公開(公告)號
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CN1266282C
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公開(公告)日
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2006.07.26
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申請(專利)號
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CN02813571.7
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申請日期
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2002.06.14
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專利名稱
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包含基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列及檢測和應(yīng)用這些DNA序列的方法
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主分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2001.7.4 EP 01202581.3;2001.7.5 US 60/303,199
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申請(專利權(quán))人
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科羅邁吉尼科斯公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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阿里·彼得·奧特;阿圖爾·萊奧·克魯克貝格
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地址
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荷蘭阿姆斯特丹
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頒證日
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國際申請
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2002-06-14 PCT/NL2002/000390
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進(jìn)入國家日期
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2004.01.05
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專利代理機(jī)構(gòu)
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永新專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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林曉紅
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國省代碼
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荷蘭;NL
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主權(quán)項
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一種具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的分離的和/或重組的DNA序列,其中所述序列由選自以下一組的一種序列組成:(a)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列;(b)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列的功能性片段,衍生物或同源物,所述序列具有通過包括以下步驟的一種方法確定的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性:細(xì)胞在存在250g/ml的zeocin和0.1ng/ml的強(qiáng)力霉素下生長5周;挑選5周后還在生長的菌落;在從所述菌落中分離的質(zhì)粒中檢驗具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列的存在;其中所述細(xì)胞是U-2OS人骨肉瘤細(xì)胞系,其表達(dá)在Tet-Off轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng)控制下的含有LexADNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和HP1或HPC2的編碼區(qū)的LexA-阻抑物融合蛋白,和其中所述細(xì)胞包含一個質(zhì)粒,其包含克隆到所述質(zhì)粒中的多接頭序列中的具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述多接頭序列位于4個LexA操縱子位點和控制zeocin抗性基因的SV40啟動子之間,且其中如果不是存在所述具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述zeocin抗性基因?qū)驗長exA-阻抑物融合蛋白的表達(dá)而被抑制。
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摘要
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本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)序列的系統(tǒng)說明及鑒別。本發(fā)明提供了可以鑒別調(diào)節(jié)序列的篩選和檢測方法。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)序列及其在各種領(lǐng)域中的應(yīng)用,例如但不限于蛋白質(zhì)生產(chǎn)、診斷、轉(zhuǎn)基因植物及動物,及治療領(lǐng)域。
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國際公布
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2003-01-16 WO2003/004704 英
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