一種利用中國紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法
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公開(公告)號
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CN1118578C
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公開(公告)日
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2003.08.20
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申請(專利)號
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CN00125305.0
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申請日期
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2000.09.21
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專利名稱
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一種利用中國紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法
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主分類號
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C12P17/02
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分類號
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C12P17/02;C12P7/62
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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華東理工大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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鐘建江;董浩迪
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地址
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200237上海市梅隴路130號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海順華專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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李鴻儒
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種利用中國紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)云南紫杉烷的方法，包括從植株幼莖外植體誘導(dǎo)的愈傷組織中分離獲得中國紅豆杉細(xì)胞，其特征在于還包括如下步驟：(1)將中國紅豆杉細(xì)胞移入液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基采用Murashige-Skoog培養(yǎng)基，另添加0.1-1.0mg/L6-芐基腺嘌呤，0.05-0.5mg/L2，4-二氯苯氧乙酸，0.05-0.5mg/L萘乙酸，20-500mg/L抗壞血酸及10-50mg/L蔗糖，每隔14天傳代一次，培養(yǎng)使用旋轉(zhuǎn)式搖床，轉(zhuǎn)速為60-200rpm，培養(yǎng)溫度20-30℃，暗培養(yǎng)，接種量為20-200g/L濕重；(2)然后將所獲得的中國紅豆杉濕細(xì)胞置于含培養(yǎng)基的搖瓶中暗培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為12-25天，從所獲得的培養(yǎng)物中采用常規(guī)的方法收集云南紫杉烷；在搖瓶培養(yǎng)前期細(xì)胞快速生長階段，添加誘導(dǎo)劑二氫甲基茉莉酮酸酯或甲基茉莉酮酸酯至培養(yǎng)基中誘導(dǎo)劑的最終濃度為1-1000μM。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種利用中國紅豆杉細(xì)胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法。本發(fā)明利用中國紅豆杉細(xì)胞(Taxus chinensis)的懸浮培養(yǎng)，通過誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)與補(bǔ)糖添加的組合，十分顯著地提高了云南紫杉烷(Tc)的生產(chǎn)效率，獲得的Tc產(chǎn)量大大超過目前文獻(xiàn)報道的最高值，Tc生產(chǎn)率最高可達(dá)30.2mg/(L.d)，最高產(chǎn)量可達(dá)538.9mg/L，是一種很有工業(yè)應(yīng)用前景的Tc的生產(chǎn)方法。
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國際公布
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