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包含基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列及檢測和應(yīng)用這些DNA序列的方法

公開(公告)號 CN1266282C  
公開(公告)日 2006.07.26  
申請(專利)號 CN02813571.7  
申請日期 2002.06.14  
專利名稱 包含基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列及檢測和應(yīng)用這些DNA序列的方法  
主分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.7.4 EP 01202581.3;2001.7.5 US 60/303,199  
申請(專利權(quán))人 科羅邁吉尼科斯公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 阿里·彼得·奧特;阿圖爾·萊奧·克魯克貝格  
地址 荷蘭阿姆斯特丹  
頒證日  
國際申請 2002-06-14 PCT/NL2002/000390  
進(jìn)入國家日期 2004.01.05  
專利代理機(jī)構(gòu) 永新專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 林曉紅  
國省代碼 荷蘭;NL  
主權(quán)項 一種具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的分離的和/或重組的DNA序列,其中所述序列由選自以下一組的一種序列組成:(a)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列;(b)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列的功能性片段,衍生物或同源物,所述序列具有通過包括以下步驟的一種方法確定的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性:細(xì)胞在存在250g/ml的zeocin和0.1ng/ml的強(qiáng)力霉素下生長5周;挑選5周后還在生長的菌落;在從所述菌落中分離的質(zhì)粒中檢驗具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列的存在;其中所述細(xì)胞是U-2OS人骨肉瘤細(xì)胞系,其表達(dá)在Tet-Off轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng)控制下的含有LexADNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和HP1或HPC2的編碼區(qū)的LexA-阻抑物融合蛋白,和其中所述細(xì)胞包含一個質(zhì)粒,其包含克隆到所述質(zhì)粒中的多接頭序列中的具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述多接頭序列位于4個LexA操縱子位點和控制zeocin抗性基因的SV40啟動子之間,且其中如果不是存在所述具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述zeocin抗性基因?qū)驗長exA-阻抑物融合蛋白的表達(dá)而被抑制。  
摘要 本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)序列的系統(tǒng)說明及鑒別。本發(fā)明提供了可以鑒別調(diào)節(jié)序列的篩選和檢測方法。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)序列及其在各種領(lǐng)域中的應(yīng)用,例如但不限于蛋白質(zhì)生產(chǎn)、診斷、轉(zhuǎn)基因植物及動物,及治療領(lǐng)域。  
國際公布 2003-01-16 WO2003/004704 英  
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