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改造植物細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)的方法

公開(公告)號 CN1237176C  
公開(公告)日 2006.01.18  
申請(專利)號 CN01807501.0  
申請日期 2001.02.12  
專利名稱 改造植物細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)的方法  
主分類號 C12N15/82(2006.01)I  
分類號 C12N15/82(2006.01)I;A61L27/20(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.2.10 EP 00610020.0;2000.4.7 US 09/544,988  
申請(專利權(quán))人 波利斯有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 P·尤爾弗斯科夫;H·舒爾斯;R·維瑟;B·伯克哈特;S·O·瑟蘭森;R·歐曼;J-P·溫肯;M·斯克約特;C·D·沃拉跟;G·貝爾德曼  
地址 丹麥腓特列斯貝  
頒證日  
國際申請 2001-02-12 PCT/DK2001/000093  
進(jìn)入國家日期 2002.09.29  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 劉曉東  
國省代碼 丹麥;DK  
主權(quán)項(xiàng) 提供轉(zhuǎn)基因植物材料的方法,相對于野生型狀態(tài),該轉(zhuǎn)基因植物材料的復(fù)合細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)被修飾,該修飾是總體糖苷鍵形式和單糖分布中的至少一種,該方法包括:(i)提供核酸構(gòu)建體,其含有細(xì)胞壁多糖修飾酶的編碼核苷酸序列或調(diào)節(jié)內(nèi)源細(xì)胞壁多糖修飾酶的編碼核苷酸序列表達(dá)的核苷酸序列,所述的編碼序列可操作地連接到用于其在植物中表達(dá)的5′和3′調(diào)控序列,該構(gòu)建體導(dǎo)入到植物細(xì)胞導(dǎo)致至少一種靶細(xì)胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變,(ii)用該核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞,和(iii)取得轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的植物細(xì)胞培養(yǎng)物、植物組織或轉(zhuǎn)基因植物,其中至少一種細(xì)胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變,以獲得轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、植物組織或植株,其中因?yàn)樗龌驑?gòu)建體的引入,與野生型的植株相比所述的靶底物細(xì)胞壁多糖被修飾成具有其中至少有一種單糖的比例被改變不小于10%或至少一種糖苷鍵的比例被改變不小于10%的單糖分布。  
摘要 本發(fā)明提供了制備轉(zhuǎn)基因植物及其部分的方法,相對于野生型狀態(tài)來說,該轉(zhuǎn)基因植物及其部分中的復(fù)合細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)被修飾,其中的修飾至少包括整個糖苷鍵的連接方式和單糖分布中的一種,該方法包括用能使復(fù)合細(xì)胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變的核酸序列來轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞,所述的修飾酶包括:內(nèi)源性李糖聚半乳糖醛酸水解酶、內(nèi)源性鼠李糖聚半乳糖醛酸裂解酶、內(nèi)源性半乳聚糖酶(endo-galactanases)、內(nèi)源性阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、半乳糖苷酶,如β-半乳糖苷酶、木糖苷酶和外源性半乳糖醛酸酶。修飾可以在體內(nèi)發(fā)生,也可以在采集后發(fā)生。在后一種情況下,生長的植物中的修飾酶與其底物分開,例如將酶定位到高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、液泡或以失活的形式存在于植物中。采集后,將酶與其底物接觸,或者將其激活,從而對細(xì)胞壁多糖的進(jìn)行所需的采后處理。轉(zhuǎn)基因植物材料的功能也得到了提高,并將其用于食品和飼料制造,以及作為藥學(xué)或醫(yī)學(xué)活性物質(zhì)。  
國際公布 2001-08-16 WO2001/059137 英  
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