常見(jiàn)豬寄生蟲(chóng)病診斷方法
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(一)糞便蟲(chóng)卵檢查法1.直接涂片檢查法 是簡(jiǎn)便和常用的方法,但檢查時(shí)所用的糞便數(shù)量少,故檢出率較低。本法是先在載玻片上滴一滴
甘油與水的混合液,再用牙簽或火柴棍挑起少量糞便加入其中,混勻,夾去較大的糞渣,最后使玻片上留有一層均勻的糞液,其濃度的要求是將此玻片放于書(shū)上,能通過(guò)糞便液膜模糊地看出其下的字為合適。在糞便上覆以蓋玻片,置顯微鏡下檢查。檢查時(shí)應(yīng)順序地查遍蓋玻片下所有部分。2.水洗沉淀法 取糞便5克,加清水100毫升以上,攪勻成糞液,通過(guò)40~60目銅篩過(guò)濾,濾液收集于燒杯中,靜置沉淀20分鐘,傾去上清液,保留沉渣,再加清水混勻,再沉淀,如此反復(fù)操作直到上層液體透明后,吸取沉渣檢查。3.漂浮法 先往
青霉素空瓶中加入適量飽和鹽水,再往瓶?jī)?nèi)加入糞便1克,混勻,篩濾,濾液注入另一瓶中,補(bǔ)加飽和鹽水溶液使瓶口充滿,上覆以蓋玻片,并使液面與蓋玻片接觸,其間不留氣泡,直立20分鐘后,取下蓋玻片檢查。此法適用于檢查比重比飽鹽水溶液輕的蟲(chóng)卵,如一般線蟲(chóng)卵和球蟲(chóng)卵囊等。(二)常見(jiàn)蟲(chóng)卵的一般特征1.豬蛔蟲(chóng)卵 蟲(chóng)卵短橢圓,棕黃色,大小為56~87微米×46~57微米,殼厚,外表有凹凸不平的蛋白質(zhì)膜,剛排出的蟲(chóng)卵含一未分裂的卵黃細(xì)胞,未受精卵呈現(xiàn)長(zhǎng)橢圓形,殼較薄。2.結(jié)節(jié)線蟲(chóng)卵 橢圓形,淡灰色,卵殼薄而光滑,內(nèi)含8~16個(gè)球形的胚細(xì)胞。大小為45~55微米×26~36微米。3.豬鞭蟲(chóng)卵 呈淡褐色,具有厚而光滑的外膜,兩極呈栓塞狀,形如腰臌,內(nèi)有一胚細(xì)胞。蟲(chóng)卵大小為52~61微米×27~30微米。4.蘭氏類圓線蟲(chóng)卵 呈橢圓形,淡灰色,卵殼薄而光滑,卵內(nèi)含有成形的幼蟲(chóng),幼蟲(chóng)呈U字形。大小為45~55微米×26~30微米。5.布氏
姜片蟲(chóng)卵 呈淡黃色,卵殼薄,其一端有不明顯的卵蓋,卵黃均勻地散布于卵殼內(nèi)。大小為130~140微米×80~85微米。6.球蟲(chóng)卵囊 呈卵園或橢圓形,淡灰色,殼薄而光滑,內(nèi)有顆粒狀的原生質(zhì)團(tuán)塊。其大小因種類不同而不同,大的為24.6~31.9微米×23.2~24.0微米,小的為11.2~16.0微米×9.6~12.8微米。(三)豬疥螨的實(shí)驗(yàn)室檢查方法1.病料的采取疥螨寄生于豬的皮內(nèi),因此應(yīng)刮取皮屑,置于顯微鏡下,尋找蟲(chóng)體。刮取皮屑的方法很重要,應(yīng)選擇患病皮膚與健康皮膚交界處,這里的螨較多,往往在耳殼內(nèi)容易尋找。先在要刮取的皮膚處滴加少許50%的甘油水溶液,然后用將邊緣磨銳的不銹鋼小勺耒刮取皮屑,直到皮膚輕微出血。將刮下的皮屑置入試管或塑料袋內(nèi),帶回供檢查。2.檢查方法(1)顯微鏡下直接檢查法 將刮下的皮屑置載玻片上,加入少量50%甘油水溶液,覆以另一張載玻片。搓壓載玻片使病料散開(kāi),分開(kāi)載玻片,置顯微鏡下檢查。此法適合于檢查皮屑中蟲(chóng)體較多的病料。(2)蟲(chóng)體濃集法 為了在較多的病料中,檢出其中較少的蟲(chóng)體,提高檢出率,可采用濃集法。此法先取較多的病料,置于試管中,加入10%NaOH溶液,在灑精燈上煮沸數(shù)分鐘,使皮屑溶解,蟲(chóng)體自皮屑中分離出來(lái)。然后其自然沉淀或以每分鐘2 000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心20分鐘,吸取沉渣鏡檢。(四)豬附紅細(xì)胞體的實(shí)驗(yàn)室檢查方法可用來(lái)作為診斷的最重要的臨床癥狀是:貧血,對(duì)外界反應(yīng)遲鈍,
發(fā)熱高達(dá)40℃或更高。其它示病癥狀是:耳廓邊緣變色,皮膚變態(tài)反應(yīng)。查找病原是確認(rèn)該病的主要方法,新鮮血液加等量生理鹽水稀釋后置顯微鏡下觀察,可見(jiàn)蟲(chóng)體呈球形,逗點(diǎn)形,桿狀或顆粒狀。由于蟲(chóng)體附著在紅細(xì)胞表面有張力作用,紅細(xì)胞在視野內(nèi)上下震動(dòng)或左右運(yùn)動(dòng),紅細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生了變化,呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。血液姬姆薩染色后,蟲(chóng)體可染成紫紅色,但該種染色方法的缺點(diǎn)是姬姆薩色素沉著,容易形成假像。血清經(jīng)吖啶橙染色在熒光顯微鏡下可見(jiàn)各種形狀的附紅細(xì)胞體單體。但這一技術(shù)的復(fù)雜性使其只適宜實(shí)驗(yàn)室診斷。該染色情況下,附紅細(xì)胞體呈淺至深桔黃色。血清診斷方法包括IHA試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)或ELISA方法,但抗體的產(chǎn)生與病原數(shù)量的增多(而不是與感染發(fā)生的時(shí)間)有暫時(shí)的相關(guān)性。這意味著抗體的產(chǎn)生呈波浪形。即使數(shù)次急性發(fā)作后,抗體滴度也只能在2-3個(gè)月內(nèi)維持較高水平,之后便會(huì)下降到閾值以下,這表明假陰性是常見(jiàn)的。所有血清學(xué)方法只適合于群體診斷。PCR診斷已經(jīng)成功地用于豬附紅細(xì)胞體病。不過(guò),該方法不能區(qū)別帶蟲(chóng)豬和發(fā)病豬。動(dòng)物試驗(yàn)也是確認(rèn)豬附紅細(xì)胞體病的方法之一。常用的試驗(yàn)動(dòng)物是小白鼠,用小豬作試驗(yàn)動(dòng)物時(shí)則需摘除脾臟。懷疑為豬附紅細(xì)胞體病的豬在切除脾臟后觀察3-20天,若是帶蟲(chóng)豬則會(huì)出現(xiàn)急性附紅細(xì)胞體的癥狀,此時(shí)可通過(guò)查找血涂片中的蟲(chóng)體進(jìn)行豬寄生蟲(chóng)病診斷豬附紅細(xì)胞體病的診斷方法豬附紅細(xì)胞體病的診斷方法主要有以下幾種:1、懸滴法新鮮血液加等量生理鹽水稀釋后吸取數(shù)滴置載玻片上,加蓋蓋玻片,置顯微鏡下觀察,可見(jiàn)蟲(chóng)體呈球形,逗點(diǎn)形,桿狀或顆粒狀。由于蟲(chóng)體附著在紅細(xì)胞表面有張力作用,紅細(xì)胞在視野內(nèi)上下震動(dòng)或左右運(yùn)動(dòng),紅細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生了變化,呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。該方法也適用于抗凝血液?鼓捍娣1-2天一般并不影響檢測(cè)結(jié)果。2、直接涂片法取新鮮或抗凝血少許置載玻片上推成薄層,然后在顯微鏡下直接觀察?煽吹礁郊t細(xì)胞體呈球形,逗點(diǎn)形,桿狀或顆粒狀。寄生有附紅細(xì)胞體的紅細(xì)胞呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。該方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單、快速。不足之處一是對(duì)推片的技術(shù)有一定要求,紅細(xì)胞必需推成薄層;二是容易和其他導(dǎo)致紅細(xì)胞變形的情況混淆。3、染色檢查血液涂片經(jīng)姬姆薩染色后,蟲(chóng)體可染成紫紅色,但該種染色方法的缺點(diǎn)是姬姆薩色素沉著,容易形成假像。血清經(jīng)吖啶橙染色在熒光顯微鏡下可見(jiàn)各種形狀的附紅細(xì)胞體單體。但這一技術(shù)的復(fù)雜性使其只適宜實(shí)驗(yàn)室診斷。該染色情況下,附紅細(xì)胞體呈淺至深桔黃色。4、血清學(xué)診斷包括IHA試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)或ELISA方法,但抗體的產(chǎn)生與病原數(shù)量的增多(而不是與感染發(fā)生的時(shí)間)有暫時(shí)的相關(guān)性。這意味著抗體的產(chǎn)生呈波浪形。即使數(shù)次急性發(fā)作后,抗體滴度也只能在2-3個(gè)月內(nèi)維持較高水平,之后便會(huì)下降到閾值以下,這表明假陰性是常見(jiàn)的。所有血清學(xué)方法只適合于群體診斷。5、PCR診斷國(guó)外已有PCR技術(shù)用于豬附紅細(xì)胞體病診斷的報(bào)道。不過(guò),該方法不能區(qū)分帶蟲(chóng)豬和發(fā)病豬。6、動(dòng)物試驗(yàn)常用的試驗(yàn)動(dòng)物是小白鼠,用小豬作試驗(yàn)動(dòng)物時(shí)則需摘除脾臟。懷疑為豬附紅細(xì)胞體病的豬在切除脾臟后觀察3-20天,若是帶蟲(chóng)豬則會(huì)出現(xiàn)急性附紅細(xì)胞體的癥狀,此時(shí)可通過(guò)查找血涂片中的蟲(chóng)體進(jìn)行診斷。
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實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷
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實(shí)驗(yàn)室檢查確診
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