一種線粒體脫氫酶法檢測重組人肝細(xì)胞生長素生物活性的方法
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公開(公告)號
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CN1472335A
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公開(公告)日
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2004.02.04
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申請(專利)號
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CN02134673.9
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申請日期
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2002.09.06
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專利名稱
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一種線粒體脫氫酶法檢測重組人肝細(xì)胞生長素生物活性的方法
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主分類號
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C12Q1/32
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分類號
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C12Q1/32
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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深圳市海王英特龍生物技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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萬華印;李茹冰;易學(xué)瑞;鄒清雁;佟明華
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地址
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518054廣東省深圳市南山區(qū)南油大道海王大廈24層
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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廣州市拓元專利事務(wù)所
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代理人
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張少君
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種線粒體脫氫酶法檢測重組人肝細(xì)胞生長素生物活性的方法，其特征在于步驟為：a：復(fù)蘇凍存HTC細(xì)胞株，接種于培養(yǎng)瓶培養(yǎng)增殖；b：培養(yǎng)增殖后HTC細(xì)胞，以培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，如細(xì)胞生長狀態(tài)良好，棄培養(yǎng)液，按如下分組加入供試品：(1)HTC細(xì)胞對照組(C組)：每孔加無血清的培養(yǎng)液；(2)陰性對照組(P組)：加無血清的培養(yǎng)液，及rhHSS溶劑或等劑量凍干保護(hù)劑；(3)rhHSS組：以培養(yǎng)液配置系列濃度；置培養(yǎng)箱培養(yǎng)一定時間后，棄上清液，洗滌，加MTT培養(yǎng)充分后吸盡培養(yǎng)液，加有機(jī)溶劑，振蕩至溶解，用酶標(biāo)儀測定各孔A值；檢測波長570nm，參考波長630nm；對數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以t檢驗(yàn)比較差別的顯著性；當(dāng)n＝8，t＞2.2時有活性。
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摘要
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一種線粒體脫氫酶法檢測重組人肝細(xì)胞生長素生物活性的方法，采所用的技術(shù)方案是以線粒體脫氫酶活性方法檢測rhHSS產(chǎn)品的生物學(xué)活性，提供了一種簡便易行、特異敏感的rhHSS活性檢測方法。
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國際公布
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