14、單糖發(fā)酵管培養(yǎng)基(半固體)
成份: PH7.6-7.8蛋白胨水 1000毫升(0.3克/100毫升)
1.2%酚紅液 0.4毫升
瓊脂 0.4 - 0.5克
10%糖或醇 10毫升
制備:把蛋白胨水,瓊脂加熱溶解,然后加1.2%酚紅液0.4毫升,10%糖10毫升,混勻,分裝試管,每管約2-3毫升,經(jīng)115℃高壓滅菌20分鐘后,分置于試管架上,貼上各類糖或醇類標(biāo)簽備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):細(xì)菌發(fā)酵糖類或醇而產(chǎn)生酸,能使培養(yǎng)基PH改變,指示劑由紅變黃色,如因發(fā)酵產(chǎn)生氣體則半固體內(nèi)產(chǎn)生氣泡,如有動(dòng)力則半固體由清亮變混濁。
15、明膠培養(yǎng)基
成份:肉浸液 1000毫升(牛肉浸膏5克)
明膠 12克
制法:
100毫升肉浸液中,加入明膠12克,隔水加熱煮化,校正PH7.2,分裝小號(hào)試管,用阿諾氏間歇滅菌80℃30分鐘,連續(xù)3日,或者108℃高壓20分鐘,冷卻,貯存?zhèn)溆谩?/P>
15-1、堿性蛋白胨水
成份:
蛋白胨 20克 氯化鈉 5克
硝酸鉀 0.1克 結(jié)晶碳酸鈉(NaclCO3.12H2O) 0.2克
水 1000毫升
制法:將蛋白胨,Nacl,硝酸鉀,結(jié)晶碳酸鈉稱好,溶于1000DW中,校正PH8.4分裝試管,121℃高壓滅菌15分鐘后備用 。
用途:用于霍亂弧菌培養(yǎng)。
16、葡萄糖蛋白胨水(M。V用)
成份:蛋白胨 5克 葡萄糖 5克
K2HPO4 5克 水 1000毫升
制法:將上述稱好溶解分裝試管,調(diào)PH7.4高壓滅菌115℃ 滅菌20分鐘 ,或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管
標(biāo)準(zhǔn):滅菌試驗(yàn)合格。接種大腸桿菌VP陰性,M陽(yáng)性;接種產(chǎn)氣桿菌VP陽(yáng)性,M陰性。
用途:作鑒別腸道桿菌用。
17、枸椽酸鹽培養(yǎng)基
成份:磷酸二氫銨 0.1克 硫酸鎂 0.02克
磷酸氫二鉀 0.1克 枸椽酸鈉 0.23--0.5克(0.36)
氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克
0.5%溴麝香草酚蘭2毫升 (調(diào)PH6.8再加)
制法:將上述稱好,放入水中煮沸溶解,調(diào)PH6.8,然后分裝中號(hào)試管,高壓滅菌,趁熱倒呈斜面,凝固
后備用。
標(biāo)準(zhǔn):1、滅菌試驗(yàn)合格,培養(yǎng)基呈果綠色適宜。
2、接種大腸桿菌,培養(yǎng)基上不生長(zhǎng),也不變色。
3、接種產(chǎn)氣桿菌,培養(yǎng)基呈深蘭色。
用途:作鑒別大腸桿菌用。
18、雙糖鐵培養(yǎng)基
成份:
下層:蛋白胨 1克 氯化鈉 0.5克
葡萄糖 0.2克 瓊脂 0.3-0.5克
水 100毫升
將上述物質(zhì)混勻調(diào)PH7.6后加1.2%酚紅0.4毫升
上層:蛋白胨 1克 氯化鈉 0.5克
乳糖 1克 硫代硫酸鈉 0.03克
硫酸亞鐵 0.02克 瓊脂 1克
水 100毫升
制法: 1將下層配好,分裝中號(hào)試管(1毫升),塞好包扎,15磅高壓滅菌半小時(shí),使凝固后備用。
2制上層時(shí),先將蛋白胨水制好,加入硫酸亞鐵,硫代硫酸鈉,加熱溶解PH8.1,再加入酚紅分瓶,(每瓶300毫升,稱取瓊脂包扎滅菌,趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112℃消毒15分鐘)。
3取已制的下層管,每管用無(wú)菌法倒入上層液約1。5毫升,邊斜放置使成斜面,凝固后備用。
標(biāo)準(zhǔn):無(wú)菌試驗(yàn)合格,接種大腸桿菌下層產(chǎn)酸產(chǎn)氣,上層產(chǎn)酸。
19、尿素培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 0.1克 氯化鈉 0.5克
磷酸二氫鉀 0.2克 尿素 0.2克(或10%2毫升)
葡萄糖 0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)
H2O 100毫升 酚紅(0.2%) 0.4毫升
制法:1除葡萄糖,尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸,使溶解,調(diào)PH7.2過(guò)濾,15磅高壓滅菌15分鐘.
2配制尿素(滅菌)液:每100毫升基液內(nèi)加2毫升.
3配制10%葡萄糖(滅菌)每100毫升加0.1毫升.
4分裝小試管待用.
標(biāo)準(zhǔn):
1滅菌試驗(yàn)合格.
2接種變形桿菌24小時(shí)呈紅色.
用途:鑒定變形桿菌用.
20、膽鹽中性紅瓊脂
成份:蛋白胨瓊脂PH7.2-7.4 5000毫升
膽 鹽 2.5克
乳糖 5.0克
對(duì)氨基苯甲酸 25毫克
1%中性紅溶液 25毫升
制法:
將膽鹽,對(duì)氨基苯甲酸,乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中,待冷至50-60℃時(shí),加入1%中性紅液2.5毫升,混合后即傾注平皿,凝固待用.
*:1%中性紅:1克中性紅加酒精60毫升,加水40毫升
21、丙二酸鹽培養(yǎng)基(縮蘋果酸鈉)
成份:丙二酸鈉 0.3克 酵母浸膏 0.1克
Nacl 0.2克 硫酸銨 0.2克
K2HPO4 0.06克 KH2PO4 0.04克
水 100毫升
PH6.8,高壓滅菌備用.
0.2%溴麝香酚蘭乙醇 1.25毫升
制法:與枸椽酸鹽利用試驗(yàn)相類似,是測(cè)定細(xì)菌能否利用丙二酸鹽與碳源.無(wú)機(jī)銨鹽為氨源而生長(zhǎng),生長(zhǎng)者使培養(yǎng)基變成堿呈蘭色.
鑒定: 克氏桿菌 (+) 赫夫尼亞 (+)
沙門氏菌 (—) 痢疾桿菌 (—)