公開(公告)號(hào)
|
CN1243827C
|
公開(公告)日
|
2006.03.01
|
申請(專利)號(hào)
|
CN97198703.3
|
申請日期
|
1997.08.25
|
專利名稱
|
選定生物體的人工啟動(dòng)子文庫和得自這種文庫的啟動(dòng)子
|
主分類號(hào)
|
C12N15/11(2006.01)I
|
分類號(hào)
|
C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)N
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
1996.8.23 DK 0886/96
|
申請(專利權(quán))人
|
彼得·魯戴爾·簡森
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
彼得·魯戴爾·簡森;卡林·哈默
|
地址
|
丹麥根措夫特
|
頒證日
|
|
國際申請
|
1997-08-25 PCT/DK1997/000342
|
進(jìn)入國家日期
|
1999.04.09
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
|
代理人
|
黃革生
|
國省代碼
|
丹麥;DK
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種啟動(dòng)子文庫,所述文庫包含一套各自不同的啟動(dòng)子序列,對待表達(dá)基因的啟動(dòng)子強(qiáng)度而言,該文庫覆蓋一個(gè)啟動(dòng)子活性范圍;該套各自不同的啟動(dòng)子序列包含雙鏈DNA序列,其有義鏈含有在所述生物體中鑒定出來的啟動(dòng)子序列的至少兩個(gè)共有序列,在文庫內(nèi)的所有啟動(dòng)子序列中所述共有序列各自至少一半保持不變,并且,相對于所述已鑒定出的啟動(dòng)子的相應(yīng)間隔區(qū)序列,在所述共有序列之間或至少一個(gè)所述共有序列側(cè)翼的核苷酸間隔區(qū)序列的至少一部分已有所改變而包含隨機(jī)選自核苷堿基A、T、C和G的核苷酸;在所述基因的啟動(dòng)子活性方面,該啟動(dòng)子文庫以小步幅方式跨越了一個(gè)有用范圍,每一步改變活性25-400%。
|
摘要
|
選定生物體或生物體組的人工啟動(dòng)子文庫被構(gòu)建為雙鏈DNA片段的混合物,所述雙鏈DNA片段的有義鏈含有得自所述生物體或生物體組之有效啟動(dòng)子的至少兩個(gè)共有序列或它們的包含各自至少一半的部分,以及長度可變的周圍或中間核苷酸序列(間隔區(qū)),所述間隔區(qū)序列中至少7個(gè)核苷酸隨機(jī)選自核苷堿基A,T,C和G。雙鏈DNA片段的有義鏈也包含將特定的調(diào)節(jié)特征,如由生長條件的變化引起的激活作用,賦予文庫內(nèi)啟動(dòng)子的調(diào)節(jié)DNA序列。另外,它們還可能具有添加于其一端或兩端的包含一個(gè)或多個(gè)限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別位點(diǎn)的序列。選定生物體或生物體組可選自原核生物和真核生物;在原核生物中,保留的共有序列最經(jīng)常地含有-35信號(hào)(-35至-30):TTGACA和-10信號(hào)(-12至-7):TATAAT,或者它們的包含各自至少3個(gè)保守核苷酸的部分,而在真核生物中,所述共有序列應(yīng)含有TATA盒和至少一個(gè)上游激活序列(UAS)。這種人工啟動(dòng)子文庫可用于例如在多種選定生物體中使特定基因的表達(dá)最優(yōu)化。
|
國際公布
|
1998-02-26 WO1998/007846 英
|