、葉、花、果、種子都有一定的生長和成熟時期，所以各中藥適宜的采收時間隨植物種類和入藥部位而有所不同。
我國勞動人民積累了很多經(jīng)驗“春采茵陳夏采蒿，知母黃苓全年刨，九月中旬摘菊花，十月上山采連翹”，這是山西藥農(nóng)的經(jīng)驗。
現(xiàn)代研究證明：藥物采收季節(jié)大體確定一個原則，就是選擇植物有效成分含量最高時采收（因藥理作用與其有效成分含量多少一致)，而有效成分含量高低隨季節(jié)及入藥部位不同植物各部分不同生長期而異。所以，可以用植化方法先測定有效成分在不同期植物中含量，再確定采收季節(jié)。
人參—八月采收含人參皂苷22.6%；1月采收含人參皂苷7%
青蒿—青蒿素在7~8月花前葉盛期含量最高，達6%。
現(xiàn)狀（存在問題)：中藥中已搞清有效成分者不多；搞清有效成分在植株生長發(fā)育過程中變化規(guī)律不多，所以，目前多數(shù)中藥的采收還是按傳統(tǒng)經(jīng)驗結(jié)合植物生長一般規(guī)律而判定采收季節(jié)。
（四)、貯藏條件
藥材因受生長條件限制，季節(jié)性很強，貯藏不當(dāng)，易發(fā)生霉爛、變質(zhì)、蟲蛀等現(xiàn)象而直接影響藥理作用和臨床療效。
如含揮發(fā)油藥材（冰片、樟腦)可被氧化、分解或自然揮發(fā)；苦杏仁中苦杏仁苷（止咳平喘有效成分)在貯存中受溫度、濕度等因素影響，易被苦杏仁酶等分解，苦杏仁苷含量可降低105%~18.5%；刺五加貯存時間起過3年或在高溫（40~60℃)，高濕（相對濕度74%以上)，日光照射等條件下貯存6個月，其所含丁香苷幾乎消失殆盡。
故藥材的貯藏應(yīng)采取措施：及時采收加工、妥善保管（干燥、通風(fēng)、避光)、定期檢查。
（五)、炮制
中藥炮制是我國特有的一門制藥技術(shù)，已有二千多年的歷史，對于這一豐富的民族遺產(chǎn)，目前尚不能用現(xiàn)代科學(xué)全面地加以說明，但迄今為止的化學(xué)、藥理、臨床等方面的研究已表明，炮制經(jīng)驗大多是有價值的，炮制過程對化學(xué)成分含量，藥理作用確有明顯的影響。其中也有少數(shù)不合理的，應(yīng)加以改革和改進。
現(xiàn)代研究表明，炮制對藥理作用的影響有以下三個方面：
1、消除或降低藥物的毒性（減毒、去毒)：
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如附子：烏頭堿 烏頭原堿（毒性降低為1/2000)，強心成分消旋去甲烏藥堿耐熱，不為炮制所破壞。芍藥：安息香酸（苯甲酸)對胃有刺激作用，且可增加肝臟對該成分的解毒負擔(dān)。炒后安息香酸含量降低，對胃的刺激性也減輕。有效成分芍藥苷未被破壞。
2、增強療效（增效)：
中藥具有多成分、多效性、炮制可使其中某一成分作用更突出。
如延胡素：醋制品鎮(zhèn)痛作用強于生品。因為有效成分為元胡乙素，游離生物堿難溶于水，醋炒后，延胡素中生物堿與醋酸結(jié)合成易溶于水的醋酸鹽，煎劑中溶于水的生物堿含量增加，鎮(zhèn)痛作用增強。
黃苓：蒸、煮品抗菌作用強于生品。因為炮制后被破壞黃苓酶（黃苓酶能促進黃苓苷分解，有效成分減少)，有利于有效成分的保存。
3、改變藥材成分的組成，加強或突出某一作用：
如大黃：生大黃主要含結(jié)合型蒽苷—瀉下作用；
熟大黃經(jīng)炮制后結(jié)合型蒽苷減少1/2，而抗菌成份游離型蒽苷含量增加，抗菌作用增強。
生曬參炮制成紅參后，單體成分增強五種特殊成分：人參皂苷Rh2、人參炔三醇、人參皂苷Rh1、Rg2、Rg3。其中人參皂苷Rh2對癌細胞增殖有抑制作用。
4、改進切制工藝，增加藥效
由于歷史條件限制，古代流下來的加工炮制方法不盡合理，不一定都有科學(xué)性，我們不能照搬硬套。
如：中醫(yī)鉤藤只用其鉤，加工費時費力，現(xiàn)證明帶鉤的莖也有作用，可減少炮制程序。
遠志無必要去心，連翹也不必去心等。
（六)、劑型和制劑
同一種中藥，制成不同劑型，由于制造工藝不同，給藥途徑不同，往往影響藥物的吸收和血液中有效成分的濃度，故可直接影響藥理作用的強度和性質(zhì)。
枳實、青皮水煎液口服未見有升血壓記載，但靜脈注射卻表現(xiàn)出明顯的升壓作用，說明近年來隨對藥物的效成分的提取及滅菌技術(shù)上的進步，不僅提高了某些古方的療效，而且出現(xiàn)了一些新作用，擴大了臨床應(yīng)用范圍。
現(xiàn)代制藥要求更高：一方面，同一中藥的不同劑型，由于制造工藝和給藥途徑不同，影響藥物的藥動學(xué)和藥效學(xué)過程。另一方面，同一中藥，同一劑型，不同廠家或同一廠家的不同批號產(chǎn)品影響療效與毒性，故為保證不同廠家不同批次的同名產(chǎn)品有相同療效，應(yīng)采用“生物利用度”來表示其效價，加強質(zhì)量控制，各廠家必須按《藥典》或衛(wèi)生部門規(guī)定的《藥品標準》的規(guī)定生產(chǎn)，這對指導(dǎo)中成藥制劑和統(tǒng)一產(chǎn)品的規(guī)格起到重要作用。
（七)、劑量、煎煮方法和條件
劑量：指成人一日的用藥量。在一定范圍內(nèi)，藥物劑量的大小與其的效成分在血液中濃度的高低及其作用強度呈依賴關(guān)系；劑量過小，不出現(xiàn)效應(yīng)；劑量過大，可能出現(xiàn)中毒癥狀。所以常用劑量的確定，是以藥理毒理研究及臨床反復(fù)實踐確定的。
煎煮方法和條件：中藥最習(xí)用的是水煮煎湯。目前湯劑仍用得最多、最廣泛。煎煮講究火候、時間：解表藥火力要強，時間要短；補益藥火力要溫和，時間需稍長。湯劑煎煮所用水量、火侯、時間長短不同，直接影響藥物有效成分的溶出和藥效的發(fā)揮。
如：經(jīng)典法（濾液中后下大黃)煎液中大黃酸及總蒽醌的溶出量最多，比混煎法（四味藥不分先后同時煎)分別多14%和11%，后下法（在藥渣中后下大黃)含量居中。
（八)、配伍
中藥配伍使用，對藥效及毒性有著重要影響（第六章中藥復(fù)方藥理將詳細敘述)。
二、機體因素
包括生理情況和病理狀態(tài)。
1、生理情況的影響
1)年齡不同，對藥物的反應(yīng)不同
兒童期：處于生長發(fā)育時期，器官發(fā)育不完全（善)，特別是肝腎功能尚不完善，影響藥物代謝、排泄
老年人：肝腎功能減退，也影響藥物代謝、排泄，對藥物更敏感、易中毒，藥量應(yīng)相對減少。
2)性別不同
女性：激素水平、月經(jīng)、妊娠、分娩、哺乳等時期，對不同藥物敏感性不同。
如：紅花、麝香興奮子宮，甚則引起痙攣；莪術(shù)、姜黃等干擾孕激素；芫花、甘逐、丹皮酚等影響子宮內(nèi)膜和胚胎的營養(yǎng)；半夏可致畸；催吐藥、峻瀉藥禁用于孕婦，以免導(dǎo)致流產(chǎn)。
3)精神狀態(tài)
中醫(yī)認為：喜、怒、憂、思、悲、恐、驚七情對藥物作用有影響。
現(xiàn)代研究認為：病人樂觀情緒有利于調(diào)動體內(nèi)的積極因素，增加自身免疫能力，提高療效。
如：安慰劑—不含活性成分，非真正藥理作用，而是由于醫(yī)生的暗示所引起對病人有利的影響。
4)藥物作用的個體差異
遺傳起決定性作用，有量和質(zhì)的兩種表現(xiàn)：
在量的差異方面：
高敏性：某些病人對藥物敏感性高，等量的藥物可以引起和一般病人性質(zhì)相似但強度更大的藥理效應(yīng)的毒性。
耐受性：與上相反，對藥物敏感性低，多次應(yīng)用后須加大藥量才能達到相似藥理作用強度。
在質(zhì)的差異方面：
主要是變態(tài)反應(yīng)（過敏反應(yīng))：西藥青霉素、中藥口服人參糖漿、靜滴生脈液都有過敏反應(yīng)報道。
2、病理狀態(tài)的影響
1)某些藥物對異常機體有效，對正常機體無影響。
如黃苓對正常體溫度無降低作用，只對發(fā)熱病人有解熱作用。五苓散對正常犬或大鼠無利尿作用，但對臨床上水腫、小便不利的病人有利尿作用。
2)肝、腎功能不全病人
肝、腎是藥物消除的兩大重要器官，肝代謝藥物（肝藥酶)、腎可排泄藥物。當(dāng)肝、腎功能不全時，藥物消除時間延長，豐衰期延長，毒性增加，因而給藥間隔時間和劑量要相應(yīng)改變。
3)機體機能狀態(tài)不同，藥物作用有別
玉屏風(fēng)散能使機體低下的免疫功能增強，又能使過亢的免疫功能趨向正常（雙向調(diào)節(jié)作用)。
三、環(huán)境因素
包括：地理條件、氣候寒暖、飲食起居、家庭環(huán)境等。
環(huán)境有時辰節(jié)律，機體的生理活動也隨晝液交替而周期變化，藥物作用及毒副反應(yīng)為也隨之變化而有差異。
自然界存在有許多奇怪現(xiàn)象：嬰兒出生率以早晨和傍晚兩個時辰最高；醫(yī)院病人的死亡率卻總是早上6時和下午4時出現(xiàn)高峰；人的體溫早晨4時最高，下午6時最低，相差1℃；公雞fo曉前啼叫；夜來香卻總是傍晚時播香。這些說明：生物的生命活動與時間密切相關(guān)，有一定內(nèi)在規(guī)律可尋。
中醫(yī)認為：服藥要順應(yīng)四時之序，一日之中因晝夜晨昏的交替對人體氣血運行、臟腑功能活動及疾病變化的影響。也表明中藥療效與用藥時間有密切關(guān)系。
現(xiàn)代研究認為：生物晝夜節(jié)律—生物的多種生物活動如體溫、腎上腺素、皮質(zhì)激素分泌水平在24h內(nèi)有規(guī)律地波動。
藥物晝夜節(jié)律—藥物的作用和毒性隨外界晝夜的變化而出現(xiàn)有規(guī)律的波動。如雷公藤毒性以中午12時給藥小白鼠死亡率最高，20點~次晨8點最低。
參附注射液小鼠靜脈注射的LD50：0時給藥為9.862g/kg；12時給藥為 8.308g/kg。
機理：生物的晝夜節(jié)律影響到藥物的吸收、代謝和排泄速率，也必將影響藥物效應(yīng)。
意義：根據(jù)藥物的晝夜節(jié)律，制定出最佳給藥劑量、給藥間隔、次數(shù)，當(dāng)機體對藥物敏感時減少藥物用量，反之。以達到高效低毒的目的。
藥理學(xué)有門分支稱為“時辰藥理學(xué)”，研究時間生物學(xué)在藥理上的應(yīng)用。
第三節(jié) 中藥新藥藥理學(xué)、毒理學(xué)研究的基本內(nèi)容
一、中藥新藥的概念
1、什么是中藥新藥：新藥是指我國未上市過的藥品，已生產(chǎn)的藥品，凡增加新適應(yīng)證、改變給藥途徑和改變劑型的亦屬新藥范圍。
2、注冊分類：共分11類（2002年12月1日施行)
3、新藥研制做到兩個突出，兩個基本原則：
1)突出一個新字，既要有創(chuàng)新，要避免低水平重復(fù)；
2)突出中藥特色，要在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)方法，在繼承基礎(chǔ)上不斷創(chuàng)新。
同時，要做到安全，有效兩個基本原則。
二、中藥新藥藥理學(xué)研究的基本內(nèi)容
（一)主要藥效學(xué)研究
1、主要藥效的確定
藥效研究應(yīng)回答被研制的新藥是否有效？為何有效和什么成分有效？
選擇什么樣的實驗方法和觀察指標呢？
1)根據(jù)中藥主治、功效，針對性地選擇兩種或多種試驗方法，其中一種必須是整體正常動物或動物病理模型。
2)中藥成分復(fù)雜，藥理作用廣泛，應(yīng)選擇多指標驗證其藥效，并分清主次，突出重點，間接證實其藥效的外圍實驗可酌情選作。
如：抗癌中藥多從祛邪、扶正、增效、減毒四個方面研究，祛邪為主：即抑制或殺滅癌細胞；扶正；增強免疫功能，提高機體的抗病能力；增效：對癌癥患者化療與療效具有增效作用；減毒：對癌癥患者化療與放療具有減輕不良反應(yīng)作用。有明確的祛邪作用，可能開發(fā)為抗癌藥物，祛邪作用不明顯者，但具有扶正、增效或減毒作用，只能作為抗癌輔助藥應(yīng)用。
2、試驗方法的選擇
有整體實驗與離體實驗兩大類。
1)以整體實驗為主 包括正常動物和病理模型動物，其優(yōu)點是保持機體本身的完整性，包括神經(jīng)反射、體液聯(lián)系、完整的內(nèi)臟功能，試品的代謝過程更符合于臨床情況；劑量和給藥途徑可以和臨床參比，結(jié)果更接近臨床實際。
2)以離體實驗為輔 離體器官包括離體心臟、離體主動脈條、離體腸管、離體子宮等。其優(yōu)點是可按要求嚴格控制實驗條件，重復(fù)性較好，用藥量小，節(jié)省動物，所得結(jié)果容易分析。但不符合臨床情況。
通過這兩類實驗，基本可以明確試品的藥理作用，無論哪一種方法，必須是方法先進、可靠、操作規(guī)范、結(jié)果可信。在此基礎(chǔ)上，進一步在組織水平、細胞水平、亞細胞水平乃至分子水平上探討試品的作用機理。
3、動物模型的選擇
模型選擇標準應(yīng)首選符合中醫(yī)臨床證或病的動物模型。
例如：根據(jù)中醫(yī)辯證莊施治原則“虛則補之”，研究補益藥最好采用適當(dāng)?shù)摹疤撟C”模型。因為正常動物屬陰陽平衡，正氣不虛的機體，所以對許多臨床病人有效的補益藥在正常動物身上常常看不到應(yīng)有的補益效果。參芪注射液對“氣虛證”小鼠免疫功能的影響，研究證明，在“氣虛證”動物模型上，免疫指標比正常動物普遍低下，在施以參芪注射液后，多項免疫指標明顯回升，而對正常動物則不如虛證模型動物升高明顯。
選擇或建立動物模型時盡量選擇與人體發(fā)病機理相近的模型。如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎選擇大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎模型。
當(dāng)選擇符合中醫(yī)臨床病或證的模型有困難時，可選用與其病或證相似的病理模型和方法進行試驗，如研究治療痞滿證的新藥，可參考治療肝胃不和證、脾虛證的模型，以證實所研究藥物“消痞”、“消脹”的作用。
4、觀測指標
應(yīng)選用特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好、客觀、定量地反映藥效的先進指標，并進行多指標觀測。
5、受試藥物
中藥材應(yīng)經(jīng)過生藥學(xué)鑒定（品種、產(chǎn)地)；中藥制劑的處方、劑型、制備工藝及藥品質(zhì)量應(yīng)基本穩(wěn)定；與臨床用藥制劑相同；根據(jù)受試藥物特點和試驗方法，藥效試驗可選用不含賦形劑的中藥制劑或提取物。
一般要求兩種給藥途徑，并設(shè)兩個以上劑量組，靜脈注射給藥及離體試驗宜用水溶性高，不含干擾雜質(zhì)（如無機離子)，PH值接近中性的藥液。粗制劑水溶性差者，可僅用口服給藥。
6、實驗動物
選用具有動物飼養(yǎng)合格證的動物。對其品系、性別、年齡、體重、雌雄、健康狀態(tài)、飼養(yǎng)條件及動物來源等應(yīng)有記錄。如：大鼠Wistar品系，雌雄不拘，2~3月齡，150g~180g。小鼠，昆明種，抗炎實驗用雄性。
還應(yīng)注意：1)根據(jù)所研究試品的藥理作用，選用與人的疾病特點和機能反應(yīng)近似的實驗動物。如降壓藥研究，宜選用貓、狗、大鼠，不宜使用家兔，因家兔血壓不穩(wěn)定，對某些藥物不敏感；過敏性哮喘藥研究，宜選用豚鼠；子宮平滑肌研究，宜選用家兔等；催吐實驗宜選用犬、貓、鴿子，不宜選用家兔或鼠類，因為后者無嘔吐反應(yīng)。
2)選用遺傳背景明確、模型和指標顯著且穩(wěn)定，解剖生理特點符合試驗?zāi)康膶嶒瀯游�。還應(yīng)考慮動物是否易得、是否經(jīng)濟、是否容易飼養(yǎng)管理。如抗AS藥研究，選用鵪鶉、鴿子、家兔，經(jīng)造模后脂質(zhì)斑塊易于形成，以鵪鶉優(yōu)于家兔，其易于飼養(yǎng)，經(jīng)濟（2元/只)，用藥量�。ㄔ炷Ｓ媚懝檀枷牧可�)。
7、給藥劑量與途徑
各試驗至少設(shè)兩個劑量組，一般應(yīng)設(shè)三個劑量組，因量效關(guān)系起碼要三個劑量組才能顯示出來，其中一個劑量應(yīng)相當(dāng)于臨床劑量（一般按公斤體重計算)的2~5倍。小鼠可10~15倍。
給藥途徑一般采用二種，其中一種應(yīng)與臨床相同。
8、實驗結(jié)果的處理和分析
計數(shù)資料（質(zhì)反應(yīng)指標，是以“有”或“無”的方式出現(xiàn)，如死亡、睡眠、惇厥等)：常采用x2檢驗進行顯著性測定。
計量資料（量反應(yīng)指標，可以數(shù)量表示藥理反應(yīng)，如血壓、心率、尿量、體溫等)：常用t檢驗方法，如實驗組數(shù)多也可采用F檢驗。
實驗結(jié)果分析，最好以圖表形式表達，圖或表的內(nèi)容通常包括組別，每組動物數(shù)，給藥劑量及所測指標的平均值與標準差（)，顯著性測定結(jié)果（P值)。
（二)一般藥理研究
指主要藥效以外的廣泛藥理作用研究。一、二類新藥申報有此要求。主要觀察三個方面：
1、神經(jīng)系統(tǒng)：觀察給藥后的行為變化及活動情況
2、心血管系統(tǒng)：觀察給藥后的對心電圖及血壓等的影響。
3、呼吸系統(tǒng)：觀察給藥后的對呼吸頻率、節(jié)律及深度的影響。
（三)藥代動力學(xué)研究
研究新藥在體內(nèi)吸收、分布及排泄。
中藥材中提取的單一化學(xué)成分可測定有關(guān)參數(shù)。
三、中藥新藥毒理學(xué)研究的基本內(nèi)容
中藥毒理學(xué)研究是預(yù)測中藥安全性的重要手段，通過毒性研究可以了解中藥毒性反應(yīng)的性質(zhì)、毒性程度、毒害發(fā)展過程及毒性作用是否可逆，從而在臨床試驗時注意和采取預(yù)防措施，避免產(chǎn)生毒副作用，確保安全用藥。這是新藥審批不可缺少的環(huán)節(jié)。
毒理學(xué)研究基本項目通常分為：急性毒性試驗，長期毒性試驗和特殊毒性試驗。以前兩種為常用。
（一)急性毒性試驗
1、目的1)估測試品毒性強度：常用動物的致死量表示。根據(jù)量效曲線的斜率最大，劑量稍有變化，死亡率變化較大，此點反應(yīng)靈敏、準確、嚴重性好，因此常以動物半數(shù)致死量LD50作為衡量毒性程度的主要指標。藥物的LD50愈小，說明毒性越大。
2)觀察試品的毒性癥狀：記錄并了解試品對器官組織損傷部位、損傷程度，反應(yīng)出現(xiàn)時間，持續(xù)時間和恢復(fù)時間以及死亡時間。
3)計算治療指數(shù)：治療指數(shù)（Therapeutic index，簡稱TI)，等于LD50/ED50。TI可提供新藥粗略的安全范圍。應(yīng)注意L幫ED50的測定需在同種動物身上，觀察同一試品，采用同一給藥途徑，在相同試驗條件下進行。
4)為藥效學(xué)及長期毒性試驗選擇劑量提供參考：藥效學(xué)劑量可選擇在 1/8~ 1/10LD50之間，在沒有任何參考資料的情況下，長毒劑量在1/3~1/15 LD50之間。
2、半數(shù)致死量（LD50)的測定
1)實驗動物：多用小鼠6~8周齡，體重18~22g，雌雄各半，正規(guī)動物室飼養(yǎng)的健康合格小鼠。
2)給藥方法：采用兩種以上途徑，其中包括推薦臨床用藥的給藥途徑。常采用灌胃和注射給藥。如中藥制劑水溶性好的。應(yīng)測定靜注的LD50，水溶性差，無法通過注射途徑（皮下、腹腔或靜脈)給藥時，可處考慮只用胃腸道給藥。給藥容積：小鼠ig不超過0.4ml/10g；注射給藥不超過0.5ml/只。
3)觀察時間：各中藥毒性反應(yīng)出現(xiàn)快、慢不同，如果代謝產(chǎn)物中毒，毒性反應(yīng)可能出現(xiàn)晚些，所以急毒觀察時間不少于7d，如遇遲發(fā)性或進行性反應(yīng)時，還要適當(dāng)延長至14 d。
4)觀察指標：給藥后觀察反應(yīng)情況，記錄死亡時間、死亡前癥狀，各組動物的死亡數(shù)。死亡動物應(yīng)及時進行尸檢，發(fā)現(xiàn)病復(fù)器官應(yīng)做病理組織學(xué)檢查。
5)環(huán)境條件的控制：室溫過涼、過熱都會影響藥物吸收，從而影響藥物的毒性反應(yīng)。宜控制在20℃上下。動物的食量不僅影響體重，也影響毒性反應(yīng)，要求給藥前禁食24h，以保證饑飽一致。
6)測定方法：如Bliss法、簡化機率單位法、孫氏綜合法（改良冠氏法)等。申報新藥推薦Bliss法。不同方法各有特點，實驗設(shè)計不完全相同，但方法上大同小異：首先通過預(yù)試找出全死、全不死的劑量，正式試驗時在全死和全不死劑量中間插入2~5個劑量組，每組動物（小鼠)至少10只，♂♀各半，各劑量按等比級數(shù)遞增（或遞減)，各劑量組和死亡率之間應(yīng)呈較好的線性關(guān)系。LD50及其可信限的計算可參見實驗教材。
實驗報告需注明日期，動物品系、規(guī)格、數(shù)量、受試物來源及含量、各組動物死亡率，動物中毒表現(xiàn)及致死癥狀等。
實驗報告需注明日期，動物品種、規(guī)格、數(shù)量、受試物來源及含量，各且動物死亡率，動物中毒表現(xiàn)及致死癥狀等。
3、最大給藥量（MTD)測定
多數(shù)中藥毒性較低，口服給藥吸收有限，即使一次給予最大濃度、最大容積（0.5ml/10g)也難以觀察到死亡反應(yīng)，即測不出LD50，可以測定其MTD，以反映受試品的毒性情況。
方法：采用擬推薦的臨床給藥途徑，最大濃度，最大容積，一般擬一日內(nèi)2~3次給予動物。小鼠不少于20只，♂♀各半，連續(xù)觀察7d。以不引起死亡的最大累計劑量作為最大耐受量（含生藥量g/kg表示)，推算相當(dāng)于臨床用量的倍數(shù)。
測定MTD量，同樣也應(yīng)嚴密觀察動物毒性反應(yīng)，要求與LD50測定時的毒性反應(yīng)觀察相同。
（二)長期毒性試驗
如果試品通過藥效學(xué)和LD50測定后，表明其有實用價值（有效，短期使用安全)，可作長期毒性試驗。
1、長期毒性試驗?zāi)康?/p>
1)觀察動物因連續(xù)用藥所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，中毒開始時間及中毒時首先出現(xiàn)的癥狀。
2)確定試品產(chǎn)生主要毒副作用的靶器官，明確毒副作用敏感的指標，供臨床應(yīng)用時監(jiān)測。
3)觀察停藥后組織功能損害的發(fā)展和恢復(fù)情況（可逆性觀察)。
4)確定、無毒性反應(yīng)的安全劑量，即無不良反應(yīng)的最大劑量，為擬定人用安全劑量提供參考。
2、長期毒性試驗的要求
1)動物：至少兩種動物（包括嚙齒類和非嚙齒類)。嚙齒類常用大鼠，6周齡，體重100g左右，動物體重差別應(yīng)控制在平均體重20%范圍內(nèi)，每組不少于20只，♂♀各半，如試驗周期多于90day，每組增加至♂♀各20只（40只)，試驗前至少觀察一周，記錄食量和體重等。非嚙齒類常用狗，4~6個月齡，每組至少4只，♂♀各半。
2)劑量：一般設(shè)三個劑量組。高劑量組應(yīng)產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)或個別動物死亡，即接近最小致死量；低劑量組應(yīng)略高于動物的有效量或臨床試用量而不出現(xiàn)任何觀察指標的異常；中劑量組介于兩者之間，應(yīng)產(chǎn)生輕微毒性反應(yīng)。各劑量差以等片級數(shù)3~5倍，對照組用常水或溶媒。如試品毒性很低，測不出LD50，只設(shè)高低兩劑量組，高劑量組一般為擬用于臨床劑量的50倍以上，并應(yīng)高于藥效學(xué)試驗之高劑量和臨床治療量。
3)給藥途徑和方法：選擇與推薦臨床試驗的給藥途徑相同。口服藥采用灌胃法。給藥期長于90day者，可把藥品摻入水瓶中的飼料中，但摻入藥量不得超過動物每日進食量的10%，以免影響動物的正常營養(yǎng)，而干擾毒性反應(yīng)的判斷，同時應(yīng)保證攝入藥量準確。
4)試驗周期：一般為臨床用藥用期的2~3倍。但三、四類中藥制劑，處方中無毒性藥材，無配伍禁忌，又未經(jīng)化學(xué)處理，難以測出LD50，給藥劑量大于200g/kg，臨床用藥期1~3d者，可免做長期毒性試驗。如大鼠長毒無明顯毒性，可免做狗的長毒。
5)觀察指標
①一般體征、體重、外觀、行為、進食量、糞便等。
②血液學(xué)檢查：RBC、Hb、WBC及其分類，BPC、凝血
③血液生化檢查：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT、堿性磷酸酶ALP、尿素氮BuN、總蛋白TP、白蛋白ALB、血糖GLu、總膽紅素T-BIL、肌酐Gma、總膽因醇T-CHO。
④系統(tǒng)尸檢和病理組織學(xué)檢查：由眼觀察異常的器官應(yīng)重點進行病理組織學(xué)檢查。臟器系數(shù)（心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、睪丸、子宮、卵巢、前列腺、腦)。高劑量組發(fā)現(xiàn)有異常病變時進行病理組織學(xué)檢查（上述臟器及胃、胸腺和可能的靶器官)。
⑤狗要做心電圖。
第四節(jié) 中藥藥理實驗設(shè)計
一、中藥藥理實驗設(shè)計的重要性
實驗設(shè)計是很重要的，中藥藥理研究首要的問題，就是對實驗研究的科學(xué)、合理、周密設(shè)計，因為實驗設(shè)計是實驗過程的依據(jù)，是實驗數(shù)據(jù)處理的前提，也是提高實驗研究質(zhì)量的一個重要保證。
嚴密而合理的實驗設(shè)計，不但可對實驗結(jié)果和誤差有比較準確的估計，最大限度地獲得豐富而可靠的資料，而且還可減少人力，節(jié)省物力和時間，提高工作效率，避免因?qū)嶒炘O(shè)計不當(dāng)，造成人力、物力的浪費，甚至全功盡棄的不良結(jié)果。因此，實驗研究設(shè)計，從中藥藥理實驗研究過程來看，具有非常重要的意義。
二、實驗設(shè)計的原則
為保證實驗結(jié)果的科學(xué)性、正確性、減少誤差和偏因。在實驗設(shè)計時要注意重復(fù)，隨機和對照“三個基本原則”。
1)重復(fù)：一般說來，實驗重復(fù)次數(shù)越多，結(jié)論越正確、越可靠。但重復(fù)次數(shù)越多，所消耗人力物力越大。如何用最少的動物、實驗次數(shù)得到可以信賴的結(jié)果。這是藥理實驗設(shè)計必須要考慮的問題，這應(yīng)按統(tǒng)計學(xué)的要求進行。
每組該用多少動物才能取得可信的實驗結(jié)果，這要根據(jù)觀察指標的性質(zhì)（包括藥物作用的顯著性和結(jié)果的離散度等)和動物種類而定。
如計量研究（以反應(yīng)量作為實驗指標)所用動物：小鼠或大鼠每組應(yīng)不少于10只，豚鼠或家兔每組不少于6只，貓或犬每組不少于4~5只。計數(shù)研究（以反應(yīng)有、無作為指標)所用小鼠或大鼠每組應(yīng)不少于20~30只。
還應(yīng)考慮實驗操作的難易：復(fù)雜的實驗，即使計量實驗用大鼠，5~6只也可以。重復(fù)次數(shù)要根據(jù)實驗要求和性質(zhì)，主要藥效，指標穩(wěn)定者，重復(fù)2~3次即可。
2)隨機：中藥藥理實驗對象為生物樣本，個體差異較大，動物分組必須按隨機原則處理。使每一個體在實驗中都有同等的機會，以減少主觀因素的影響或避免偏性誤差。
常用的隨機方法有：①按隨機數(shù)字表分組法；②分層分組法：小鼠常采用此法。在稱重同時，將體重不同的小鼠分放于不同鼠盒中，相同體重小鼠放在一起；分組時再將相同體重的小鼠分放于不同的鼠盒中，使每只小鼠均有同等機會分配到各組中去。按此分組的結(jié)果，各實驗組小鼠平均體重基本相同。
3)對照：比較研究是科學(xué)實驗不可缺少的條件，沒有比較就沒有區(qū)別，也就談不上科學(xué)性。所以藥效學(xué)實驗設(shè)計必須設(shè)立適當(dāng)?shù)膶φ战M。常用對照組有三種。
①正常對照組：即空白對照組，不加任何處理的正常條件下進行觀察的對照。但試驗操作與給藥組相同，如灌胃給藥生在空白對照只給NS（或溶劑)，以抵消一些非實驗因素（給藥，捉拿等)的干擾。如實驗需手術(shù)者還需設(shè)立假手術(shù)組。
②模型對照組：不用被試品，其他處理與給藥組相同，即經(jīng)受同樣的造模處理。
③陽性對照組：所用藥物是已知藥效確切、藥典收載、部頒標準或正式批準生產(chǎn)的（市場化)同類中藥的西藥。所謂同類，即選用的藥物力求與被研究的新藥主治相同、功效相似，且劑型及給藥途徑均相同者。所用劑量參照被研究新藥臨床等倍量，如被研制新藥中劑量組相當(dāng)于臨床量15倍時，陽性藥也可采用15倍臨床量給予。
陽性對照目的有兩個：其一是檢查方法的可靠性；其二是對此同類新藥之優(yōu)劣及特點。
如：研究某一中藥降血糖作用，觀察對四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降糖作用，可設(shè)立空白對照組：灌胃NS；模型對照組：靜注四氧嘧啶；陽性對照組：灌胃消渴丸，同時靜注四氧嘧啶；給藥組：灌胃被試中藥，同時靜注四氧嘧啶。各給藥組所測得血糖值比較：模型組與空白組比較，以分析模型是否成功；陽性對照組與模型組比較，以分析本方法是否可靠；給藥組與模型組比較，以分析是否有藥理作用；與陽性對照組比較，以分析兩者作用強度如何。
在同次實驗中給藥組與對照組做到“五同”；同時間、同地點、同批動物、同等數(shù)量與同等條件
三、實驗設(shè)計的內(nèi)容
1、明確研究目的和意義：實驗設(shè)計，首先應(yīng)考慮研究目的和意義，根據(jù)研究的中心問題，進行實驗內(nèi)容設(shè)計，做到心中有數(shù)，有的放失。
2、確定實驗組和對照組：實驗組和對照組之間除了處理不同，其他條件均應(yīng)等同。保持實驗可比性的原則。在新藥審批辦法中規(guī)定，新藥的主要藥效作用各項實驗均應(yīng)有空白對照和已知藥物對照。藥理試驗結(jié)果需經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理。
3、確定實驗方法、項目和指標：要有明確的規(guī)定和說明，要注意選擇能反映被研究問題的本質(zhì)的關(guān)鍵指標。藥理作用及其機理能用客觀方法定性地加以測量，取得準確可靠的數(shù)據(jù)。
4、確定實驗對象的種類及數(shù)量：中藥藥理實驗研究對象包括正常動物、麻醉動物及病理模型；既有整體體內(nèi)試驗，也有離體器官、組織或細胞體外試驗等。
盡量研究各種接近中醫(yī)臨床證候的動物病理模型，按中醫(yī)藥治則，觀察中藥藥理與療效，但也不排除對正常動物或離體器官等的作用分析。由于動物實驗和臨床觀察畢竟有一定差別，因此考慮用不同動物多種方法測試，往往是必要的。
要根據(jù)實驗?zāi)康�、方法的指標的要求決定實驗動物、樣本及數(shù)量、計量資料，一般小動物（大、小鼠)每組8—12只，較大動物（兔、狗)每組5—8只是基本的，總量應(yīng)符合統(tǒng)計要求。
5、資料整理和統(tǒng)計：將紀錄的資料作為必要的分析、整理，經(jīng)過恰當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計分析，作出結(jié)論。
思考題：中藥藥理實驗設(shè)計的三個原則是什么？
舉例：
1．目的：探討降脂膠囊調(diào)血脂作用的效應(yīng)。
2.動物模型：采用高脂飼料喂養(yǎng)法復(fù)制大鼠（雄性大鼠)血脂異常模型(高脂飼料配方為：膽固醇2%,豬油10%，膽酸鈉0.2%，甲基硫氧嘧啶0.2%,基礎(chǔ)飼料87.6%)
3.分組及給藥：將50只大鼠隨機分為5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、降脂膠囊低劑量組（每千克體重14克)、高劑量組（每千克體重28克)及陽性藥物血脂康對照組（每千克體重0.12克)，每日上午灌胃方
式給藥，空白組和模型組給以等容積蒸餾水灌胃。給藥6周。各組除空白組每天喂飼普通飼料外，其余各組均自由攝食高脂飼料。
4.觀察指標及方法：
(1)末次給藥后，禁食12小時，斷頭取血，分離血清，分別測定以下指標：
①血脂類：TC、TG、LDL-C、HDL-C、ox-LDL
②氧化類：SOD、MDA
③纖溶類： 6- keto-PGF1а、TXB2、
④內(nèi)皮功能類：ET、NO
（2)用RT-PCR法測定主動脈ET-mRNA水平
5.數(shù)據(jù)處理：SAS軟件系統(tǒng)
四：中藥藥理實驗研究設(shè)計的特殊性
中藥藥理實驗設(shè)計應(yīng)注意其特殊性。尤其是要以中醫(yī)藥的基本理論為指導(dǎo)，設(shè)計既保留中醫(yī)藥傳統(tǒng)經(jīng)驗，又應(yīng)有中西醫(yī)藥結(jié)合特色的方法。在設(shè)計中需考慮以下幾點：
1、中藥質(zhì)量的標準化，避免各種影響因素：中藥生藥品種復(fù)雜，如不經(jīng)品種鑒定，其實驗研究結(jié)果就很不可靠。還有不同的藥用部位、產(chǎn)地、采集季節(jié)、貯藏以及加工炮制等可能會影響到其主要成分的含量和藥理作用。
因此，有時雖為同一名稱的中藥，其實驗結(jié)果各地報導(dǎo)可能不同，甚至相反。除了考慮實驗方法、實驗對象的差異外，上述各因素也應(yīng)重視。
2、結(jié)合中醫(yī)藥基本理論，注意中醫(yī)藥特色：中藥藥理的實驗研究，目前尚未形成獨立的系統(tǒng)方法，可以應(yīng)用現(xiàn)代藥理實驗方法來進行。但若脫離了中醫(yī)藥理論與傳統(tǒng)經(jīng)驗，則往往丟失了中醫(yī)藥的特色。
目前比較成熟的方法是創(chuàng)制類似臨床各“證”的動物病理或生理模型來實驗研究中藥及其復(fù)方的藥理作用。
3、加強多學(xué)科配合，理論密切聯(lián)系實際：中藥藥理研究既驗證中醫(yī)藥理論與經(jīng)驗，又要有所創(chuàng)新。對單味中藥或復(fù)方進行初篩時，可從粗制劑著手，進一步可深入探討其有效成份，發(fā)現(xiàn)新的藥理作用與用途。改進制劑，降低毒性，豐富與提高中醫(yī)藥水平。這些應(yīng)與臨床使用結(jié)合，與多學(xué)科配合才能實現(xiàn)。
4、采用現(xiàn)代化的儀器設(shè)備與方法，不斷提高實驗研究的質(zhì)量與水平：中藥藥理的實驗除采用傳統(tǒng)的一般藥理等指標外，尚需運用生化、免疫、分子生物、生物物理及臨床藥理等新方法，采用
各種現(xiàn)代化的儀器設(shè)備，放射性同位素、高效液相分析儀、電子計算機等新技術(shù)，觀察指標從整體、組織器官、細胞、亞細胞和分子向縱深發(fā)展，有利于闡明中藥作用的本質(zhì)和規(guī)律。
例如：分析“證”的病理生理模型時，常測定各組織器官cAMP、cGMP、前列腺素及各種遞質(zhì)的含量，體內(nèi)或排泄物中腎上腺皮質(zhì)類固醇的含量，這些都必須借助于現(xiàn)代化的手段，認識才能不斷深化。
第五節(jié) 中藥藥理學(xué)研究思路
中藥的療效經(jīng)數(shù)千年的臨床驗證，已無庸置疑，但如何應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)知識和方法使之進一步發(fā)展并闡明其作用機理仍是一個十分重要而且難度很大的課題。
研究的根本目的在創(chuàng)新、發(fā)展，要創(chuàng)新、要發(fā)展，就必然要揚棄一些陳舊、落后、甚至是錯誤的東西，也就是會“走樣”，和原來的有所不同。這是允許的，然而有人一看到“走樣”就搖頭，否定，甚至反對，如對青蒿素的研究就有人看不慣，持否定態(tài)度，認為它“走樣”了，已經(jīng)不能算“中藥”了，難道中藥永遠要保持草根、樹皮的外貌，病人只喝“湯藥”才象用“中醫(yī)”治療嗎？若是如此，中醫(yī)藥學(xué)將會失支其科學(xué)價值而成為“古董”了。
一、中藥藥理研究方法的特點
中藥藥理學(xué)的研究方法，有與藥理學(xué)共同的特點，也有本學(xué)科自己的特點：
1)中藥藥理研究應(yīng)以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)
目前研究中藥藥理途徑有二：一是按西藥藥理學(xué)方法進行研究，其著重是將提取的有效成分，進行深入分析藥理作用及作用機理，在此方面積累了不少資料，取得了不少成績。二是以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，研究中藥的藥理：中藥是祖國醫(yī)學(xué)中一個重要組成部分，歷史悠久，源遠流長。通過幾千年的臨床實踐，每種中藥從性味、歸經(jīng)、功能、主治、用法、用量、配伍、宜忌等，歷代醫(yī)家都有大量論述，這是十分可貴的臨床經(jīng)驗的結(jié)晶，是最樸素也是最真實的記載。如黃芪益氣、大黃瀉下、附子溫里等。幾千年的臨床實踐證明是有效的，所以我們在進行中藥藥理研究時，可以從此得到很多啟示，這是研究中藥藥理的捷徑。有時脫離中醫(yī)理論指導(dǎo)，還會走彎路。！
例1：麻黃堿的發(fā)現(xiàn)：麻黃為常用中藥，中醫(yī)認為麻黃有發(fā)汗解表、宣肺平喘、利水消腫等功能，臨床用于治療風(fēng)寒感冒，胸悶咳喘、風(fēng)水浮腫。
麻黃的主要成分為左旋麻黃堿（麻黃素)，在1887年日本學(xué)者長井長義首先從麻黃中分離得到了麻黃素結(jié)晶（日本素來比較重視漢藥研究)，在長井提到麻黃素的同年，日本三浦謹之助等研究了麻黃素的生理作用，發(fā)現(xiàn)有散瞳作用，但這個作用在當(dāng)時臨床醫(yī)療上價值不大，于是他們對麻黃素的功效表示失望，將之置之一旁。1917年，日本人久保田晴光在研究時，雖然發(fā)現(xiàn)麻黃素有類腎上腺素的交感神經(jīng)興奮作用，但也未引起注意。
麻黃素最重要的藥理作用，是我國老一輩藥學(xué)者陳克恢發(fā)現(xiàn)的。陳自幼勤奮好學(xué)，他舅舅是當(dāng)時頗有名氣的中醫(yī)，受其影響，陳氏也接觸過不少中醫(yī)藥知識，親眼目睹對某些疑難病的神奇療效，也有過在某些方面不如西藥的體驗。中學(xué)畢業(yè)后，到美國留學(xué)，專攻藥科，在大學(xué)期間，較系統(tǒng)地學(xué)習(xí)了有機化學(xué)、植物化學(xué)、藥物化學(xué)，大學(xué)畢業(yè)后，繼續(xù)進行植物化學(xué)的研究，在實踐中他認識到還必須掌握生理、藥理、生化，于是他又進入醫(yī)學(xué)院主攻生理學(xué)和藥理學(xué)，之后他深感醫(yī)藥不分家，又去攻醫(yī)學(xué)博士（M.D)，后來母病危，提前回國（1923年)，到協(xié)合醫(yī)院從事中藥方面研究工作。那時日本的長井已從麻黃中提到麻黃素，但世人并未予以重視。陳氏認為：麻黃的療效經(jīng)幾千年的驗證是確實的，于是他根據(jù)中醫(yī)臨床中麻黃的用途，再度提出麻黃堿，并進行了一系列的藥理實驗并于1924年發(fā)表有關(guān)麻黃研究的論文“麻黃有效成分—麻黃堿的作用”，指出麻黃堿的藥理作用與腎上腺素類似且持久，其功效與交感神經(jīng)興奮劑相同。這是我國學(xué)者發(fā)表的第一篇具有重要影響的中藥藥理研究論文。報告發(fā)表后，引起國際醫(yī)藥界的廣泛注意，迅速在國際上引起巨大反響，形成研究麻黃的高潮。
例2：青蒿素的發(fā)現(xiàn)：始于公元300年左右“肘后備急方”中一句話“青蒿截瘧”。至今仍在江蘇高郵地區(qū)應(yīng)用，中國中醫(yī)研究院據(jù)此從青蒿中提取分離出青蒿素，結(jié)構(gòu)為倍半萜內(nèi)酯，推翻了國外專家的抗瘧藥必須是雜環(huán)的論調(diào)�，F(xiàn)已為世界衛(wèi)生組織肯定。是繼喹啉類藥物之后一個重大突破，它對抗氯喹瘧、兇險惡性瘧疾、腦型瘧疾達到國際水平。
2)實驗的方法是中藥藥理研究的基本方法
現(xiàn)代科學(xué)最基本的方法就是實驗方法。早在十三世紀，羅吉爾.培根曾說：證明前人結(jié)論的唯一方法就是觀察和實驗。哈維通過實驗創(chuàng)立了血液循環(huán)學(xué)說，從而使近代醫(yī)學(xué)宣告走上了實驗科學(xué)的道路，從而取得迅速發(fā)展。
實驗方法是在人為控制的條件下，將自然現(xiàn)象的某一過程表現(xiàn)出來，便于人們反復(fù)觀察，揭示事物的規(guī)律性，特點是客觀性、準確性、重復(fù)性及數(shù)據(jù)化。
3)整體與離體實驗相結(jié)合的方法：
整體與離體實驗是醫(yī)學(xué)研究中的兩大重要途徑，兩者互相補充，可以從不同角度，不同深度研究中藥藥理。
整體實驗比較接近臨床狀態(tài)，適于綜合性研究，所得結(jié)果較為全面，有些可直接為臨床應(yīng)用，對提高療效有積極意義。但整體實驗受體內(nèi)神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)和各種復(fù)雜因素的干擾，較難深入了解事物的本質(zhì)。要分析作用機理時，往往需結(jié)合離體實驗。
離體實驗主要包括離體器官、組織、細胞等，在體外所進行的各種研究，可以從不同層次、不同深度研究，并可排除體內(nèi)各種復(fù)雜因素的干擾，進行直接觀測，獲得準確、精細的結(jié)果。
但也存在一些缺點和局限性，它失去了機體完整統(tǒng)一的內(nèi)環(huán)境和神經(jīng)體液調(diào)控quanxiangyun.cn作用。
中醫(yī)藥學(xué)以整體思想體系為基礎(chǔ)，重視宏觀控制與調(diào)節(jié)。所以，在進行中藥藥理研究時，應(yīng)該以整體實驗為主，必要時配合離體實驗，互相補充。
4)建立“病”與“證”的動物模型：
中藥藥理研究大量利用正常動物進行實驗，取得了許多寶貴的資料，但也已注意到有些中藥對正常動物無作用，而能糾正病理狀態(tài)。如五苓散對健康人、正常小鼠、家兔均無利尿作用，但它可以對有水代謝障礙患者，有利尿作用。
在中藥藥理研究中，目前應(yīng)用較多的動物模型主要有兩類：一類是以“病”的模型，另一類是建立中醫(yī)“證”的動物模型。例如目前復(fù)制的“血瘀”、“陰虛”、“陽虛”、“氣虛”、“血虛”、“脾虛”、“腎虛”、“厥脫證”的動物模型。
二、中藥藥理學(xué)研究思路
1、中藥藥理作用研究必需與證的研究結(jié)合
辨證論治是中醫(yī)認識疾病和治療疾病的基本原則，是中醫(yī)學(xué)對疾病的一種特殊的研究和處理方法�！巴‘愔巍被颉爱惒⊥巍本员孀C為基礎(chǔ)，證藥結(jié)合研究對揭示中藥作用的實質(zhì)意義更大。建立不同證的動物模型是證藥結(jié)合研究的前提。證的模型是在動物身上模擬臨床證候。目前已建立了一些證的動物模型，對中藥藥理作用研究起到了推動作用。舉例。但目前所建立的證還遠遠不能滿足中藥研究的需要。證的研究難度很大，人和動物在生理生化機能等方面盡管有許多相同之處，但在形體、語言、反應(yīng)等方面還有很大差別，理想的證的模型要得到中醫(yī)藥學(xué)界和藥理學(xué)界的認同。
2、中藥分類對比研究
目前對按傳統(tǒng)中藥分類的解表藥、清熱藥、瀉下藥、利水藥、活血化瘀藥及補益藥的藥理作用已基本清楚，但對每一類藥中的分類藥的雙比研究不夠。如辛涼解表藥和辛溫解表藥、涼血止血藥和溫經(jīng)止血藥等藥理作用的異同，尚需研究和歸納。
3、與中藥功效相關(guān)的系統(tǒng)藥理作用研究
每一類中藥、每一味中藥的功效不是單一的，目前的研究往往存在重復(fù)和偏置現(xiàn)象。應(yīng)加強與中藥功效相關(guān)的系統(tǒng)藥理作用研究，全面地揭示中藥作用的實質(zhì)。如：祛痰藥只重視對呼吸道祛痰作用的研究，而對呼吸道外由“痰濁”引起的證的作用研究很少。
4、中藥藥理作用的重新評價性研究
任何一門學(xué)科的建立、發(fā)展和成熟都有一個時間過程。中藥藥理學(xué)是一門年輕的學(xué)科，僅有幾十年的歷史。21世紀回頭看，發(fā)現(xiàn)中藥藥理學(xué)在概念、理論、知識等方面還存在不足，需補充、修正和完善。對中藥作用的機理研究和物質(zhì)基礎(chǔ)研究固然重要，但利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法重新評價中藥的某些基本作用也同樣重要。如清熱藥的抗菌作用，早年水煎劑體外研究結(jié)果在今天受到懷疑甚至否定，但并沒有資料可直接推翻清熱藥的抗菌作用，為此應(yīng)創(chuàng)造可行的實驗方法，重新研究中藥的抗菌作用。
5、中藥毒性研究
6、中藥作用面理及物質(zhì)基礎(chǔ)研究
目的：說明藥物產(chǎn)生作用的靶器官或靶點，以及在靶器官和靶點上如何產(chǎn)生作用，引起效應(yīng)。
影響因素：中藥作用機理研究影響因素多，如制劑、給藥途徑、作用的多效性等。
方法：中藥作用機理及物質(zhì)基礎(chǔ)研究應(yīng)在中藥原藥材、有效部位、有效成分的不同層次上進行，才能接近中藥理論，全面而合理地說明中藥功效產(chǎn)生的作用機理。
第六節(jié) 中藥復(fù)方的現(xiàn)代研究
一、研究意義
1、以藥探理：中藥復(fù)方的研究不在藥而在理，從中醫(yī)臨床選擇經(jīng)典方進行現(xiàn)代藥理研究，以闡明中醫(yī)理論。這種研究思路前段時間國內(nèi)進行地較多。比較典型的例子：
例：
*四君子湯臨床用于脾虛
*藥理研究證實四君子湯能調(diào)節(jié)免疫功能和消化系統(tǒng)。
*結(jié)論：中醫(yī)的脾與消化系統(tǒng)和免疫功能有關(guān)。
2、開發(fā)新藥：新的組方、簡化處方
（1)新的組方：此類新藥必須說明其在療效上、藥動學(xué)上、毒副反應(yīng)上有什么優(yōu)越之處。國家要求既要在組方上符合中醫(yī)理論（辨證立法)，又要在診斷和觀察指標上符合西醫(yī)理論。
例如治療消化道疾病不應(yīng)以中醫(yī)胃脘痛為指標，應(yīng)確定為慢性胃炎、萎縮性胃炎等。
（2)簡化處方：現(xiàn)代一流行說法，“中醫(yī)現(xiàn)代化、中藥現(xiàn)代化”，對此說法爭議很多，理論上可以進行爭論，但在現(xiàn)實中，必須順應(yīng)發(fā)展潮流。
中藥要發(fā)展必須：
滿足患者：現(xiàn)代生活節(jié)奏快，人們不愿花時間去熬藥，還要分清先煎、后下。
滿足醫(yī)生：現(xiàn)在許多西醫(yī)也開中藥方，必須讓醫(yī)生接受處方，認為可信。
滿足市場：必須有利潤，飲片比藥材有利、成藥比單味藥有利。
故應(yīng)簡化處方，改進制劑工藝，批量生產(chǎn)。
例：治療冠心病的蘇合香丸是一大蜜丸，共16味中藥，有芳香開竅，行氣止痛之功，但不利于生產(chǎn)，經(jīng)劃裁后為僅5味中藥的冠心蘇合丸（水丸或膠囊)，繼續(xù)劃裁為蘇冰滴丸，僅兩味中藥（蘇合香、冰片)。藥物減少而療效相差不大，得以大批量生產(chǎn)。
總之不劃裁不可能大量應(yīng)用于臨床。
3、剖析配伍關(guān)系：有利于闡明方劑中各組分在療效上所起的作用，并為改進和精減處方提供依據(jù)。研究內(nèi)容包括兩個方面。
（1)配伍關(guān)系在表面形式上的研究（君臣佐使與七情合和)
A、君臣佐使
例1：麻黃湯：麻黃、桂枝、杏仁、甘草
B、七情合和（歸類)
療效協(xié)同：相須（大黃+芒硝)、相使（白術(shù)+茯苓)
不良反應(yīng)協(xié)同：相反（十八反)
療效拮抗：相惡（人參+萊菔子)
毒性拮抗：相殺、相畏（生姜+半夏；綠豆+巴豆)
（2)配伍效應(yīng)機理分析
A、藥效學(xué)環(huán)節(jié)：藥物通過不同的作用途徑，不同的作用機制產(chǎn)生配伍效應(yīng)。（當(dāng)歸+川芎)
B、藥動學(xué)環(huán)節(jié)：一個藥物影響另一藥物的吸收、分布、代謝、排泄。（研究少)
C、藥劑學(xué)環(huán)節(jié)：共煎效應(yīng)。藥物有兩種方法制備：共煎和單煎共沖，比較二者療效是否一樣，若不一樣，原因？
二、研究中藥復(fù)方的方法
（一)中藥現(xiàn)代研究方法總結(jié)
中藥單味藥有效成分研究
中藥復(fù)方拆方研究
中藥復(fù)方全方研究
1、中藥單味藥有效成分研究
（1)什么是中藥單味藥有效成分研究：從中藥單味藥中尋找具有臨床藥理作用的有效成分。
是中藥現(xiàn)代研究的開始，在中藥現(xiàn)代研究的起步階段主要是主要是這種研究模式。
（2)研究的意義
從大的方面說單味藥有效成分研究將現(xiàn)代科學(xué)引入中藥學(xué)，使古老的中藥學(xué)開始與現(xiàn)代科學(xué)接軌。具體的說有如下意義：
A、揭示單方治病的奧秘：在中藥中有一些方子是一味中藥，在民間驗方中偏多，這些單方的作用與西藥很相似（物質(zhì)單一，作用專一；不辨證論治，而是辨病施治，對病不對人)
B、降低藥用量，提高療效：通過提取的辦法來降低臨床藥用量。當(dāng)用有效成分入藥時，可人為地加大藥用量及改變原藥材各種有效成分之間的比例來提高療效。
C、保證藥材和飲片的質(zhì)量：以往對藥材質(zhì)的檢驗，多以外觀為依據(jù)，主觀性強，客觀性差。當(dāng)明確了藥物的有效成分之后，可通過檢驗其有效成分含量以確保藥材的質(zhì)量，比以往要科學(xué)。
D、擴大藥源：
E、減少或去除毒副作用：將有效成分提取出來，可避免其它共存成分同時進入人體所帶來的毒副作用，減少或去除毒副作用。
F、解釋了一些單味中藥具有多種作用的原因
（3)出現(xiàn)的問題
A、藥材有作用，而提取出的成分無作用
B、有效成分不等同于原藥材
C、純化后的單體有些作用弱于粗提物，有些毒性增強
D、最大的問題：中藥以單味藥形式應(yīng)用于臨床非常少見，主要以復(fù)方的形式應(yīng)用于臨床，不進行復(fù)方研究，無法真正揭示中藥奧秘。
2、中藥復(fù)方拆方研究
（1)什么是中藥復(fù)方拆方研究：將復(fù)方按照其組成拆開來進行研究。
（2)研究的意義：它將中藥復(fù)方引入中藥現(xiàn)代研究的范圍，使人們認識到要揭示中藥治病的奧秘，必須研究復(fù)方。
A、尋找單一有效藥物（靛玉紅的發(fā)現(xiàn))
B、剖析配伍關(guān)系
C、簡化處方（蘇合香丸)
（3)出現(xiàn)的問題
由于拆方研究大多停止在以方中各單味藥為單位的研究水平上，所以碰到很多無法解釋的問題。（排膿散)
3、中藥復(fù)方的全方研究
因拆方研究中碰到了許多無法解釋的問題，人們提出了復(fù)方是黑箱子的理論，開始了復(fù)方的全方研究。
（1)什么是復(fù)方的全方研究：把復(fù)方作為一個不可分割的整體（一個黑箱)，不對其物質(zhì)成分進行研究，而只是對這一整體的藥理作用進行研究。
這種方法擺脫了拆方研究時遇到的問題，而且實驗設(shè)計可做到分子水平，對作用機理的探討可涉及各個方面，所以很快普及開來，目前中醫(yī)院校碩士、博士研究生的論文大多屬于此類。
（2)特點：
A、高水平的藥理研究：很先進的方法。
B、項目眾多的藥理研究：面面俱到。
使我們能站在一個較高的角度，對中藥復(fù)方多方面的作用產(chǎn)生一個較為全面的整體認識。
（3)不足：
不研究復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)，無法明確指出方中什么成分是有效成分，什么是無用成分。這樣不可能真正了解其作用機理。故被西醫(yī)同行戲稱為“一鍋湯研究”。
（二)如何研究中藥復(fù)方
主要是解決認識問題
1、進行多種有效成分研究是中藥復(fù)方現(xiàn)代研究的基本出發(fā)點。
一般來說，中藥復(fù)方的作用是多種有效成分所產(chǎn)生的綜合作用。（單一有效成分的復(fù)方極少，且沒有存在的必要)復(fù)方中單味藥作用不及全方是絕大多數(shù)中藥復(fù)方所具有的共性。
以多味藥組成的中藥復(fù)方，是通過方中各味藥的綜合作用來治病的，這是中藥復(fù)方的基本特點。所以進行多種有效成分研究是中藥復(fù)方現(xiàn)代研究的基本出發(fā)點，不應(yīng)該去從方中尋找單一、高效的有效成分。
2、復(fù)方的作用是將一些不能單獨治療疾病的藥物組織起來，使它們一起共同發(fā)揮作用，以達到治療疾病的目的。（霰彈理論)
霰彈理論：由于中藥復(fù)方多種有效成分中每種有效成分多不能獨立承擔(dān)治療疾病的任務(wù)。所以相對于西藥可獨立承擔(dān)治療疾病任務(wù)的單一成分的作用強度而言，它們作用多是種小而弱的作用，但它們集體的力量卻可以產(chǎn)生一個大而強的作用，從而完成治療疾病的任務(wù)。
打比方：西藥的單一成分就象步槍子彈，威力大，只要命中則非死即傷，但命不中則無作用。
而中藥復(fù)方的多種有效成分就象是霰彈，霰彈中的每個小彈粒單獨來說威力都遠不如步槍子彈，但霰彈因含有多個小彈粒，覆蓋面廣，所以命中率高，而且雖然就一個小彈粒而言，即使命中，也只是一個小的傷害作用，
但霰彈整體造成的則是多部位、大面積、多系統(tǒng)的傷害，其威力不可低估。尤其在射擊多個目標，如一群飛起的小鳥時，霰彈的優(yōu)越性是顯而易件的�？梢姡睆検俏覀儗χ兴帍�(fù)方的形象化理解。
3、何謂中藥復(fù)方中的有效成分？
一個復(fù)方成分之多，足以令人望而卻步，哪些是有效成分？哪些是無用成分？是研究中的一大難點，故提出黑箱理論，但此法實際上不能揭示中藥奧秘，故應(yīng)拋棄。不能避之躲之。
解決的辦法是制定一個標準，以此標準來確定什么是有效成分，什么是無用成分。此標準就是復(fù)方治療的病，即以病定成分。（瀉心湯)
4、中藥有效成分的來源
A、藥材固有的化學(xué)成分
B、加工炮制和煎煮過程的產(chǎn)物
C、腸內(nèi)菌代謝產(chǎn)物
D、吸收入血進入肝臟經(jīng)“首過效應(yīng)”的代謝產(chǎn)物。
5、研究具體方法：血清化學(xué)分析（研究中藥有效成分的切入點)
既然口服中藥的有效成分可能有上述4種來源，可見要想弄清楚一個復(fù)方在體內(nèi)究竟是何種化學(xué)成分起到治療作用，并非易事。幾十年來，在我國一直未能解決這個問題。
現(xiàn)在認為中藥活性成分在血清中，因為無論是藥材中的固有成分、煎煮過程產(chǎn)生的成分或經(jīng)腸內(nèi)菌和肝臟代謝產(chǎn)生的成分，絕大部分成分都需要在吸收入血的才能產(chǎn)生治療作用。血清化學(xué)分析（分析含藥血清中的化學(xué)成分)
靛玉紅的發(fā)現(xiàn)
第七節(jié) 中藥的血清藥理實驗方法
一、中藥血清藥理實驗方法的由來
1.中藥血清藥理實驗方法是一種改良的中藥體外實驗方法。
2.體外實驗的重要性及優(yōu)點
重要性：
體外實驗方法（in vitro)對于藥理學(xué)研究非常重要，特別在細胞、亞細胞、分子等水平進行深入的機制研究，沒有體外實驗是無法實現(xiàn)的。在新藥研究領(lǐng)域，國外目前日益重視體外實驗，包括在細胞模型上的觀察。
優(yōu)點：
* 由于所需樣品量較少，實驗效率高；
* 由于道德上的原因，減少動物的痛苦和犧牲。
3.中藥的體外實驗方法存在的問題：
①中藥粗制劑中含有大量雜質(zhì)，若直接加入體外反應(yīng)系統(tǒng)，其滲透壓、pH值、鞣質(zhì)、無機鹽等許多非特異性理化因素，會嚴重干擾實驗，產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果，故其科學(xué)性難以得到認可。
②近年發(fā)現(xiàn)，中藥口服后其有機成分常在胃腸內(nèi)受到消化液和腸道菌微生態(tài)轉(zhuǎn)化，也就是說中藥中的有效成分并不一定就是在體內(nèi)直接發(fā)揮作用的成分。
例：柴胡皂苷a在胃腸道內(nèi)至少可轉(zhuǎn)化為9種不同化合物吸收；龍膽苦苷在腸道內(nèi)轉(zhuǎn)化成活性成分龍膽堿、龍膽醛。
這就使中藥直接用于體外實驗的價值更產(chǎn)生了問題。
4. 產(chǎn)生
20世紀80年代中期，日本學(xué)者嘗試采用一種新的體外實驗方法來研究中藥方劑的藥理作用，即用中藥方劑給動物口服后，取其血清作為藥物源添加到離體的實驗系統(tǒng)中研究其藥理作用，并提出了血清藥理學(xué)的概念。
該方法的提出者田代真一研究了給予柴苓湯后的家兔血清對成纖維細胞增殖的影響。他在成纖維細胞的培養(yǎng)液中加入給柴苓湯后采集的家兔血清，發(fā)現(xiàn)對成纖維細胞增殖有明顯抑制作用。
而且如果在加入的10%血清中，改變給柴苓湯兔血清和不給藥的正常兔血清的比例，發(fā)現(xiàn)成纖維細胞的增殖抑制依給予含柴苓湯兔血清的比率大小而變化，隨著給藥兔血清比率增大，細胞增殖率降低，說明此作用并非是兔血清的作用，而是柴苓湯的作用。
1984年田代真一在日本國第一屆和漢醫(yī)藥學(xué)會上提出這種實驗方法后，其合理性得到了其他研究者的支持。
例如，在用已知藥物潑尼松龍經(jīng)口給藥后取得的動物血清，以HPLC定量分析其中潑尼松龍的含量，把這種血清加入培養(yǎng)的細胞中，同時以等量的潑尼松龍直接加入為對照，比較這兩種方法以對LPS促有絲分裂因子活性的抑制率，發(fā)現(xiàn)兩實驗系曲線平行。提示血清法和傳統(tǒng)的直接添加法具有較好的一致性�？梢蕴娲褂�。
認為血清添加法可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的直接添加法，且該方法比傳統(tǒng)方法與體內(nèi)給藥的結(jié)果更為接近。并認為這是因為藥物進入人體后，還可能代謝形成或刺激機體產(chǎn)生其他的活性物質(zhì)。
他們認為這對中藥研究十分重要，因為中藥與西藥不同，它不是一個單體化合物，而是大量化合物的混合體，中藥中的每種化合物進入體內(nèi)都可能經(jīng)代謝生成結(jié)構(gòu)不同的其他化合物，在體內(nèi)發(fā)揮藥理作用。用血清藥理學(xué)方法可以反應(yīng)這些變化，而直接添加藥物則不能。
20世紀90年代起。我國學(xué)者也曾有人對此方法的可靠性以及與整體藥效的相關(guān)性方面進行過考察。國內(nèi)學(xué)者經(jīng)過了近十年的時間對此方法進行了較為系統(tǒng)的方法學(xué)研究，目前已進入了推廣應(yīng)用階段。
二、中藥血清藥理實驗的 方法學(xué)研究
中藥血清藥理實驗方法簡單地說是將受試物經(jīng)口給予動物后，取其血清作用藥物源加入離體反應(yīng)系統(tǒng)研究其藥理作用的一種方法。
該方法的基本操作過程包括：
1、確定供血清動物
2、給藥（劑量？次數(shù)？)
3、采血（時間？)
4、分離血清（滅活？)
5、加入離體反應(yīng)系統(tǒng)中實驗觀察（加入量？)或保存
（一)確定供血清動物
選擇什么動物作為含藥血清的供體？用不同種屬動物和人體志愿者的血清觀察對胚鼠成纖維細胞增殖的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其細胞毒作用，似與種屬親緣有關(guān)。與其親緣最接近的動物血清最適于其生長，而與其親緣較遠的動物，只有在低濃度下才可維持細胞正常生長。
雖然如此，這只是決定動物選擇的因素之一。此外還應(yīng)考慮動物的易獲得性和供血量等問題。目前實際工作中用得較多的供血動物還是大鼠。需要多次采血取含藥血清時也可采用家兔或犬。
（二)給藥劑量和次數(shù)
1、給藥劑量：在這一問題上存在不同的看法，在實際工作中差異也很大。從含藥血清加入培養(yǎng)基中將被稀釋考慮，給藥劑量應(yīng)當(dāng)加大，根據(jù)這一思路提出了一個公式：
給藥劑量=臨床常用量*動物等效劑量系數(shù)*培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度（動物等效劑量*培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度)。
如某中藥常用量為10g，約為0.2g/kg，供血清動物如選用大鼠，其等效劑量系數(shù)粗略地以5計，體外反應(yīng)系統(tǒng)中血清添加量以20%計（含藥血清稀釋5倍)，則給藥劑量應(yīng)為：0.2g/kg*5*5=5g/kg。實踐證明，這一公式基本可行。
如給予大鼠不同劑量的苦參、仙鶴草，觀察含藥血清對肝癌腹水癌細胞體外生長的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以上述公式計算給藥劑量得到的含藥血清對腫瘤細胞體外生長有抑制作用（P<0.05)，而比以參考公式計算給藥劑量小1/2得到的含藥血清無明顯作用（P>0.05)。
但按以上公式給藥，對藥味多、劑量大的復(fù)方在給動物灌胃時可能有困難。也有人認為給藥劑量不必很大，作為常規(guī)，采用整體動物實驗的有效劑量即可。而在有些實驗中也確有采用很小的劑量而實驗成功的。
這可能主要取決于受試物本身的活性，有人曾在家兔含藥血清的抗菌試驗中觀察到，作為對照的頭孢拉定在20mg/kg，即相當(dāng)于臨床劑量（按kg體重折算)的1/2時，其含藥血清已對金葡菌表現(xiàn)出明顯的抗菌作用，而受試中藥黃芩和苦參在高達10g/kg，即相當(dāng)于臨床劑量30倍時，僅表現(xiàn)出微弱作用。
所以在判斷藥效時應(yīng)注意，如果給藥劑量小于理論上應(yīng)給予的劑量得到陰性結(jié)果，并不能排除屬于因體外反應(yīng)系統(tǒng)中藥濃度過低引起的假陰性結(jié)果。
量效關(guān)系的研究還發(fā)現(xiàn)，血清藥理實驗也與中藥整體實驗一樣，在量效關(guān)系方面不如合成藥物那樣具有良好的線性關(guān)系，劑量過大，常反使藥效減弱。
2、給藥次數(shù)：研究表明，在多數(shù)情況下，多次給藥優(yōu)于單次給藥。
例如以桂枝湯的體外抗病毒實驗為例，家兔單次口飼給藥后1小時、2小時、3小時所采集的含藥血清并無抑制副流感病毒致細胞病變的作用；而每日1次，連續(xù)3天，末次給藥后2小時的血清，有明顯抑制副流感病毒致細胞病變的作用。
雖然并非所有情況下多次給藥都優(yōu)于單次給藥，“優(yōu)于”的程度也有差異。它理論上取決于以下兩個因素：其一是藥物有無蓄積性。沒有蓄積性的藥物，增加給藥次數(shù)并不會提高血濃度。但據(jù)分析，大多數(shù)藥物是具有一定的蓄積性的。其二是多次給藥后，是否會刺激機體產(chǎn)生體內(nèi)自體活性物質(zhì)（如激素或免疫活性物質(zhì)等)以及這些物質(zhì)在該藥效試驗中的作用大小。
（三)采血時間與方法
1、采血時間：動物給藥后，應(yīng)在什么時間采血制備含藥血清？如何保證采血時具有較高的血藥濃度。實踐證明，很難定一個統(tǒng)一的時間，各藥不同，各個指標不同。
例如大川芎丸兔血清抗血小板釋放5-HT作用的時效關(guān)系研究和大川芎丸兔血清阻滯兔血管內(nèi)皮膚細胞攝取Ca的時效關(guān)系研究，兩個指標都在0.5小時已達到最佳采血時間；而桂枝湯大鼠血清抗HSV-1病毒致細胞病變的作用以給經(jīng)后4—6小時的血清為最佳。
所以有人認為：在采用血清藥理學(xué)方法進行一項試驗前，進行時效關(guān)系研究是必要的，以找出給藥后采血的最佳時間。
但從現(xiàn)有資料分析，半數(shù)以上藥物給藥后的高峰在1—2小時，目前大多采用這一時段采血。我國一些學(xué)者根據(jù)對大量已知藥物的藥動學(xué)資料的回顧性分析，提出一個對大多數(shù)藥物適用的中藥血清藥理研究通法給藥方案：
即每日給藥2次，連續(xù)給藥3天以上，末次給藥1小時后采血。按以上方案給藥，理論上80%以上的藥物成分的藥濃度可達單次給藥的峰濃度以上，可免去時效關(guān)系的預(yù)實驗。
（四)分離血清
1、采血方法：必須在嚴格無菌操作下進行。動物麻醉后，常規(guī)皮毛消毒，采血部位一般可取腹主動脈或頸總動脈，家兔或選心臟取血。血樣置于離心管或其他可離心的容器中。靜置2小時以上，待血塊收縮良好后，3000r/min，10—15分鐘無菌分離血清，置冰quanxiangyun.cn箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
2、關(guān)于滅活：滅活的目的是希望消滅或減少空白血清（指未給藥情況下的血清)的活性。通常采用的方法是55℃30分鐘滅活。在特殊情況下還可采用其他方法滅活，如用去蛋白的方法滅活。
滅活是否應(yīng)作為血清藥理實驗方法的常規(guī)措施是我們面臨的一個問題。實驗證明，滅活可以降低血清對細胞的毒性，并可在一定程度上去除正常血清活性對藥效的干擾，這是有利的一面；
但另一方面，它也有可能消除（可部分消除)藥效。因此，進行中藥血清藥理學(xué)實驗時，血清滅活與否，應(yīng)視具體實驗而定。不可一概而論。
（五)關(guān)于血清的添加量 和方法
在體外細胞培養(yǎng)實驗中特別要注意血清的添加量。影響血清添加量的因素主要有：一是異種動物血清對細胞的毒性作用，添加量過大，細胞不能正常生長或存活，致使血清的加入量受到限制。
此外，血清對培養(yǎng)細胞還可能出現(xiàn)其他干擾，如有報道空白血清對自由基損傷的血管內(nèi)皮細胞有一定的保護作用，培養(yǎng)基中如加入血清量過多可使該細胞模型難以形成。
所以在正式實驗之前，宜先粗略觀察不同添加量的空白血清對培養(yǎng)細胞的影響，確定正式試驗時的血清添加量。
此外，血清藥理實驗也與中藥的整體實驗一樣，含藥血清添加量與藥效的關(guān)系，不如合成藥物那樣具有良好的平行關(guān)系。血清的加入方法，可以直接加入，也可以制成凍干粉加入。
（六)含藥血清的保存
實驗證明，保存對藥效的影響，視藥物不同、環(huán)境條件和測試指標不同而異。含藥血清經(jīng)保存后是否影響藥效與所測指標有關(guān)，在這方面尚未找到明顯的規(guī)律性。為保證實驗成功，建議在進行血清藥理時，以采用新鮮血清為宜。在4℃環(huán)境下，保存時間一般不宜超過5天；在低溫條件下，可適當(dāng)延長保存時間。
（七)注意事項
1、空白血清本身的活性：含藥血清的作用必須與空白血清做嚴格對照。對照血清必須與藥物血清完全一致，如果含藥血清取自模型動物，對照血清也必須取自模型動物。
2、關(guān)于如何設(shè)置不同劑量組
給藥劑量不同：實驗時應(yīng)注意給藥組與對照組采血時間的一致性，因服藥后不同時間采取的血樣，藥效強度有差異，應(yīng)盡量避免由此出現(xiàn)的誤差。
血清添加量不同：必須注意反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)組與組之間含血清總量應(yīng)相等，給含藥血清少的要用空白血清填補，使各組含血清量相同。
補充：
介紹血清藥理學(xué)方法研究：在中藥藥理學(xué)研究中，有相當(dāng)一部分藥理活性實驗和作用機理是在體外進行的，而利用中藥粗提物直接進行體外實驗，其結(jié)果的真實性和可靠性都受到很大影響。中藥血清藥理學(xué)研究方法是指給動物經(jīng)口用藥后一定的時間采血，取含藥血清進行體外實驗的一種研究方法，該方法由日本學(xué)者田代真一提出，95年前后國內(nèi)即陸續(xù)開展。國家自然科學(xué)基金委員會曾于1996年資助重點項目：中藥復(fù)方體外實驗的方法研究，在含藥血清藥理作用強度與體內(nèi)給藥的量效關(guān)系研究、給藥方案研究、反應(yīng)體系中含藥物血清加入量的確定、采血時間的確定及時效關(guān)系研究、含藥血清低溫保存和血清滅活對效應(yīng)的影響等方面做了大量卓有成效的工作。在以含頭風(fēng)飲（川芎、天麻為主)藥物血清的體外藥理效應(yīng)呈正相關(guān)；含藥血清的藥物濃度除與給藥劑量有關(guān)外，還與給藥方案（如一日內(nèi)給藥次數(shù)及給藥天數(shù)等)直接相關(guān)；體外實驗體系中含藥血清加入量的多少對藥理效應(yīng)產(chǎn)生明顯的影響，因而對最佳反應(yīng)體系的探索具有重要意義；在采用血清藥理學(xué)方法進行實驗前，進行時效關(guān)系研究，找出給藥后最佳采血時間是十分必要的；含藥血清低溫保存和血清滅活可能對藥理效應(yīng)產(chǎn)生明顯影響，應(yīng)以使用新鮮血清或保存時較短的血清為宜。鑒于目前多數(shù)中藥或復(fù)方有效成分尚不明確，成為制藥中藥現(xiàn)代研究的瓶頸，近年進行了中藥血清藥化學(xué)與血清藥理學(xué)協(xié)同研究的嘗試，以揭示產(chǎn)生藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。提出在建立血清化學(xué)成分指紋圖譜并測定相應(yīng)含藥血清藥理效應(yīng)強度后，進行藥物效應(yīng)成分分析，如果含藥血清的藥理效應(yīng)強度與其血清指紋圖譜中某成分指紋峰大小相一致，則說明該成分與所觀察藥理作用密切相關(guān)。中藥血清藥理學(xué)針對中藥及其復(fù)方復(fù)雜多樣的化學(xué)成分的特點，結(jié)合化學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科的先進技術(shù)手段，將有可能成分中藥藥理學(xué)研究的一種新的方法體系。
