表達(dá)為不溶性聚集體的重組蛋白質(zhì)的純化方法
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公開(公告)號(hào)
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CN1468255A
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公開(公告)日
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2004.01.14
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN01815355.0
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申請(qǐng)日期
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2001.08.18
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專利名稱
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表達(dá)為不溶性聚集體的重組蛋白質(zhì)的純化方法
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主分類號(hào)
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C07K1/113
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分類號(hào)
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C07K1/113;C07K1/36
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2000.9.8 DE 10044360.5
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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默克專利股份公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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R·蘇克;O·克羅姆維爾;H·費(fèi)比
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地址
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德國(guó)達(dá)姆施塔特
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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PCT/EP01/09552 2001.8.18
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進(jìn)入國(guó)家日期
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2003.03.07
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國(guó)專利代理(香港)有限公司
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代理人
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張?jiān)?孟凡宏
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國(guó)省代碼
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德國(guó);DE
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主權(quán)項(xiàng)
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純化的重組蛋白質(zhì)的制備方法，該蛋白質(zhì)是可溶解的生物活性物的形式且可作為生理學(xué)介質(zhì)直接用于醫(yī)療用途，該制備源于細(xì)菌表達(dá)后的蛋白質(zhì)聚集體(“包埋體”)，后者不溶于表達(dá)介質(zhì)，該方法特點(diǎn)在于進(jìn)行了以下步驟：(i)將分離出的不溶性蛋白質(zhì)聚集體攝取入有機(jī)變性試劑中，(ii)將(i)所得溶液使用基本無機(jī)非緩沖的堿性含鹽洗脫液通過至少一個(gè)色譜步驟進(jìn)行純化，和(iii)將得自最終純化步驟的含有不溶的，復(fù)性的且有生物活性的蛋白質(zhì)的堿性溶液中和。
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摘要
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本發(fā)明涉及表達(dá)于細(xì)菌宿主細(xì)胞中且以不溶性聚集體形式沉淀(包埋體)的重組蛋白質(zhì)的溶解與純化方法。純化基于將所述包埋體用有機(jī)變性試劑并使用色譜法轉(zhuǎn)化為可溶形式。此處選用無機(jī)的，堿性的，含鹽的洗脫劑，其在純化完成后使重組蛋白質(zhì)在中和后可以成為能夠直接用于醫(yī)藥用途且為生理學(xué)可接受的形式。該方法特別適用于純化過敏原和過敏原片斷。
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國(guó)際公布
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WO02/20559 德 2002.3.14
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