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豬病發(fā)病數(shù)量:診斷豬玉米赤霉烯酮中毒有什么方法?

診斷豬玉米赤霉烯酮中毒有什么方法?

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感觀檢查將購(gòu)買的玉米直接堆放在新蓋平房的水泥地面上,開包檢查,聞?dòng)忻刮,發(fā)現(xiàn)有的玉米粒表面長(zhǎng)有白色綿絲狀物;粉碎的剩余玉米也有霉味。原分離培養(yǎng)取玉米粒和混合飼料樣,0.1%升汞消毒1min,無菌蒸餾水沖洗,然后將樣品分別無菌接種于加有抗菌素的卡貝克(czapek)瓊脂培養(yǎng)基平皿各5個(gè),另設(shè)3個(gè)無菌蒸餾水對(duì)照培養(yǎng)基平皿,25~28℃培養(yǎng)72h。接樣培養(yǎng)基都長(zhǎng)有白色絨絲狀物,取培養(yǎng)物涂片,乳酸酚棉藍(lán)染色鏡檢,見有分隔菌絲和孢子,大分生孢子呈鐮刀狀、中間有2~5個(gè)隔,小分生孢子多為卵圓形細(xì)胞;而對(duì)照培養(yǎng)基平皿均未見類似菌落。毒素檢測(cè)隨機(jī)抽取玉米樣和混合飼料樣,玉米赤霉烯酮毒素提取和氣相色譜測(cè)定參考文獻(xiàn)的方法進(jìn)行。測(cè)得玉米樣和混合飼料樣中玉米赤霉烯酮的含量分別為2.51mg/kg和1.85mg/kg。挑取上述病原分離培養(yǎng)物,以pH8.0的PBS液稀釋,用0.3μm濾膜過濾除菌,將少量過濾液接種到長(zhǎng)成單層的PK15細(xì)胞上,36h后,細(xì)胞質(zhì)濃縮、顆;,核濃縮、碎裂、液化,細(xì)胞呈中毒樣病變;而未接種過濾液的細(xì)胞生長(zhǎng)正常。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查,初步診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。
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實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
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