雞的腦
脊髓炎
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雞傳染性腦
脊髓炎(Avian Encephalomyelitis，AE)是一種主要侵害幼雞的傳染病，以 共濟(jì)失調(diào)和快速
震顫特別是頭部震顫為特征。AE很大程度上是一種經(jīng)蛋傳播的疾病。雞傳染性腦脊髓炎-介紹 經(jīng)種蛋傳播，其子代在4周齡內(nèi)出現(xiàn)臨床癥狀與死亡，水平傳播出現(xiàn)癥狀率很低。1932年美國(guó)首先報(bào)道此病，其后在世界各地陸續(xù)有此病流行的報(bào)告。在我國(guó)，1980年曾有疑似
雞腦脊髓炎的報(bào)道；1982年通過病理組織學(xué)方法，作出了此病的診療報(bào)告；1983年通過
流行病學(xué)的調(diào)查、病理組織學(xué)的研究和人工發(fā)病等試驗(yàn)，確診了此病，進(jìn)一步證實(shí)AE在我國(guó)的存在。此后，廣西、江蘇、福建、上海、山東、內(nèi)蒙古、黑龍江、河北、河南、江西等全國(guó)大多數(shù)商業(yè)化養(yǎng)禽地區(qū)都有此病的報(bào)道。有學(xué)者用ELISA檢測(cè)方法，通過雞胚敏感試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)許多未接種疫苗的產(chǎn)蛋雞群已被感染，證明此病在集約化的禽場(chǎng)中已廣泛存在，成為危害養(yǎng)雞業(yè)的又一大敵。雞傳染性腦脊髓炎-病原 雞傳染性腦脊髓炎病毒(AEV)屬于小RNA病毒科的腸道病毒屬。病毒粒子具有六邊形輪廓，無(wú)囊膜，病毒直徑約有26±0.4nm，呈20面體對(duì)稱，其衣殼(或病毒粒子)由32或42個(gè)殼粒組成，病毒在氯化銫中的浮密度為1.31～1.33g/ml。馬學(xué)恩對(duì)AEV的結(jié)構(gòu)也有類似的報(bào)道。 病毒對(duì)氯仿、乙醚、酸、
胰酶、
胃蛋白酶及DNA酶有抵抗力，所有AEV的不同分離株屬同一血清型，但各毒株的致病性和對(duì)組織的親嗜性不同，大部分野外分離株為嗜腸性，且易經(jīng)口傳染給雞并從糞便排毒，通過垂直傳播或出殼早期水平傳播使易感雛雞致病，在這些病例中，一般表現(xiàn)有神經(jīng)癥狀。野外分離株通過易感小雞的腦內(nèi)接種也能產(chǎn)生神經(jīng)癥狀�！ ∨哌m應(yīng)毒株與野毒株的致病性有明顯的不同，胚適應(yīng)株已失去野毒株的嗜腸道特性，因此經(jīng)口給予胚適應(yīng)株是不會(huì)傳染的，病毒也不能在腸道中復(fù)制。非經(jīng)口途徑接種胚適應(yīng)株不會(huì)在糞便中排毒。胚適應(yīng)株是高度嗜神經(jīng)性，通過腦內(nèi)、皮下、肌肉等非經(jīng)口方法接種可引起嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀。這種毒株一般不能水平傳播。常用的胚適應(yīng)毒株是VR株，用胚適應(yīng)株接種易感雞胚孵育至18天可出現(xiàn)特征性病變，如嚴(yán)重肌肉
營(yíng)養(yǎng)不良、胚體矮化、無(wú)論是自然野毒株或胚適應(yīng)株，均可在敏感的雛雞、雞胚和雞胚的多種細(xì)胞如腦細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、腎細(xì)胞和胰細(xì)胞及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞上生長(zhǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)一般無(wú)細(xì)胞病變，用易感雞胚于5～6天齡經(jīng)卵黃囊接種是繁殖AEV最常用的方法。雞傳染性腦脊髓炎-流行病學(xué) 自然感染見于雞、
雉、
鵪鶉和火雞、染，但雛禽才有明顯的臨診癥狀。雛鴨、
珍珠雞等，雞對(duì)本病最易感。各種日齡均可感雛
鴿可被人工感染，但小鼠、豚鼠、家
兔和猴對(duì)病毒的腦內(nèi)接種有抵抗力�！ 〗�(jīng)腦內(nèi)接種很易在小雞復(fù)制AE，此病可通過垂直傳播，也能水平傳播。AE的主要傳播方式是消化道傳播，感染雞通過糞便排出病毒，其排毒時(shí)間約為5～14天，感染時(shí)雞齡越小，排毒時(shí)間越長(zhǎng)。病毒在環(huán)境中有較強(qiáng)的抵抗力，在墊料中可存活4周以上，易感雞接觸到被污染的飼料、飲水、用具等而被感染。垂直傳播是本病主要的傳播方式，產(chǎn)蛋雞感染3周內(nèi)所產(chǎn)的蛋帶有病毒。一些嚴(yán)重感染的胚蛋在孵化后期死亡。大部分的雞胚可以孵化出殼，但出殼的雛禽在出殼數(shù)天內(nèi)陸續(xù)出現(xiàn)典型的臨診癥狀。一般在感染之后3～4周，種蛋內(nèi)的母源抗體可保護(hù)雛雞順利出殼并不出現(xiàn)AE的臨診癥狀�！ ”静∫荒晁募揪砂l(fā)生，發(fā)病率及死亡率隨雞群的易感雞多少、病原的毒力高低、發(fā)病的日齡大小不同而有所不同。雛雞發(fā)病率一般為40％～60％，死亡率10％～25％，甚至有更高，如畢英佐等報(bào)道廣東某種雞場(chǎng)用開產(chǎn)后一個(gè)月內(nèi)的蛋孵出的1～6批雛雞發(fā)生 AE，死亡率高達(dá)81％～100％。雞傳染性腦脊髓炎-臨床癥狀 經(jīng)垂直傳播而感染的小雞潛伏期1～7天，經(jīng)水平傳播感染的小雞，其潛伏期為11天以上(12～30天)。 此病主要發(fā)生于3周齡以內(nèi)的雛雞，筆者也曾多次確診過于6～7周齡的石岐雜雞發(fā)生AE的病例。在自然暴發(fā)的病例中，雛雞出殼后就陸續(xù)發(fā)病，病雛最初表現(xiàn)為遲鈍，精神沉郁，小雞不愿走動(dòng)或走幾步就蹲下來，常以跗關(guān)節(jié)著地，繼而出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)，走路蹣跚，步態(tài)不穩(wěn)，驅(qū)趕時(shí)勉強(qiáng)用跗關(guān)節(jié)走路并拍動(dòng)翅膀。病雛一般在發(fā)病3天后出現(xiàn)麻痹而倒地側(cè)臥，頭頸部震顫一般在發(fā)病5天后逐漸出現(xiàn)，一般呈陣發(fā)性音叉式的震顫；人工刺激如給水加料、驅(qū)趕、倒提時(shí)可激發(fā)。有些病雞趾關(guān)節(jié)卷曲、運(yùn)動(dòng)障礙、羽毛不整和發(fā)育受阻，平均體重明顯低于正常水平。部分存活雞可見一側(cè)或兩側(cè)眼球的晶狀體混濁或淺藍(lán)色褪色，眼球增大及失明�！ “l(fā)病早期小雞食欲尚好，但因運(yùn)動(dòng)障礙，病雞難以接近食槽和水槽而饑渴衰竭死亡。在大群飼養(yǎng)條件下，雞只也會(huì)互相踐踏或繼發(fā)細(xì)菌性感染而死亡。中成雞感染除出現(xiàn)血清學(xué)陽(yáng)性反應(yīng)外，無(wú)明顯的臨診癥狀及肉眼可見的病理變化。產(chǎn)蛋雞感染后產(chǎn)蛋下降16％～43％。產(chǎn)蛋下降后1～2周恢復(fù)正常。孵化率可下降10％～35％，蛋重減少，除畸形蛋稍多外，蛋殼顏色基本正常。雞傳染性腦脊髓炎-病理變化剖檢變化 一般內(nèi)臟器官無(wú)特征性的肉眼病變，個(gè)別病例能見到腦膜血管充血、出血。如細(xì)心觀察可偶見病雛肌胃的肌層有散在的灰白區(qū)。成年雞發(fā)病無(wú)上述病變。組織學(xué)病變 主要病變集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和部分內(nèi)臟器官如肌胃、腺胃、胰腺、心肌和腎臟等，而周圍神經(jīng)無(wú)病變，這是一個(gè)重要的鑒別診斷要點(diǎn)�！ ≈袠猩窠�(jīng)主要顯示
病毒性腦炎的病變，如神經(jīng)元變性，膠質(zhì)細(xì)胞增生和血管套現(xiàn)象。 在延腦和脊髓(特別是腰脊髓)灰質(zhì)中可見神經(jīng)元中央染色質(zhì)溶解、神經(jīng)元細(xì)胞腫大、樹突和軸突消失、細(xì)胞核偏移或消失，僅剩下染色均勻的粉紅色或紫紅色神經(jīng)元?dú)堐E。在中腦、
小腦的分子層、延腦和脊髓中發(fā)現(xiàn)有膠質(zhì)細(xì)胞增生灶。腦組織內(nèi)有以淋巴細(xì)胞性管層為主的血管套現(xiàn)象�！ �(nèi)臟器官的病變表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞灶性增生，在腺胃粘膜和肌層、胰腺、肌胃、腎等器官切片中均有發(fā)現(xiàn)�！ �1日齡腦內(nèi)接種發(fā)病的雞及6日齡雞胚卵黃囊接種后孵出的病雞，其相應(yīng)器官的組織切片均不同程度地發(fā)現(xiàn)上述的病理學(xué)變化。雞傳染性腦脊髓炎-診斷鑒別初步的診斷 根據(jù)雛禽出殼后陸續(xù)出現(xiàn)
癱瘓、早期食欲尚好、剖檢無(wú)明顯的特征性肉眼變化，追蹤到其種雞有短暫的產(chǎn)蛋下降，且某段時(shí)間內(nèi)孵出的多批小雞需分發(fā)到不同地方飼養(yǎng)，但均出現(xiàn)麻痹、震顫和死亡等情況，結(jié)合組織病理學(xué)特征性變化，即可作出初步的診斷。確診應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。[1]病原的分離與鑒定 1．病原的分離采多只出現(xiàn)典型癥狀的小雞腦組織混合，按常規(guī)方法制備腦組織懸液，腦內(nèi)接種1日齡無(wú)AE母源抗體或SPF雛雞，每只接種0.03ml，接種后1～4周齡內(nèi)出現(xiàn)典型的癥狀。收集有典型癥狀的病雞的腦、胰腺作繼代用的種毒。也可將病料通過卵黃囊途徑接種5～7日的易感雞胚，接種后12天檢查部分雞胚是否有胚胎萎縮、爪卷曲、肌營(yíng)養(yǎng)不良等特征性變化，但野外分離病毒常不能使SPF雞胚產(chǎn)生病變，需
盲傳3～4代，才能適應(yīng)雞胚產(chǎn)生病變。其余讓其孵化至出雛，出殼后10天內(nèi)便可見AE的癥狀出現(xiàn)，此時(shí)，取其病雛的腦、腺胃、胰腺等作病理組織學(xué)的檢查�！ �2.病原的鑒定 病毒的檢查可用熒光抗體技術(shù)(FA)，直接從病雞的腦、胰腺和腺胃中檢出AE病毒抗原。其方法是將病料制成6～7µm厚的冷凍切片，固定于載玻片上．空氣干燥；用4℃丙酮固定10min，傾去丙酮液，空氣干燥；用
抗AEV的特異性熒光抗體于室溫染色30min，經(jīng)pH7.4的磷酸鹽緩沖鹽水沖洗20min，然后加蓋玻片，并用pH7.4的緩沖
甘油封片。在熒光顯微鏡下檢查，陽(yáng)性雞的組織中可見黃綠色的熒光。此時(shí)，還可用瓊脂擴(kuò)散疑集試驗(yàn)(AGP)，將病料接種SPF雞或雞胚，取發(fā)病雞或雞胚的腦、胃腸和胰等制備待檢瓊擴(kuò)抗原，用已知AE陽(yáng)性血清檢查病毒的存在。血清學(xué)診斷 1．病毒中和試驗(yàn)(VN) 將VR株10倍系列稀釋的病毒液0．5ml中加等量的5倍稀釋的被檢血清，置37℃作用60min后，各取約0．2ml，接種于SPF雞胚的卵黃囊內(nèi)，置37℃孵育觀察，至18日胚齡時(shí)，觀察雞胚的特征性病變，計(jì)算EID50。從病毒對(duì)照的 EID50減去上述的EID50值的對(duì)數(shù)差異計(jì)算中和指數(shù)，中和指數(shù)在1.0以上，視為抗體陽(yáng)性�！ �2．雞胚敏感試驗(yàn) 經(jīng)蛋黃囊途徑對(duì)6日齡的雞胚接種100EID50/0.1ml的AE雞胚適應(yīng)株，接種后觀察12天，檢查雞胚有無(wú)特征性病變，如果100％雞胚有病變，種雞被認(rèn)為易感的，50％以下有病變表明雞群有免疫力，中間數(shù)表明雞群免疫不全或有近期的感染�！ �3．瓊脂擴(kuò)散凝集試驗(yàn)(AGP) 利用AE-VR雞胚適應(yīng)株或分離的野毒株分別接種 SPF雞胚，收集發(fā)病胚的腦、胃腸和胰腺制成瓊脂擴(kuò)散抗原。在含20％NaCl和0.5％苯酚的0.8％瓊脂凝膠中，用這種抗原進(jìn)行AGP試驗(yàn)檢測(cè)AE抗體，結(jié)果穩(wěn)定，特異性強(qiáng)，方法簡(jiǎn)便迅速�！ �4．酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 此法已廣泛被國(guó)外采用于評(píng)價(jià)母雞AE抗體的水平或作免疫效果的監(jiān)測(cè)。美國(guó)IDEXX公司有商品化的試劑盒面市。此法與VN有良好的可比性，能定量檢測(cè)血清中的AE抗體水平，加上每次可同時(shí)檢測(cè)大量的血清樣品，并容易將結(jié)果輸入計(jì)算機(jī)軟件程序中進(jìn)行處理，因此，適用于禽場(chǎng)進(jìn)行AE抗體的快速檢測(cè)和評(píng)價(jià)AE抗體水平。其ELISA滴度用ET表示，同時(shí)用協(xié)同變異百分率(CV)表示群體內(nèi)抗體的整齊度�！ 〈送�，還有間接免疫熒光和被動(dòng)血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)
雞血清中AE抗體的報(bào)道。鑒別診斷 1．與有腳弱、癱瘓等癥狀的疾病區(qū)別 雞新城疫：有呼吸道癥狀，拉綠糞，存活雞有頭頸扭曲的癥狀，腺胃及消化道有出血。HI抗體明顯增高，組織學(xué)雖有病毒性腦炎的病變，但腺胃、肌胃、胰腺等內(nèi)臟器官組織學(xué)無(wú)淋巴細(xì)胞灶性增生，分離病毒能凝集雞的紅細(xì)胞�！ ●R立克氏病：臨診死亡一般發(fā)生在70日齡以后，而有內(nèi)臟
腫瘤病變和外周神經(jīng)病變，如單側(cè)性的坐骨神經(jīng)腫大。AE無(wú)外周神經(jīng)系統(tǒng)的病變。病毒性關(guān)節(jié)炎 自然感染多發(fā)于4～7周齡雞，病雞跛行，跗關(guān)節(jié)腫脹，雞群中有部分雞呈現(xiàn)發(fā)育遲緩、嘴腳蒼白、羽毛生長(zhǎng)不良等，心肌纖維間有異噬細(xì)胞浸潤(rùn)�！ ∑渌�(xì)菌感染如
葡萄球菌、大腸桿菌等引起的關(guān)節(jié)炎可引起關(guān)節(jié)的紅腫熱疼等炎癥癥狀。
維生素E、硒缺乏：肉眼可見腦軟化，小腦充血、出血、腫脹和腦回不清等病變，組織學(xué)病變?nèi)缇植咳毖詨乃溃撍枨实�。硒缺乏病可見腹部皮下有多量液體
積聚，有時(shí)呈藍(lán)紫色，有些雞肌肉蒼白，胸肌有白線狀壞死的肌纖維。補(bǔ)充維生素E、硒合劑能控制病情�！ �
維生素B2缺乏：常發(fā)生于2周齡雛雞。雛雞腳趾向內(nèi)彎曲，腿麻痹，行走困難，剖檢時(shí)見坐骨神經(jīng)比正常腫大3～4倍。幼雛維生素B2缺乏是由種雞群B2缺乏引起的，每只雞每天喂服維生素B25mg可得到改善�！ �
維生素B1缺乏、
煙酸缺乏、
維生素D3缺乏也會(huì)引起腳弱癥狀，適當(dāng)?shù)匮a(bǔ)充能控制病情，改善癥狀�！ ≈卸拘砸蛩兀核幬镏卸救缈骨蛳x藥拉沙星菌素使用時(shí)間過長(zhǎng)或與
氯霉素合用；莫能霉素或鹽霉素與
紅霉素、氯霉素、枝原凈等同時(shí)使用，會(huì)使雛雞腳軟，共濟(jì)失調(diào)等。另外近年來因使用含氟過高的磷酸氫鈣而造成的
氟中毒，雛雞腿無(wú)力，走路不穩(wěn)，嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)跛行或癱瘓，剖檢見
雞胸骨發(fā)育與日齡不符，腿骨松軟，易折而不斷，主要原因是高氟進(jìn)入機(jī)體后與血鈣結(jié)合成不溶性氧化物使血鈣降低，為補(bǔ)充血鈣，骨鈣不斷釋放而導(dǎo)致骨鈣化不全。引起產(chǎn)蛋下降 2．與引起產(chǎn)蛋下降，但無(wú)明顯的癥狀和不引起雞死亡的疾病的區(qū)別 產(chǎn)蛋下降綜合征：產(chǎn)蛋嚴(yán)重下降，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，恢復(fù)后產(chǎn)蛋很難達(dá)到原來水平，且蛋殼變白色，產(chǎn)無(wú)殼蛋、軟殼蛋或畸形蛋。減蛋后1周取輸卵管的刮落物作病料接種鴨胚，可分離到能凝集雞血細(xì)胞的腺病毒。 傳染性支氣管炎：有呼吸性癥狀，產(chǎn)蛋下降，畸形蛋增加，蛋的品質(zhì)變化，蛋清稀薄如水�！ 》堑湫托鲁且撸褐挥挟a(chǎn)蛋下降，雞無(wú)明顯的癥狀，減蛋1周后，HI抗體明顯上升�！ 〉椭虏×Χ局暌鸬那萘鞲校褐挥挟a(chǎn)蛋下降，通過血清學(xué)及病原分離進(jìn)行鑒別。雞傳染性腦脊髓炎-防制措施(一)防制措施 1．加強(qiáng)消毒與隔離措施，防止從疫區(qū)引進(jìn)種苗和種蛋。 2．雞感染后一個(gè)月內(nèi)的蛋不宜孵化。 3．AE發(fā)生后，目前尚無(wú)特異性療法。將輕癥雞隔離飼養(yǎng)，加強(qiáng)管理并投與抗生素預(yù)防細(xì)菌感染，維生素E、維生素B1、谷維素等藥可保護(hù)神經(jīng)和改善癥狀。重癥雞應(yīng)挑出淘汰。全群還可用抗AE的卵黃抗體(康復(fù)雞或免疫后抗體滴度較高的雞群所產(chǎn)的蛋制成)作肌肉注射，每只雛雞0.5～1.0ml，每日1次，連用2天。(二)免疫接種 1．活毒疫苗一種用1143毒株制成的活苗，可通過飲水法接種，雞接種疫苗后1～2周排出的糞便中能分離出AE病毒，這種疫苗可通過自然擴(kuò)散感染且具有一定的毒力，故小于8周齡的雞只不可使用此苗，以免引起發(fā)病。處于產(chǎn)蛋期的雞群也不能接種這種疫苗，否則可能使產(chǎn)蛋量下降10％～15％，持續(xù)時(shí)間從10天至2周。建議于10周以上，但不能遲于開產(chǎn)前4周接種疫苗。在接種后不足4周所產(chǎn)的蛋不能用于孵化，以防仔雞由于垂直傳播而導(dǎo)致發(fā)病�！ ×硪环NAE活苗常與雞痘弱毒苗制成二聯(lián)苗。一般于10周齡以上至開產(chǎn)前4周之間進(jìn)行翼膜刺種，接種后4天，在接種部位出現(xiàn)微腫，結(jié)出黃色或紅色腫起的痘痂，并持續(xù)3～4天，第9天于刺種部位形成典型的痘斑為接種成功。因制苗的種毒為雞胚適應(yīng)毒株，病毒難以在個(gè)體間擴(kuò)散，那些沒接種的雞就會(huì)處于易感狀態(tài)。為了避免遺漏接種雞，應(yīng)至少抽查雞群中5％的雞只作痘痂檢查，無(wú)痘痂者應(yīng)再次接種。使用這種胚適應(yīng)苗，疫苗在雞胚連續(xù)傳代會(huì)發(fā)生神經(jīng)適應(yīng)性，故偶見部分后備雞群翼翅接種AE苗后2周內(nèi)可能出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的免疫副反應(yīng)。 2．滅活疫苗AE滅活苗用AEV野毒或AR-AE胚適應(yīng)株接種SPF雞胚，取其病料滅活制成油乳劑苗。這種疫苗安全性好，免疫接種后不排毒、不帶毒，特別適用于無(wú)AE病史的雞群�？捎诜N雞開產(chǎn)前18～20周或產(chǎn)蛋雞作緊急預(yù)防接種。滅活苗價(jià)格較高，且要逐只抓雞注射，但免疫效果確實(shí)，從而達(dá)到通過母源抗體保護(hù)雛雞的目的。
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