鵝雞法氏囊病毒感染癥的確診方法有哪些?
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鵝法氏囊病是一種新發(fā)現(xiàn)的病毒性傳染病，要確診必須進(jìn)行病毒分離鑒定及血清學(xué)診斷。(1)病毒分離①病料采集與處理。采集具有典型病變的患雛鵝或死亡鵝的法氏囊組夠{，剪碎磨細(xì)加入滅菌生理鹽水或PBS液制成1：5 --1：10的懸液，經(jīng)3 000轉(zhuǎn)／分，離心30分鐘。吸取上清液，按每毫升加入
青霉素、
鏈霉素各1 000單位混勻后置4～8℃水箱中作用2～4小時(shí)，或37℃溫箱中作用30分鐘，經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)為無(wú)菌者作為病毒分離材料。②禽胚接種。將病毒分離材料接種4～6枚12日齡易感鵝胚，每胚絨尿腔0.2毫升，或接種4～6枚10～11日齡SPF雞胚，每胚絨尿腔0.2毫升。通常于72～120小時(shí)死亡。死亡胚冷卻后吸取絨尿液，經(jīng)無(wú)菌檢驗(yàn)后凍結(jié)保存做進(jìn)一步鑒定。③病毒鑒定。鵝及雞接種：鵝胚絨尿液毒或雞胚絨尿液毒接種4～6只25～35日齡雛鵝或4～6只30日齡左右SPF雞，每只皮下或肌肉注射0.5毫升。通常在接種后48小時(shí)左右開(kāi)始出現(xiàn)癥狀，72～120小時(shí)出現(xiàn)死亡。死亡雛鵝和雛雞均具有法氏囊病典型病變。保護(hù)試驗(yàn)：用雞法氏囊病高免抗血清接種4～6只25～35日齡易感雛鵝，每只皮下或肌肉注射2毫升。血清注射后6～l2小時(shí)接種鵝胚或雞胚分離毒，每只皮下注射0.2毫升。另4～6只注射生理鹽水代替血清作為對(duì)照組，觀察10天。血清組鵝全部健活，后者發(fā)病死亡，并具有典型病變。瓊擴(kuò)試驗(yàn)：瓊擴(kuò)被檢抗原制備，取患病鵝典型病變的法氏囊組織，剪碎磨細(xì)用生理鹽水做1:5稀釋制成勻漿在冰箱內(nèi)反復(fù)凍融3～5次，經(jīng)1 000轉(zhuǎn)／分，離心10分鐘。取上清液加入等量氯仿振搖30分鐘后，經(jīng)3 000轉(zhuǎn)／分，離心10分鐘。取上液加入0.01%硫柳汞防腐，凍結(jié)保存作為被檢抗原。抗血清：用已知雞法氏囊病高免血清、本病鵝康復(fù)血清或高免血清。方法：按常規(guī)方法進(jìn)行交叉瓊擴(kuò)試驗(yàn)。結(jié)果，被檢抗原應(yīng)與已知雞法氏囊抗血清和本病鵝的抗血清明顯陽(yáng)性反應(yīng)。雞法氏囊病標(biāo)準(zhǔn)抗原與雞法氏囊病抗血清和鵝抗血清均顯陽(yáng)性反應(yīng)。
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實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診
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