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  藥物分析西藥分析—縮宮素生物檢定法           ★★★ 【字體:

藥師資格考試藥物分析西藥分析—縮宮素生物檢定法

來源:醫(yī)學(xué)全在線 更新:2007-5-16 考研論壇
本法系比較垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品(S)與供試品(T)引起離體大鼠子宮收縮的作用,以測定供試品的效價。
  標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制
  迅速精密稱取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品適量,注意避免吸潮,先加少量0.25%醋酸溶液,仔細(xì)研磨,移置硬質(zhì)大試管中,再精密加0.25%醋酸溶液使成每1ml中含縮宮素1單位的溶液。管口輕放一玻璃塞,浸入沸騰的水中,時時振搖,加熱5分鐘取出,迅速冷卻,濾過,濾液分裝于適宜的容器內(nèi),4~8℃貯存,如無沉淀析出,可在3個月內(nèi)使用。
  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制
  試驗(yàn)當(dāng)日,精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量,按高低劑量組(ds<[2]>,ds< [1]>)加0.9%氯化鈉溶液配成兩種濃度的稀釋液,一般高濃度稀釋液可配成每1ml中含0.01~0.02單位,高低劑量的比值(r)一般不得大于1:0.7。調(diào)節(jié)劑量使低劑量能引起子宮收縮,一般在20~50mm;高劑量應(yīng)不致使子宮收縮達(dá)到極限,一般為50~85mm,且高低劑量所致子宮的收縮應(yīng)有明顯差別。
  供試品溶液與稀釋液的配制 按供試品的標(biāo)示量或估計(jì)效價(A<[T]>),照標(biāo)準(zhǔn)品溶液與其稀釋液的配制法配成,高低兩種濃度的稀釋液,其比值(r)應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相等,供試品和標(biāo)準(zhǔn)品高低劑量所致的反應(yīng)均值應(yīng)相近。
  子宮肌蓄養(yǎng)液的配制醫(yī)學(xué).全.在.線網(wǎng)站quanxiangyun.cn
  試驗(yàn)當(dāng)日,取氯化鈉9g、氯化鉀0.42g、 氯化鈣(按無水物計(jì)算)0.06g與葡萄糖0.5g,加水700ml使溶解,另取碳酸氫鈉0.5g,加水約200ml溶解 后,緩緩傾注于前一溶液中,隨加隨攪拌,最后加水適量使成1000ml。
  供試用動物
  取健康無傷的成年雌性大鼠,斷乳后即與雄鼠隔離,出生后不超過 3個月,體重160~240g。試驗(yàn)當(dāng)日,選擇陰道涂片在動情前期的動物,也可用雌性激素處理使子宮涂片為動情前期或動情期的動物。
  檢定法
  取選定的大鼠迅速處死,剖腹取出子宮,仔細(xì)分離附在子宮肌上的結(jié)締組織,注意避免因牽拉使子宮肌受損。在子宮分叉處剪下左右2條,取一條將其下端固定于離體器官恒溫水浴裝置的浴杯底部,上端用線與記錄裝置相連,以描記子宮收縮;浴杯中加入一定量的子宮肌蓄養(yǎng)液(約30~50ml),連續(xù)通入適量空氣。蓄養(yǎng)液應(yīng)調(diào)節(jié)至32~35℃之間并保持恒溫(±0.5℃),子宮放入浴杯后,靜置約15分鐘,按次序準(zhǔn)確注入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品兩種濃度的稀釋液(0.3~0.8ml),待子宮肌收縮至最高點(diǎn)開始松馳時(約60~90秒鐘),放去蓄養(yǎng)液并用蓄養(yǎng)液洗滌一次,再加入等量蓄養(yǎng)液,靜置;相鄰兩次給藥的間隔時間應(yīng)相等(約3~5分鐘),每次給藥應(yīng)在前一次反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液和供試品稀釋液各取高低兩個劑量(ds<[2]>、 ds<[1]>、dT<[2]>、dT<[1]>)為一組,按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的次序輪流注入每組四個劑量,重復(fù)4~6 組。測量各劑量所致子宮收縮的高度,照生物檢定統(tǒng)計(jì)法(附錄ⅩⅣ)中的量反應(yīng)平行線測定法計(jì)算效價及實(shí)驗(yàn)誤差。
  本法的可信限率(FL%)不得大于10%。
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文章錄入:凌云    責(zé)任編輯:凌云 
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