公開(公告)號 | CN1528894A |
公開(公告)日 | 2004.09.15 |
申請(專利)號 | CN03151203.8 |
申請日期 | 2003.09.25 |
專利名稱 | 長效重組組織因子途徑抑制物及其制備方法 |
主分類號 | C12N15/12 |
分類號 | C12N15/12;C12N15/63 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 復旦大學 |
發(fā)明(設計)人 | 馬端;宋后燕;白浩;張農(nóng) |
地址 | 200433上海市邯鄲路220號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海正旦專利代理有限公司 |
代理人 | 包兆宜 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一類重組組織因子途徑抑制物(TFPI)長效突變體,命名為長效組織因子途徑抑制物(LTFPI),其特征在于TFPI羧基末端267-304區(qū)域內(nèi)的某些氨基酸突變后具有序列1的氨基酸序列,所述LTFPI的半衰期較TFPI延長10倍以上,具有抗組織因子、凝血因子VII/VIIa和凝血因子X/Xa功能。 |
摘要 | 本發(fā)明屬生物技術領域,具體涉及長效組織因子途徑抑制物(LTFPI)及其制備方法和應用。本發(fā)明對組織因子途徑抑制物(TFPI)及其受體低密度脂蛋白受體相關蛋白(LRP)的生物信息學和結構分子生物學分析和實驗,確定了TFPI羧基末端與LRP結合并被清除的部位。設計了TFPI羧基末端突變體,通過PCR定點突變構建LTFPI基因后,與原核或真核表達載體重組,轉化大腸桿菌或畢赤酵母,篩選高表達工程菌。原核工程菌經(jīng)發(fā)酵擴增,破碎細菌,離心收集包涵體,復性后經(jīng)分子篩和離子交換二步法純化LTFPI;真核工程菌直接將上清進行二步純化。獲得的LTFPI半衰期明顯延長,具有良好的抗凝功能。 |
國際公布 |