魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑
公開(公告)號
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CN1173741C
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公開(公告)日
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2004.11.03
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申請(專利)號
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CN00113924.X
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申請日期
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2000.09.20
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專利名稱
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魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑
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主分類號
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A61K39/395
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分類號
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A61K39/395;A61P43/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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黃威權(quán);夏永娟;李元;李別虎
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地址
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710032 陜西省西安市長樂西路17號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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陜西電子工業(yè)專利事務(wù)所
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代理人
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程曉霞
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國省代碼
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陜西;61
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主權(quán)項(xiàng)
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魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑,其特征是按照如下方法制備:將鰻弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛德華菌進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),再將培養(yǎng)后的菌液腹腔注射免疫小鼠Balb/c,取免疫后小鼠脾細(xì)胞和SP2/0骨髓細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,將細(xì)胞融合的細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng),用酶聯(lián)免疫反應(yīng)法檢測陽性克隆,將確定為陽性的孔以有限稀釋法,進(jìn)行克隆化,再將陽性克隆的雜交瘤細(xì)胞株擴(kuò)增培養(yǎng),腹腔注射接種到Balb/c小鼠制備出腹水型單抗;將以上腹水型單抗以酶聯(lián)免疫反應(yīng)法進(jìn)行效價,亞類及交叉試驗(yàn),挑選效價為10-5~1×10-7的單克隆抗體,以每只小鼠10~100μg的量,腹腔注射免疫小鼠;然后進(jìn)行細(xì)胞融合,篩選出能穩(wěn)定分泌抗獨(dú)特型單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,將細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),調(diào)整為1×106個/ml,以每只小鼠0.5ml的量,腹腔注射接種到Balb/c小鼠,制備腹水型單克隆抗體;用以上鰻弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛德華菌的抗獨(dú)特型單抗以1∶
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摘要
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魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑,涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將鰻弧菌、創(chuàng)傷弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛德華菌免疫小鼠,進(jìn)行細(xì)胞融合,再克隆化,制備出特異性很強(qiáng),且效價較高的單抗,進(jìn)行純化,再免疫小鼠,制備抗獨(dú)特型單抗,挑選出保護(hù)率較高的抗獨(dú)特型單抗以一定比例配制成魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單抗疫苗制劑。對養(yǎng)殖魚起很好的免疫保護(hù)作用,不污染環(huán)境,不會通過食物鏈對人類造成損害。
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國際公布
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