1960年，美國學(xué)者Yalow 和Berson 創(chuàng)立了放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA)，并首先用于糖尿病人血漿中胰島素含量的測定。這是醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域中方法學(xué)的一項重大突破，開辟了醫(yī)學(xué)檢測史上的一個新紀(jì)元。它使得那些原先認(rèn)為是無法測定的極微量而又具有重要生物學(xué)意義的物質(zhì)得以精確定量，從而為進(jìn)一步揭開生命奧秘打開了一條新的道路，使人們有可能在分子水平上重新認(rèn)識某些生命現(xiàn)象的生化生理基礎(chǔ)。其后30年中，內(nèi)分泌科學(xué)的飛速進(jìn)展，充分證明了這一超微量分析技術(shù)的巨大推動力。1977年，這項技術(shù)的發(fā)明者榮獲諾貝爾生物醫(yī)學(xué)獎。隨后這一嶄新的技術(shù)迅速滲透到醫(yī)學(xué)科學(xué)的其它領(lǐng)域，如病毒學(xué)、藥理學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)、法醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)等，以及與醫(yī)學(xué)生物學(xué)相關(guān)的學(xué)科，如農(nóng)業(yè)科學(xué)、生態(tài)學(xué)及環(huán)境科學(xué)等。放射免疫分析的物質(zhì)，由激素擴(kuò)大到幾乎一切生物活性物質(zhì)。我們放射免疫分析研究起步于1962年，并迅速發(fā)展與普及，對我國生物醫(yī)學(xué)的進(jìn)展起著很大的促進(jìn)作用。
一、放射免疫分析的優(yōu)缺點
�。ㄒ�)RIA的優(yōu)點
放射免疫分析具有許多其它分析方法無可比擬的優(yōu)點。它既具有免疫反應(yīng)的高特異性，又具有放射性測量的高靈敏度，因此能精確測定各種具有免疫活性的極微量的物質(zhì)。
1．靈敏度高一般化學(xué)分析法的檢出極限為10-3～10-6g,而RIA通常為10-9（毫微克，ng)、10-12g（微微克,pg)，甚至10-15g(毫微微克，fg)、10-18g(微微微克，ag)。
2．特異性強由于抗原—抗體免疫反應(yīng)專一性強，所被測物一定是相應(yīng)的抗原。良好的特異性抗體，能識別化學(xué)結(jié)構(gòu)上非常相似的物質(zhì)，甚至能識別立體異構(gòu)體。
3．應(yīng)用范圍廣據(jù)不完全統(tǒng)計，目前至少已有300多種生物活性物質(zhì)已建立了RIA。它幾乎能應(yīng)用于所有激素的分析（包括多肽類和固醇類激素)，還能用于各種蛋白質(zhì)、腫瘤抗原、病毒抗原、細(xì)菌抗原、寄生蟲抗原以及一些小分子物質(zhì)（如環(huán)型核苷酸等)和藥物（如地高辛、毛地黃甙等)的分析，應(yīng)用范圍還在不斷擴(kuò)展。近年來由于小分子半抗原制備抗體的技術(shù)有很大的發(fā)展，有人預(yù)測幾乎所有的生物活性物質(zhì)，只要其含量不低于RIA的探測極限，都可建立適當(dāng)?shù)腞IA法。醫(yī)學(xué)全在線www.med126.com
4．操作簡便RIA所需試劑品種不多，可制成配套試劑盒；加樣程序簡單一次能分析大量標(biāo)本，標(biāo)本用量也少；反應(yīng)時間不長；測量和數(shù)據(jù)處理易于實現(xiàn)自動化；RIA屬體外分析技術(shù)，對患者無任何輻射危害。
�。ǘ�)RIA的缺點
1．只能以免疫反應(yīng)測得具有免疫活性的物質(zhì)，對具有生物活性百失去免疫活性的物質(zhì)是測不出的。因此RIA結(jié)果與生物測定結(jié)果可能不一致。
2．由于使用了生物試劑，其穩(wěn)定性受多種因素影響，需要有一整套質(zhì)量控制措施來確保結(jié)果的可靠性。
3．靈敏度受方法本身工作原理的限制，對體內(nèi)某些含量特別低的物質(zhì)尚不能測定。
4．由于放射免疫分析是競爭性的反應(yīng)，被測物和標(biāo)準(zhǔn)物都不能全部參與反應(yīng)，測得的值是相對量而非絕對量。
5．存在放射線輻射和污染等問題。
盡管RIA存在以上缺點，但它畢竟是定量分析方法的先進(jìn)技術(shù)。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，放射免疫分析技術(shù)將會得到更加廣泛、更加深入的發(fā)展。
二、基本原理
放射免疫分析技術(shù)，是把放射性同位素測定與抗原、抗體間的免疫化學(xué)反應(yīng)兩種方法巧妙地結(jié)合起來所形成的一種超微量物質(zhì)的測定方法。
RIA的基本原理，是利用標(biāo)記抗原（*Ag)和非標(biāo)記抗原（Ag)對特異性抗體（Ab)發(fā)生競爭性結(jié)合。競爭結(jié)合反應(yīng)可用下式表示：
在上述反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)只有*Ag和Ab時，只產(chǎn)生*Ag—Ab復(fù)合物，并保持可逆的動態(tài)平衡。如反應(yīng)系統(tǒng)中同時加入Ag,因Ag 與*Ag 免疫活性完全相同，故與Ab具有相同的親合力。當(dāng)*Ag為一定量、Ab為有限量、Ag 與* Ag 的量之和超過Ab上的有效結(jié)合位點時，*Ag –Ab復(fù)合物的生成量與Ag 的量之間呈一定的函數(shù)關(guān)系。即當(dāng)Ag 量少時，Ag –Ab生成量多，而*Ag –Ab生成量增多，游離的*Ag 減少�？梢�*Ag –Ab復(fù)合物生成量是受Ag含量制約的。因此，在放射免疫分析中，用已知不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)物和一定量的*Ag及限量的Ab反應(yīng)，采取一定方法將B與F分開，即可算出該標(biāo)準(zhǔn)物在各濃度下*Ag –Ab復(fù)合物的結(jié)合百分率（B/T)。
