一種快速高效分離和純化重組腺病毒相關(guān)病毒的方法和用途
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公開(公告)號(hào)
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CN1139656C
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公開(公告)日
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2004.02.25
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN99123723.4
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申請(qǐng)日期
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1999.11.17
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專利名稱
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一種快速高效分離和純化重組腺病毒相關(guān)病毒的方法和用途
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主分類號(hào)
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C12N7/02
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分類號(hào)
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C12N7/02;C12N15/861;A61K48/00;A61P43/00
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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本元正陽基因技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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吳小兵;董小巖;侯云德
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地址
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100176 北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路6號(hào)
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頒證日
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2004.02.25
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種rAAV病毒分離、純化的方法，其特征是，以含有rAAV病毒的細(xì)胞及培養(yǎng)液作為粗制裂解液，經(jīng)過以下步驟進(jìn)行分離、純化：1)在粗制裂解液中加入氯仿，滅活HSV輔助病毒、裂解細(xì)胞、使大量細(xì)胞蛋白變性沉淀，得到細(xì)胞裂解液；
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摘要
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本發(fā)明利用AAV病毒顆粒具有抗氯仿處理的特點(diǎn)，提出了一種用PEG/NaCl系統(tǒng)和氯仿快速而高效分離和純化rAAV病毒的方法。該方法適合于大規(guī)模分離和純化rAAV病毒和生產(chǎn)工藝化。尤其適用于以HSV病毒為輔助病毒產(chǎn)生的rAAV的純化，也可用于無輔助病毒包裝系統(tǒng)或無細(xì)胞體外包裝系統(tǒng)生產(chǎn)的rAAV的純化。經(jīng)本發(fā)明純化的rAAV病毒可用于基因轉(zhuǎn)移和基因治療。
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國際公布
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