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人視黃醇結(jié)合蛋白基因的高效表達及其專用引物

公開(公告)號 CN1116413C  
公開(公告)日 2003.07.30  
申請(專利)號 CN99121831.0  
申請日期 1999.10.19  
專利名稱 人視黃醇結(jié)合蛋白基因的高效表達及其專用引物  
主分類號 C12N15/12  
分類號 C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 徐琪壽;梁學(xué)穎;黃英武;劉云;劉志紅;劉耀清  
地址 100850北京市海淀區(qū)太平路27號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 關(guān)暢  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項 一種人視黃醇結(jié)合蛋白基因的高效表達方法,其特征在于由以下步驟組成:(1)從人肝組織中提取總RNA;(2)合成上游引物P1:5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’下游引物P2:5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’;(3)通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)得到人視黃醇結(jié)合蛋白基因片段;(4)將基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表達載體中;(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表達。  
摘要 本發(fā)明公開了一種人視黃醇結(jié)合蛋白的基因高效表達方式及其專用引物,其方法為:(1)從人肝組織中提取總RNA;(2)合成上游引物P1:5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’;下游引物P2:5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’;(3)通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)得到人視黃醇結(jié)合蛋白基因片段;(4)將基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表達載體中;(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表達。本發(fā)明公開的專用引物,上游引物為P1:5’TTT GAA TTC ATA TGG AGC GCT ACT GCC GAG TGA G3’;下游引物為P2:5’TTT GGATCC CTA CAA AAG GTT TCT TTC 3’。本方法具有表達量高,成本低等優(yōu)點。  
國際公布  
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