| 公開(公告)號 | CN1320118C |
| 公開(公告)日 | 2007.06.06 |
| 申請(專利)號 | CN200410073165.8 |
| 申請日期 | 2004.10.11 |
| 專利名稱 | 人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌高表達(dá)載體和制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/70(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;A61P19/00(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 陳蘇民;秦 云;陳南春 |
| 地址 | 710049陜西省西安市長樂西路15號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 孫 楓 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權(quán)項 | 一種人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達(dá)載體，其特征在于：所述的人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達(dá)載體是指用分子克隆技術(shù)將從人體組織cDNA文庫中擴(kuò)增得到人骨形成蛋白-4成熟肽的cDNA序列，再克隆重組獲得的大腸桿菌表達(dá)載體pDH2-hB4m，該載體能夠在大腸桿菌中高水平表達(dá)出人骨形成蛋白-4成熟肽，載體DNA全長4，014個核苷酸對，全部核苷酸序列如下：1 AGATCTCTCT CACCTACCAA ACAATGCCCC CCTGCAAAAA ATAAATTCAT ATAAAAAACATCTAGAGAGA GTGGATGGTT TGTTACGGGG GGACGTTTTT TATTTAAGTA TATTTTTTGT61 TACAGATAAC CATCTGCGGT GATAAATTAT CTCTGGCGGT GTTGACATAA ATACCACTGGATGTCTATTG GTAGACGCCA CTATTTAATA GAGACCGCCA CAACTGTATT TATGGTGACC121 CGGTGATACT GAGCACATCA GCAGGACGCA CTGACCACCA TGAAGGTGAC GCTCTTAAAAGCCACTATGA CTCGTGTAGT CGTCCTGCGT GACTGGTGGT ACTTCCACTG CGAGAATTTT181 ATTAAGCCCT GAAGAAGGGC AGCATTCAAA GCAGAAGGCT TTGGGGTGTG TGATACGAAATAATTCGGGA CTTCTTCCCG TCGTAAGTTT CGTCTTCCGA AACCCCACAC ACTATGCTTT241 CGAAGCATTG GTTAAAAATT AAGGAGAATT CATGAAGCAT CACTCACAGC GGGCCAGGAAGCTTCGTAAC CAATTTTTAA TTCCTCTTAA GTACTTCGTA GTGAGTGTCG CCCGGTCCTT301 GAAGAATAAG AACTGCCGGC GCCACTCGCT CTATGTGGAC TTCAGCGATG TGGGCTGGAACTTCTTATTC TTGACGGCCG CGGTGAGCGA GATACACCTG AAGTCGCTAC ACCCGACCTT361 TGACTGGATT GTGGCCCCAC CAGGCTACCA GGCCTTCTAC TGCCATGGGG ACTGCCCCTTACTGACCTAA CACCGGGGTG GTCCGATGGT CCGGAAGATG ACGGTACCCC TGACGGGGAA421 TCCACTGGCT GACCACCTCA ACTCAACCAA CCATGCCATT GTGCAGACCC TGGTCAATTCAGGTGACCGA CTGGTGGAGT TGAGTTGGTT GGTACGGTAA CACGTCTGGG ACCAGTTAAG481 TGTCAATTCC AGTATCCCCA AAGCCTGTTG TGTGCCCACT GAACTGAGTG CCATCTCCATACAGTTAAGG TCATAGGGGT TTCGGACAAC ACACGGGTGA CTTGACTCAC GGTAGAGGTA541 GCTGTACCTG GATGAGTATG ATAAGGTGGT ACTGAAAAAT TATCAGGAGA TGGTAGTAGACGACATGGAC CTACTCATAC TATTCCACCA TGACTTTTTA ATAGTCCTCT ACCATCATCT601 GGGATGTGGG TGCCGCTGAT AATCTAGAGT CGACCTGCAG GCATGCAAGC TTCTGTTTTGCCCTACACCC ACGGCGACTA TTAGATCTCA GCTGGACGTC CGTACGTTCG AAGACAAAAC661 GCGGATGAGA GAAGATTTTC AGCCTGATAC AGCTTAAATC AGAACGCAGA AGCGGTCTGACGCCTACTCT CTTCTAAAAG TCGGACTATG TCGAATTTAG TCTTGCGTCT TCGCCAGACT721 TAAAACAGAA TTTGCCTCCC GGCAGTAGCG CGGTGGTCCC ACCTGACCCC ATGCCGAACTATTTTGTCTT AAACGGAGGG CCGTCATCGC GCCACCAGGG TGGACTGGGG TACGGCTTGA781 CAGAAGTGAA ACGCCGTAGC GCCGATGGTA GTGTGGGGTC TCCCCATGCG AGAGTAGCCAGTCTTCACTT TGCGGCATCG CGGCTACCAT CACACCCCAG AGGGGTACGC TCTCATCGGT841 ACTGCCAGGC ATCAAATAAA ACGAAAGGCT CAGTCGAAAG ACTGGGCCTT TCGTTTTATCTGACGGTCCG TAGTTTATTT TGCTTTCCGA GTCAGCTTTC TGACCCGGAA AGCAAAATAG901 TGTTGTTTGT CGGTGAACGC TCTCCTGAGT AGGACAAATC CGCCGGGAGC GGATTTGAACACAACAAACA GCCACTTGCG AGAGGACTCA TCCTGTTTAG GCGGCCCTCG CCTAAACTTG961 GTTGCGAAGC AACGGCCCGG AGGGTGGCGG GCAGGACGCC CGCCATAAAC TGCCAGGCATCAACGCTTCG TTGCCGGGCC TCCCACCGCC CGTCCTGCGG GCGGTATTTG ACGGTCCGTA1021 CAAATTAAGC AGAAGGCCAT CCTGACGGAT GGCCTTTTTG CGTTTCTACA AACTCTTTGTGTTTAATTCG TCTTCCGGTA GGACTGCCTA CCGGAAAAAC GCAAAGATGT TTGAGAAACA1081 TTATTTTTCT AAATACATTC AAATATGTAT CCGCTCATGA GACAATAACC CTGATAAATGAATAAAAAGA TTTATGTAAG TTTATACATA GGCGAGTACT CTGTTATTGG GACTATTTAC1141 CTTCAATAAT ATTGAAAAAG GAAGAGTATG AGTATTCAAC ATTTCCGTGT CGCCCTTATTGAAGTTATTA TAACTTTTTC CTTCTCATAC TCATAAGTTG TAAAGGCACA GCGGGAATAA1201 CCCTTTTTTG CGGCATTTTG CCTTCCTGTT TTTGCTCACC CAGAAACGCT GGTGAAAGTAGGGAAAAAAC GCCGTAAAAC GGAAGGACAA AAACGAGTGG GTCTTTGCGA CCACTTTCAT1261 AAAGATGCTG AAGATCAGTT GGGTGCACGA GTGGGTTACA TCGAACTGGA TCTCAACAGCTTTCTACGAC TTCTAGTCAA CCCACGTGCT CACCCAATGT AGCTTGACCT AGAGTTGTCG1321 GGTAAGATCC TTGAGAGTTT TCGCCCCGAA GAACGTTTTC CAATGATGAG CACTTTTAAACCATTCTAGG AACTCTCAAA AGCGGGGCTT CTTGCAAAAG GTTACTACTC GTGAAAATTT1381 GTTCTGCTAT GTGGCGCGGT ATTATCCCGT ATTGACGCCG GGCAAGAGCA ACTCGGTCGCCAAGACGATA CACCGCGCCA TAATAGGGCA TAACTGCGGC CCGTTCTCGT TGAGCCAGCG1441 CGCATACACT ATTCTCAGAA TGACTTGGTT GAGTACTCAC CAGTCACAGA AAAGCATCTTGCGTATGTGA TAAGAGTCTT ACTGAACCAA CTCATGAGTG GTCAGTGTCT TTTCGTAGAA1501 ACGGATGGCA TGACAGTAAG AGAATTATGC AGTGCTGCCA TAACCATGAG TGATAACACTTGCCTACCGT ACTGTCATTC TCTTAATACG TCACGACGGT ATTGGTACTC ACTATTGTGA1561 GCGGCCAACT TACTTCTGAC AACGATCGGA GGACCGAAGG AGCTAACCGC TTTTTTGCACCGCCGGTTGA ATGAAGACTG TTGCTAGCCT CCTGGCTTCC TCGATTGGCG AAAAAACGTG1621 AACATGGGGG ATCATGTAAC TCGCCTTGAT CGTTGGGA |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達(dá)載體及其所表達(dá)的人骨形成蛋白-4成熟肽的制備方法。所述的載體是指用分子克隆技術(shù)重組獲得的大腸桿菌表達(dá)載體pDH2-hB4m，載體全長4,014個核苷酸對；所述利用表達(dá)載體pDH2-hB4m制備具有生物學(xué)活性人骨形成蛋白-4成熟肽的方法，包括宿主菌轉(zhuǎn)化表達(dá)、培養(yǎng)、純化、復(fù)性、活性鑒定步驟。本發(fā)明所提供的大腸桿菌高表達(dá)載體和用該載體轉(zhuǎn)化宿主菌表達(dá)人骨形成蛋白-4成熟肽的制備方法，可以作為新的基因工程產(chǎn)品及其方法推向臨床治療、診斷和科學(xué)研究應(yīng)用，并推向市場。 |
| 國際公布 |
