公開(公告)號 | CN1184314C |
公開(公告)日 | 2005.01.12 |
申請(專利)號 | CN00115408.7 |
申請日期 | 2000.04.18 |
專利名稱 | 中國人共刺激信號抑制因子的基因工程制備方法 |
主分類號 | C12N15/09 |
分類號 | C12N15/09;C12N15/12;C12N15/79;C12N15/81;C12N15/70;A61P37/02;A61P37/06;C12Q1/68 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué) |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 朱乃碩 |
地址 | 200433 上海市邯鄲路220號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
代理人 | 姚靜芳 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種中國人共刺激信號抑制因子的基因工程制備方法,通過基因分離、克隆、表達(dá)過程,其特征是該方法包括如下步驟:(1)在酵母中克隆基因,并根據(jù)圖4第三行序列所示的中國人共刺激信號抑制因子基因序列,利用宿主優(yōu)勢密碼子設(shè)計(jì)克隆引物進(jìn)行核苷酸序列改造:序列第9位G改為T,第12位C改為T,第15位G改為A,第18位T改為A;克隆出改造后的中國人共刺激信號抑制因子活性蛋白編碼序列;(2)由(1)克隆出的序列構(gòu)建酵母轉(zhuǎn)化質(zhì)粒pPICLA;(3)轉(zhuǎn)化宿主菌:以pPICLA轉(zhuǎn)化酵母宿主菌;(4)培養(yǎng)(3)中轉(zhuǎn)化的宿主菌,表達(dá)并獲得中國人共刺激信號抑制因子活性多肽。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種中國人共刺激信號抑制因子的基因工程制備方法。目前有關(guān)細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(共刺激信號負(fù)調(diào)控分子)的生物學(xué)研究及基因工程蛋白更適合外國人。本發(fā)明對中國人細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4基因DNA密碼子進(jìn)行改造,采用宿主優(yōu)勢密碼子,構(gòu)建表達(dá)載體系列,適合在真核生物和原核生物中表達(dá)。經(jīng)鑒定,獲得了具有表達(dá)中國人共刺激信號抑制因子的蛋白分子。該基因工程蛋白分子更適合于中國人,而且能大量生產(chǎn),是一種前景廣闊的生物工程免疫耐受誘導(dǎo)劑。 |
國際公布 |