公開(公告)號
|
CN1286980C
|
公開(公告)日
|
2006.11.29
|
申請(專利)號
|
CN200410061236.2
|
申請日期
|
2004.11.30
|
專利名稱
|
表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒及其制備方法
|
主分類號
|
C12N15/861(2006.01)I
|
分類號
|
C12N15/861(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61P9/04(2006.01)I
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(專利權(quán))人
|
華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
汪道文;肖 嘯;趙春霞;汪培華
|
地址
|
430030湖北省武漢市解放大道1095號轉(zhuǎn)同濟醫(yī)院內(nèi)科汪道文
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進入國家日期
|
|
專利代理機構(gòu)
|
武漢開元專利代理有限責(zé)任公司
|
代理人
|
王和平
|
國省代碼
|
湖北;42
|
主權(quán)項
|
一種表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒,該重組腺相關(guān)病毒由天然狀態(tài)的腺相關(guān)病毒和腺病毒經(jīng)分子生物學(xué)方法人工剪切、修飾和加工而成,該載體系統(tǒng)包括包裝質(zhì)粒pXX2,輔助質(zhì)粒pXX6,真核表達(dá)載體pXXUF1,并在真核表達(dá)載體pXXUF1內(nèi)反向插入了人類受磷蛋白基因編碼序列,其步驟:1)包裝質(zhì)粒pXX2:它含有編碼腺相關(guān)病毒Rep蛋白和Cap蛋白的編碼序列,并在上游和下游各插入一個p5啟動子;2)輔助質(zhì)粒pXX6:其刪除了腺病毒的致病基因序列,保留了腺病毒E1A、E2A和VA1RNA基因;3)真核表達(dá)載體pXXUF1:所用的是CMV啟動子,其含有Not 1多克隆位點,可以連接不同的目的基因,pXXUF1反向連接人受磷蛋白基因,該載體含有rAAV轉(zhuǎn)基因表達(dá)所必須的末端ITRs重復(fù)序列。
|
摘要
|
本發(fā)明涉及一種表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒及其制備方法,屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,用于心力衰竭及其他相關(guān)疾病的基因治療。該重組腺相關(guān)病毒由天然狀態(tài)的腺相關(guān)病毒和腺病毒經(jīng)分子生物學(xué)方法人工剪切、修飾和加工而成,該載體系統(tǒng)包括包裝質(zhì)粒pXX2,輔助質(zhì)粒pXX6,真核表達(dá)載體pXXUF1和pXXUF3,并在真核表達(dá)載體pXXUF1內(nèi)反向插入了人類受磷蛋白基因編碼序列。本發(fā)明的表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒制備方法成功,所制備的重組腺相關(guān)病毒滴度高,能驅(qū)動目的基因長期有效的表達(dá),可以用于心梗及其他相關(guān)性疾病所致心力衰竭的治療。
|
國際公布
|
|