豬流行性
腹瀉、豬傳染性胃腸炎和豬輪狀病毒病及其防
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豬流行性腹瀉(PED)、豬傳染性胃腸炎(TGE)和豬輪狀病毒病是我國豬群中危害最嚴(yán)重．的三種病毒性腹瀉病，發(fā)病后沒有有效的治療辦法，目前唯一的手段是用疫苗進(jìn)行預(yù)防接種。作者經(jīng)過多年的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)和臨床實(shí)踐，積累了防治的若干經(jīng)驗(yàn)，本文試圖從理論和實(shí)踐上對PED、TGE和豬輪狀病毒病三種疾病及其防制進(jìn)行初步的論述。 1、病原 豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)都是冠狀病毒，呈多形的球形，外有像倒釘樣的纖突，直徑在60～190nm；在低溫下可以長期存活，糞便中的病毒在20℃干燥、腐敗狀況下10天內(nèi)死亡，在37℃4天全部死亡。病毒對光很敏感。可被福爾馬林、氫氧化鈉、含氯或碘的消毒劑、季胺鹽類化合物等滅活。輪狀病毒病是一種人畜共患病，輪狀病毒(RV)呈車輪狀外觀，直徑在70nm左右。RV在環(huán)境中相當(dāng)穩(wěn)定，對溫度、pH、化學(xué)物質(zhì)和常用消毒劑有耐受性。在pH 3～9時都穩(wěn)定，糞便中的RV在60℃時可耐受30分鐘，在18℃～20℃時可耐受7～9個月。 2、發(fā)病機(jī)理 經(jīng)人工發(fā)病試驗(yàn)，豬口服PEDV和TGEV后，潛伏期一般為20小時至3天。在實(shí)驗(yàn)室，新生仔豬最早有接種8小時后就開始發(fā)病的，病毒在小腸絨毛上皮細(xì)胞內(nèi)繁殖，在16～30小時達(dá)到最大量。由于病毒的侵襲，小腸上皮細(xì)胞變性、絨毛脫落，導(dǎo)致小腸內(nèi)酶活性明顯下降，擾亂了消化及細(xì)胞運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)和電解質(zhì)，引起急性吸收不良。對哺乳仔豬而言，就不能消化乳中的乳糖和蛋白質(zhì)，使腸內(nèi)產(chǎn)生高滲，液體在腸內(nèi)滯留，甚至從組織內(nèi)吸收液體，進(jìn)而導(dǎo)致腹瀉和
脫水，
酸中毒而死亡。新生仔豬接種RV后，也產(chǎn)生上述的情況，但14日齡以上的豬人工攻毒一般不會發(fā)病。 3、
流行病學(xué) 3．1 豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎 PED和TGE有嚴(yán)格的季節(jié)性。主要在11月至下年4月間．尤其在農(nóng)歷春節(jié)前后是發(fā)病的高峰期；氣溫超過20℃一般不會流行，但也有在氣溫25℃或更高時發(fā)生的情況。近年來，也有在夏季發(fā)生的病例。 PED和TGE的暴發(fā)常常是在買進(jìn)豬只后的3～5天。病毒傳人的途徑可能是運(yùn)輸?shù)目ㄜ嚒⒐ぞ�、衣服、鞋子等。狗�?a class="channel_keylink" href="/mingzu/2009/20090512113324_152127.shtml" target="_blank">貓、飛鳥和
老鼠的糞便也可以傳播該病毒。 一個豬場第1次暴發(fā)PED或TGE時，幾乎沒有一頭豬可以幸免的，待發(fā)過病的母豬逐步淘汰，從未發(fā)過病的新母豬替代老母豬時，可能會有新一輪的暴發(fā)。這樣，這個豬場可以周而復(fù)始，延綿不斷地發(fā)生。有的豬場當(dāng)年發(fā)過病后，下半年由于發(fā)過病的肉豬已基本出售而沒有發(fā)過病的新苗豬一批批從外面購進(jìn)來，這些豬場可能年年會發(fā)生豬流行性腹瀉或豬傳染性胃腸炎，但病情比第1次大暴發(fā)時會輕些。 對本病持續(xù)存在最令人信服的解釋是它以地方流行性方式存在于肥育豬和不斷有仔豬出生的豬場中，在溫暖的季節(jié)成為隱性感染，冬春季則傳播病毒。 發(fā)病時，一般肥育豬首先出現(xiàn)，臨床癥狀，很快蔓延到斷奶豬、妊娠母豬、產(chǎn)仔母豬和哺乳仔豬。 3．2 豬輪狀病毒病 無論何處，只要養(yǎng)豬，豬群中就會有輪狀病毒。在常規(guī)飼養(yǎng)條件下要使豬場沒有輪狀病毒是非常困難的。病毒經(jīng)糞／口途徑在豬群中傳播。病毒經(jīng)糞便排出，急性期排毒量最大。但成年豬一般不排毒。不潔的環(huán)境對輪狀病毒在豬群中存留起重要作用。病毒可在干燥的糞便、灰塵、產(chǎn)仔區(qū)的污水和斷奶舍中被檢出。在已清空的豬舍內(nèi)可存活3個月。 4、臨床癥狀 4．1 豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎 在抗原上它們是完全不同的疾病，臨床上PED和TGE很難區(qū)別，僅僅是TGE的臨床癥狀比PED還要重些。發(fā)病開始時厭食，以后腹瀉，并且以水樣的噴射狀腹瀉為特征，豬舍四周墻上和地面沾滿了水糞，有一股特別的臭味。體溫一般不升高。用任何藥品治療都無效。大豬一般7～10天自行康復(fù)，但抵抗力弱的豬、尤其有并發(fā)癥時會死亡，新生仔豬由于嚴(yán)重脫水，加上母豬發(fā)病時無奶，死亡率可達(dá)100％。10日齡以上仔豬死亡率較低�？偟囊�(guī)律是豬只的日齡越小，越易死亡。病豬除腹瀉外，往往
嘔吐，特別在吃奶后很快出現(xiàn)。有的母豬
流產(chǎn)，有時流產(chǎn)率達(dá)25％。 4．2 豬輪狀病毒病 是仔豬的一種疾病，在自然情況下，7日齡以下的新生仔豬很少發(fā)生，一般發(fā)生在13～39日齡的仔豬，平均20日齡，初產(chǎn)母豬產(chǎn)的仔豬較易感染病毒。潛伏期12～24小時，開始出現(xiàn)厭食、不安、偶爾有嘔吐。嚴(yán)重的在1～4小時后發(fā)生水樣腹瀉，糞便呈黃色到白色，含絮狀物。腹瀉可持續(xù)3～5天，在腹瀉2～5天后可能有死亡。隨著年齡的增大死亡率降低，14日齡以上的豬很少死亡。 5、病理解剖 解剖這三種病毒性腹瀉的病豬，病變常局限在胃腸道。胃內(nèi)充滿凝乳塊，胃黏膜充血。小腸內(nèi)充滿黃色液體，并含有未消化的凝乳塊，腸壁變薄呈半透明。在普通顯微鏡下可以見到絨毛萎縮，腸淋巴結(jié)
水腫，其他臟器看不到病變。但TGE可能在肺部有炎性反應(yīng)。 6、診斷 引起豬腹瀉和嘔吐的疾病很多。如大腸桿菌病、沙門氏菌病、偽
狂犬病、梭菌病、豬
痢疾、血凝腦
脊髓炎、豬瘟、球蟲病等，需仔細(xì)鑒別。 根據(jù)流行病學(xué)，發(fā)病季節(jié)．水瀉。嘔吐。所有豬發(fā)病，大豬一般不死，日齡越小死亡率越高．病變主要在腸道，傳播迅速，治療無效等基本上可以確定為病毒性疾病。7日齡以下不發(fā)病在13～39日齡發(fā)病的仔豬一般為輪狀病毒病，7日齡以內(nèi)發(fā)病死亡的往往是TGE或PED。下面的輔助方法可幫助診斷：絨毛萎縮：在普通顯微鏡下觀察，絨毛縮短，這是特征性的病變。糞便酸性：細(xì)菌性腹瀉的糞便一般為堿性，病毒性腹瀉的糞便呈酸性：可用pH試紙測一下。最終的診斷還要靠實(shí)驗(yàn)室檢查。送檢發(fā)病未死乳豬的小腸，用熒光抗體技術(shù)可在2小時內(nèi)得出明確診斷。 7、免疫 7．1 免疫機(jī)理 在免疫學(xué)中起主要作用的免疫球蛋白(1gS)是IgG和IgA。IgG也叫循環(huán)抗體，它的主要作用是用來抵御全身感染，而IgA主要用來抵御黏膜感染。IgG的分子量較大，不容易穿過腸壁進(jìn)入腸腔，它們對胃酸和消化酶的抵抗力較差。IgA也叫分泌抗體，分子量較小，它們在黏膜免疫中起主要作用，可以抵御胃酸和消化酶的消化，并且與腸黏膜有親和作用所以IgA在腸道中起重要的作用。 PED、TGE和豬輪狀病毒病都是腸道病，都是通過消化道感染的。它們的靶細(xì)胞都是腸絨毛上皮細(xì)胞，引起腸絨毛的萎縮脫落，是導(dǎo)致動物消化泛反亂、酸中毒和脫水的原因。在預(yù)防上，如果在腸腔內(nèi)經(jīng)常有抗體存在，就可以不斷地中和豬體攝人的病毒，從而起到保護(hù)作用。 豬出生時體內(nèi)無免疫球蛋白，出生后通過
初乳獲得免疫抗體。初乳中IgS主要是IgG，也有多量的IgA，新生仔豬吮吸初乳后通過腸上皮進(jìn)入循環(huán)，這樣為新生仔豬提供了像母豬那樣的血清抗體，這些體液抗體的功能主要是抵抗全身感染而非腸內(nèi)感染。所以，在仔豬哺乳期，進(jìn)入消化道的病毒是通過與母乳中的抗體在腸道中不斷中和而起主要保護(hù)作用的．而原先進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)的抗體再通過腸腔與進(jìn)入消化道內(nèi)的病毒起作用就次要了，這種免疫機(jī)理就是被動免疫，也稱為乳汁免疫。 在主動免疫中，當(dāng)豬體自然感染PEDV、TGE＼和RV時，主要是腸黏膜的局部免疫，病毒對腸腔的刺激既可產(chǎn)生IgG，也可產(chǎn)生IgA，這是體液免疫，同時可產(chǎn)生細(xì)胞免疫。腸上皮細(xì)胞形成的IgA分泌片可有效地將IgA從黏膜固有層轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腸腔。這就解釋了在自然發(fā)病后活下來的豬中，PED、TGE和豬輪狀病毒病的保護(hù)率很高，極少第2次發(fā)病。 7．2 疫苗 在實(shí)驗(yàn)室中，用PEDV、TGEV和RV的強(qiáng)毒通過肌肉、靜脈、皮下、皮內(nèi)、氣管和腹腔等非口途徑攻擊敏感豬，經(jīng)多天的臨床觀察，未見動物有腹瀉和嘔吐的臨床癥狀，再采集小腸進(jìn)行免疫熒光檢查也未證實(shí)在小腸絨毛上皮細(xì)胞的胞漿中有病毒存在而用PEDV、TGEV和RV的強(qiáng)毒通過口服時都能使陰性豬發(fā)病產(chǎn)生典型的臨床癥狀，用免疫熒光檢查也能證實(shí)小腸絨毛上皮細(xì)胞的胞漿中有病毒存在。 這就從理論上啟示我們，PED、TGE和豬輪狀病毒病的最理想免疫途徑應(yīng)該是口服活毒，而這些活病毒應(yīng)該是既不能引起豬發(fā)病，又要有一定的毒力，使病毒進(jìn)入腸固有層以有足夠的刺激產(chǎn)生IgG和IgA；如果毒力太弱病毒進(jìn)入腸道不能增殖或有限增殖，對腸表層下IgA漿細(xì)胞的抗原刺激不足，相應(yīng)地IgA產(chǎn)生極少。但研制這恰到好處的中毒有一定的難度，同時口服的免疫方法的可操作性也不強(qiáng)行報(bào)道曾試用低代次細(xì)胞培養(yǎng)TGE強(qiáng)毒誘導(dǎo)被動免疫，但結(jié)果表明口／鼻內(nèi)感染的母
豬血清學(xué)轉(zhuǎn)化和仔豬的保護(hù)率不規(guī)律。如果母豬妊娠期間把TGE弱毒一次注射到腸腔。對其所產(chǎn)仔豬用強(qiáng)毒口服，結(jié)果保護(hù)性很差。然而在母豬妊娠期間連續(xù)腸內(nèi)注射弱毒，其仔豬攻毒后有較好的保護(hù)力，這提示了口服免疫需要多次才行。有報(bào)道(美國《豬病學(xué)》第八版)，各種不同的TGE試驗(yàn)疫苗和兩種商品疫苗給產(chǎn)前母豬注射，其結(jié)果是母豬所產(chǎn)仔豬的發(fā)病率和死亡率都有小幅度的下降，很不理想，原因可能是病毒通過注射進(jìn)入體內(nèi)后不能在體內(nèi)，尤其在腸黏膜的靶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制繁殖．病毒很快被機(jī)體消滅，不能持續(xù)地刺激機(jī)體，抗體效價就不高。 鑒于PEDV、TGEV和RV以上的免疫特性，我們研制了“豬流行性腹瀉、豬傳染性胃腸炎和豬輪狀病毒三聯(lián)滅活疫苗”。這三種病毒分別在三種敏感的細(xì)胞上繁殖，其病毒效價（TCID50)均大于1075每毫升。以獸用白油為佐劑W/O/W的雙向苗。經(jīng)交巢穴注射后，病毒抗原在體內(nèi)緩慢釋放，可持續(xù)地刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，由于該疫苗是水包油包水，相對單純的油包水疫苗產(chǎn)生有效免疫的時間短些。實(shí)驗(yàn)室免疫試驗(yàn)表明，免疫母豬后其仔豬的被動保護(hù)率在95％以上，肉豬的主動免疫保護(hù)率在90％左右；大規(guī)模生產(chǎn)試用，免疫母豬后其仔豬的被動保護(hù)率在85％～95％，肉豬的主動免疫保護(hù)率在70％～90％。
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