一種快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用
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公開(公告)號
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CN1164767C
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公開(公告)日
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2004.09.01
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申請(專利)號
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CN02139253.6
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申請日期
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2002.11.08
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專利名稱
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一種快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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武漢大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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張楚瑜;潘茲書;陳玉棟
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地址
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430072 湖北省武漢市武昌珞珈山
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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武漢科宏專利事務(wù)所
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代理人
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王敏鋒
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國省代碼
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湖北;42
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主權(quán)項(xiàng)
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一種快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒，該試劑盒包括a)RNA裂解液，b)逆轉(zhuǎn)錄酶，c)RNA酶抑制劑，d)Taq DNA聚合酶，e)標(biāo)準(zhǔn)陽性模板，f)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液和g)熒光定量反應(yīng)液，其特征是：逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液含有反向引物，其序列為5′-ATCAGGTCGTACTCCCATCAC-3′，熒光定量反應(yīng)液含有引物和熒光探針，引物為正向引物和反向引物，其序列分別為5′-TAGCCATGCCCATAGTAGG-3′和5′-ATCAGGTCGTACTCCCATCAC-3′，熒光探針序列為5′-TACAGGACAGTCGTCAGTAGTTCGACGTGA-3′，熒光探針5′端標(biāo)記的熒光報(bào)告基團(tuán)是FAM，3′端標(biāo)記的熒光受體基團(tuán)為ROX，標(biāo)準(zhǔn)陽性模板pGS是含有豬瘟兔化弱毒株5′端400個(gè)核苷酸片段插入pGEM-T載體構(gòu)成的，且該載體可在大腸桿菌DH5α中增殖。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的熒光定量PCR試劑盒，利用該試劑盒快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗的方法以及該試劑盒在快速定量檢測豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗中的應(yīng)用。該試劑盒及方法克服了傳統(tǒng)和現(xiàn)代方法中存在的不足，可有效方便地對豬瘟病毒和豬瘟兔化弱毒疫苗進(jìn)行定量檢測以及對豬瘟兔化弱毒疫苗生產(chǎn)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。
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國際公布
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