公開(公告)號 | CN1322139C |
公開(公告)日 | 2007.06.20 |
申請(專利)號 | CN200410066046.X |
申請日期 | 2004.12.15 |
專利名稱 | 固定化細(xì)胞酶法制備L-鳥氨酸的方法 |
主分類號 | C12P13/10(2006.01)I |
分類號 | C12P13/10(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 南京大學(xué) |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 焦慶才;李加友;曹 瑜;劉 毅;錢紹松;陳 群 |
地址 | 210093江蘇省南京市漢口路22號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 南京蘇高專利事務(wù)所 |
代理人 | 闕如生 |
國省代碼 | 江蘇;32 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種用固定化細(xì)胞酶法制備L-鳥氨酸的方法,其制備步驟如下:①菌種活化;取經(jīng)冷凍干燥保藏的菌種包括糞腸球菌、解蛋白弧菌、中間氣單胞菌、棲息微球菌、格氏沙雷氏菌和阪崎腸桿菌,用無菌液體種子培養(yǎng)基溶解,該種子培養(yǎng)基由葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、西紅柿汁組成,然后接入液體種子培養(yǎng)基中,恒溫培養(yǎng),然后取上述種子接入新鮮的種子培養(yǎng)基繼續(xù)活化;②菌種發(fā)酵和菌體細(xì)胞收集;將上述菌種接到發(fā)酵培養(yǎng)基中,該發(fā)酵培養(yǎng)基由酵母膏、葡萄糖、蛋白胨、玉米漿、磷酸二氫鉀、硫酸鎂組成,在通氣條件下培養(yǎng),然后將適齡的發(fā)酵液離心收集菌體;③細(xì)胞固定化;將所收集的菌體細(xì)胞和包埋劑混合均勻,加入成型劑中固化成型,還可加入強(qiáng)化劑進(jìn)行強(qiáng)化處理,即得固定化細(xì)胞;④L-精氨酸轉(zhuǎn)化;將上述固定化處理后含菌體細(xì)胞的膠體裝柱,將L-精氨酸溶液流經(jīng)凝膠柱進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化,收集流出的轉(zhuǎn)化液,轉(zhuǎn)化液可重復(fù)上柱,直到底物L(fēng)-精氨酸被完全轉(zhuǎn)化成L-鳥氨酸;⑤L-鳥氨酸分離純化;將上述轉(zhuǎn)化液用活性炭脫色去除雜質(zhì)后,濃縮至結(jié)晶,母液中L-鳥氨酸采用陽離子交換柱分離;粗品通過重結(jié)晶進(jìn)行精制。 |
摘要 | 本發(fā)明是以L-精氨酸為原料的固定化細(xì)胞酶法制備L-鳥氨酸的方法。將發(fā)酵得到的微生物細(xì)胞用不同固定化載體包埋裝柱,讓底物L(fēng)-精氨酸溶液以一定速度流經(jīng)固定化細(xì)胞填充柱,收集流出液,濃縮結(jié)晶或用陽離子交換柱分離純化得L-鳥氨酸。本發(fā)明可提高微生物細(xì)胞利用率,底物轉(zhuǎn)化率95%以上,產(chǎn)品得率高于80%。 |
國際公布 |