藥物敏感試驗(yàn)平板挖洞法如何操作?
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驗(yàn)藥物有水煎劑和粉細(xì)兩種。粉劑可 直接進(jìn)行試驗(yàn)。水煎劑多配成1克/毫升的溶液,即取一定量 的
中草藥,磨粉后加5?10倍量的水,如中藥質(zhì)輕,體積較大 時(shí),水量以淹
沒(méi)藥物為止,煮沸1小時(shí),濾渣,再加同量水,再 煮沸1小時(shí),濾過(guò)。將兩次藥液混合,加熱濃縮至毎毫升含1 克生藥的濃度,經(jīng)55.158千帕(8磅)滅菌15分鐘,即為中草 藥原液,置冰箱中備用。用接種環(huán)(或滅菌辦拭子)取被試菌的 10?18小時(shí)肉湯培養(yǎng)物,均勻地涂布在瓊脂平板上。以直徑3 毫米的金屬打孔器(金屬管)在培養(yǎng)基上打孔,用針頭挑去孔 內(nèi)瓊脂,并于洞底加1滴溶化的滅菌瓊脂,以密封孔底。加藥 于孔內(nèi),其劑量為0.025毫升,粉劑則加滿。將平板置37’C溫 箱中,培養(yǎng)24?48小時(shí)。觀察結(jié)果時(shí),可按紙片法測(cè)量抑菌圈 的直徑。
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