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制備強熒光藻藍蛋白的方法

公開(公告)號 CN1166684C  
公開(公告)日 2004.09.15  
申請(專利)號 CN02150919.0  
申請日期 2002.11.28  
專利名稱 制備強熒光藻藍蛋白的方法  
主分類號 C07K14/405  
分類號 C07K14/405;C07K1/14  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 浙江大學  
發(fā)明(設計)人 龔興國;曾冬云;徐飛虎;周遠  
地址 310027 浙江省杭州市西湖區(qū)玉古路20號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 杭州求是專利事務所有限公司  
代理人 韓介梅  
國省代碼 浙江;33  
主權項 制備強熒光藻藍蛋白的方法,其特征是控制溫度在0~4℃下,包括以下步驟:1)新鮮藻泥加入pH值7.0-7.6、濃度50mmol/L、含0.1~0.5mmol/LEDTA的磷酸緩沖液,冰浴超聲波破,將破碎液離心后去沉淀,收集上清液;  
摘要 本發(fā)明制備強熒光藻藍蛋白的方法是以新鮮藻泥為原料,用含EDTA的磷酸緩沖液洗滌,經(jīng)超聲波破碎細胞,釋放出色素蛋白,通過離心分離,去除不溶性細胞膜及細胞器。收集上清液,經(jīng)分級鹽析,收集藻藍蛋白沉淀。沉淀溶于含EDTA的磷酸緩沖液中,通過Sephadex G-25脫鹽,上DEAE-Sepharose FF柱,去掉堿性雜質(zhì)蛋白,然后上羥基磷灰石柱,獲得藻藍蛋白洗脫液。接著上CM-Sepharose FF柱,去掉酸性雜質(zhì)蛋白。最后再上第二次羥基磷灰石,獲得高純度強熒光的藻藍蛋白。本發(fā)明既省力又省時,適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。  
國際公布  
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