計(jì)劃生育研究中實(shí)驗(yàn)動物的選擇和應(yīng)用

　二、動物的選擇與應(yīng)用

　�。ㄒ�)口服避孕藥物的篩選研究

　　目前國內(nèi)外廣泛應(yīng)用的口服避孕藥（孕激素與雌激素的復(fù)合片以及單純孕激素藥片)其避孕效果都非常好，但還存在一定副作用。為了提高口服避孕藥的可接受率，有必要尋找更加理想的、有效、安全、經(jīng)濟(jì)、方便的藥物。

　　篩選口服避孕藥的實(shí)驗(yàn)動物多使用嚙齒類實(shí)驗(yàn)動物，因?yàn)樗鼈兙哂幸?guī)律的動情周期，排卵有明顯的指標(biāo)，易于檢測，價(jià)格便宜，而具有月經(jīng)周期的靈長類動物反而不是都被選擇的對象。因?yàn)檫@類動物來源困難，價(jià)格昂貴，排卵和月經(jīng)周期難于檢測。醫(yī)學(xué)全.在線提供

　　當(dāng)動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)某藥物有抗生育的效果后，還必須進(jìn)行各種藥理實(shí)驗(yàn)。

　　1．孕激素活性測定　根據(jù)Mcphail的方法，以未成熟雌性家兔子宮內(nèi)膜的變化為觀察指標(biāo)；

　　2．妊娠維持實(shí)驗(yàn)　一般選大鼠為動物模型；

　　3．雌激素活性及抗雌激素活性測定　用未成年或去卵巢未成熟大鼠為動物模型，以子宮稱重或陰道涂片為觀察指標(biāo)；

　　4．雄激素活性及抗雄激素活性測定　用大鼠或小鼠為動物模型，以前列腺腹側(cè)及儲精囊稱重為觀察指標(biāo)；

　　5．對促性腺激素分泌的影響　用嚙齒類或其它種類動物為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停�以是否抑制排卵或測定外周血的促性腺激素含量為觀察指標(biāo)；

　　6．蛻鎮(zhèn)痛形成實(shí)驗(yàn)　用小鼠為動物模型；

　　7．糖皮質(zhì)激素活性測定　用大量為動物模型。

　　以上7個(gè)為基本實(shí)驗(yàn)，根據(jù)需要還可以增添其它實(shí)驗(yàn)。

　　（二)避孕藥物的藥理研究

　　1． 女用避孕藥物　研究最基本方法是抗生育實(shí)驗(yàn)，就是在與雄性動物合籠前和合籠交配期間，給雌性動物服藥，觀察藥物對生育的影響。以檢查雌性動物懷孕百分率和每只孕鼠之胚胎數(shù)為指標(biāo)。如果能找到一種藥具有防止受精卵著床的作用或中斷早期妊娠的作用，那就不必天天服藥，而只在需要時(shí)服用。這是避孕藥研究工作者多年來的一項(xiàng)設(shè)想。常需要作抗著床和抗早孕實(shí)驗(yàn)�？怪�床實(shí)驗(yàn)是將雌鼠與雄鼠合籠，每天上午檢查雌鼠陰道口有無陰栓，于出現(xiàn)陰栓后第1～5天，每日給藥一次，于陰栓出現(xiàn)后第12天處死動物，以胚胎數(shù)和懷孕百分率為指標(biāo)。陰栓是某些嚙齒類動物在交配后，隨即形成的一種白色漿液性物質(zhì)，堵塞在陰道至子宮頸的腔內(nèi)，稱為陰栓（Vaginal plug)。是檢查動物已否交配的一種標(biāo)志，將出現(xiàn)陰栓的當(dāng)天算為妊娠“零天”。陰栓是由雄鼠精囊腺和凝固腺的分泌物在陰道內(nèi)凝固而成的產(chǎn)物。小白鼠一般在交配后4～5分鐘內(nèi)形成。大的陰栓可凸出于陰道口，小的陰道或子宮頸內(nèi)，需要翻開陰道口才能查見。陰栓一般在交配后一小時(shí)起漸漸軟化，經(jīng)16～24小時(shí)后脫落。但也有只存在4～5小時(shí)，而最多的可存在48小時(shí)以上。小鼠陰栓比較牢固，大鼠的陰栓不牢固，容易脫落，所以檢查大鼠陰栓時(shí)，除檢查陰道外，還應(yīng)在籠底尋找陰栓。亦可用生理鹽水沖洗陰道，在顯微鏡下檢查沖洗液中有無精子，有精子表示已交配。抗早孕實(shí)驗(yàn)是在著床（出現(xiàn)陰栓后第5天著床)以后給藥，一般于陰栓出現(xiàn)后第6～9天連續(xù)給藥4天，第12天處理，以檢查胚胎數(shù)和死胎為指標(biāo)�？股�育、抗著床和抗早孕實(shí)驗(yàn)中最常用的動物為壯年的28～35g的小鼠，也可用體重200～250體重的大鼠。在探討一個(gè)避孕藥的作用原理時(shí)，有時(shí)需要檢查一個(gè)藥物有沒有抑制排卵作用。需要進(jìn)行抗排卵實(shí)驗(yàn)，常選用體重2～3.5kg的雌兔進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

　　2．男用避孕藥物研究　長期以來，對男用避孕藥的研究不很重現(xiàn)，進(jìn)展緩慢。藥物能抑制精子的生成過程，干擾男性生殖活動的激素調(diào)節(jié)；干擾副性腺和改變精液的理化特性等，均可達(dá)到不孕的目的�，F(xiàn)在認(rèn)為，精子形態(tài)的成熟是在睪丸，而生理的成熟是在副睪。藥物作用于副性腺，干擾精子成熟或改變精液理化性質(zhì)所引起的男性不孕似較理想。常選用成年雄性大白鼠作實(shí)驗(yàn)，如觀察藥物對大白鼠生育力的影響；對大白鼠精子數(shù)的影響；對大白鼠精子活動力的影響以及對雄性激素的作用等。

　　實(shí)驗(yàn)中常需要采集實(shí)驗(yàn)動物的精液，采集的方法有電刺激法、假陰道法、按摩法以及直接殺取法。電刺激法適用于多種實(shí)驗(yàn)動物，尤其是野生實(shí)驗(yàn)動物的采精，其原理是通過刺激輸卵管壺腹附近的神經(jīng)末稍，引起低級射精中樞興奮而促使動物射精。所用電刺激采精器的主要技術(shù)參數(shù)為：電源電壓-交流220V；輸出可調(diào)電壓0～20V；可高頻率20～60Hz：輸出電流0～1000mA：輸出波形-正弦波或方波。假陰道法是用硬質(zhì)外殼襯以膠質(zhì)內(nèi)胎制成的采精器械，內(nèi)部注以溫水和充氣，適當(dāng)加以潤滑，使其與雌性動物生殖道的內(nèi)環(huán)境相似，以誘起雄性動物射精常，常適用于兔的采精。貓?jiān)谟邪l(fā)情母貓引誘情況下，當(dāng)公貓爬跨時(shí)，也可使用此法采精，但象水貂那樣在交配時(shí)雌雄動物長時(shí)間緊密擁抱的動物，無法使用假陰道。按摩法主要用于狗的采精，這是因?yàn)楣吩诮慌鋾r(shí)，雄狗陰莖的球狀海綿體充血脹大并和雌狗的陰道鎖結(jié)，采取假陰道法采精有一定困難，故多采用按摩法。狗的射精分為3段，前段為尿道腺的分泌物，約為0.25～2.0ml的透明液體：中段排出的是濃精，約0.5～3.0ml；第3段則為大量透明的前列腺分泌物，量可達(dá)3～20ml，但幾乎不含精子。按摩法對于調(diào)教好的雄狗方便易行，并可存細(xì)胞觀察射精情況，收集所需部分，無需特殊設(shè)備。但不能用于野生犬科或陌生猛犬。直接殺取法適于前面幾種方法不適用時(shí)采用，如小白鼠、水貂等，系將動物處死，取其輸卵管和附睪丸，用生理鹽水或其它專門稀釋液沖洗，制成精子懸浮液備用。常用實(shí)驗(yàn)動物采精方法和精液特點(diǎn)見表10-47。

表10-47　各種動物精液采取方法和精液特點(diǎn)

　�。ㄈ�)中樞神經(jīng)系統(tǒng)對促性腺激素分泌的調(diào)節(jié)作用研究

　　不同動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)對垂體促性腺激素分泌的調(diào)節(jié)是有很大差異的。如靈長類和大鼠的垂體以同樣的方式對促黃體素釋放激素起反應(yīng)，并以同樣的形式被大劑量雌激素或雄激素所抑制。這兩種動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在自發(fā)性排卵中都是必不可少的,這是它們的共同點(diǎn)。但調(diào)節(jié)大鼠促性腺激素釋放的中樞是視前結(jié)節(jié)系統(tǒng)，若視前區(qū)受損，則在排卵前雌激素不能導(dǎo)致促黃體激素的釋放。而這一區(qū)域受損不影響恒河猴促黃體激素的釋放，因?yàn)楹愫雍锎傩韵偎蒯尫诺恼{(diào)節(jié)中樞是結(jié)節(jié)漏頭斗狀系統(tǒng)，這是它們的不同點(diǎn)。

　　在中樞神經(jīng)系統(tǒng)對促性腺激素調(diào)節(jié)的研究中，大鼠是常用的動物模型，因這方面已積累了大量的有關(guān)研究資料：價(jià)格便宜，易于飼養(yǎng)，有規(guī)律的性周期便于檢測，且周期短，易于安排實(shí)驗(yàn)，排卵前有自發(fā)的LH峰，所得的結(jié)果一般易于在猴子身上得到重復(fù)。醫(yī)學(xué) 全在.線提供

　　陰道涂片可以準(zhǔn)確地判斷大鼠和小鼠動情周期的各個(gè)階段，從而可推測排卵前LH峰及排卵，但此方法很少用于田鼠，因?yàn)樘锸笤趧忧橹芷陉幍烙袧B出物，所以不一定要做陰道涂片。推測靈長類LH峰，須測定外周血的孕激素水平，如單獨(dú)根據(jù)月經(jīng)出血期來推測有可能導(dǎo)致判斷的錯(cuò)誤。

　　大鼠、小鼠和田鼠的黃體期不能自發(fā)地變成功能性黃體，在正常情況下，需交配誘發(fā)黃體激素的分泌，而恒河猴和人則自發(fā)性功能黃體。家兔和貓是誘發(fā)性（交配)排卵，一旦排卵發(fā)生，則黃體能自發(fā)地變?yōu)楣δ苄缘摹?/P>

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