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流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血白細(xì)胞的免疫熒光分析

 

  二、白細(xì)胞免疫熒光分析的數(shù)據(jù)分析

  在儀器調(diào)試和校準(zhǔn)及標(biāo)本制備完畢之后,就要做測(cè)試和數(shù)據(jù)分析工作。這里先討論一下有關(guān)數(shù)據(jù)測(cè)量和分析的技術(shù)問題,而一些醫(yī)學(xué)應(yīng)用的具體參數(shù)的測(cè)量和分析后面做介紹。

  1.0散射和90。散射的雙指標(biāo)的二維圖像分析  可以把0。和90。散射分別選作二維圖像的X軸和Y軸指標(biāo)。通過圖中數(shù)據(jù)點(diǎn)分布把全血分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞幾個(gè)亞群(圖10-9)。

圖10-9 人的外周血白細(xì)胞分群的二維點(diǎn)圖

  圖中,A、B圖的淋巴細(xì)胞數(shù)大約有6000~9000個(gè);C、D圖約有2000~4000個(gè)。分群編號(hào)依次表示:①紅細(xì)胞、死細(xì)胞和渣滓;②淋巴細(xì)胞群;③大顆粒淋巴細(xì)胞;④單核細(xì)胞;⑤粒細(xì)胞。數(shù)據(jù)是對(duì)1000個(gè)細(xì)胞分析得到的。

  若用單指標(biāo)直方圖,對(duì)PBMC而言,可以把淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞分開。見圖10-10中的A、B圖。但對(duì)紅細(xì)胞溶解后的全血,單指標(biāo)圖分辨率則不夠了(圖10-10的C、D圖),圖A、B給出的是經(jīng)ficoll后的PBMC;圖C、D給出的是人外周血白細(xì)胞。圖中數(shù)字編號(hào)所代表的組分和圖10-9相同。

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