| 公開(公告)號(hào) | CN1322126C |
| 公開(公告)日 | 2007.06.20 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN99804195.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 1999.02.04 |
| 專利名稱 | 免疫原性降低和/或清除率降低的葡激酶衍生物的鑒定、生產(chǎn)和應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12N15/31(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/31(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1998.2.4 EP 98200323.8;1998.2.6 EP 98200365.9 |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 思羅姆-X股份有限公司;德西雷·何塞·科倫 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 德西雷·何塞·科倫 |
| 地址 | 比利時(shí)勒芬 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | 1999-02-04 PCT/EP1999/000748 |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | 2000.09.19 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 樊衛(wèi)民 |
| 國(guó)省代碼 | 比利時(shí);BE |
| 主權(quán)項(xiàng) | 具有基本上如圖1所示的氨基酸序列的葡激酶衍生物，其特征在于所述衍生物具有至少氨基酸K130T和K135R的替換，且所述衍生物選自：SakSTAR(K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，H43R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(E65A，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，K86A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，T71S，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，E108A，K109A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，K121A，K130T，K135R)，SakSTAR(E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65S，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(S34G，G36R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(E65A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65N，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K57A，E58A，E61A，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，E80A，D82A，S103A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K109A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，E65Q，K74R，E80A，D82A，T90A，E99D，T101S，E108A，K109A，K130T，K135R)。 |
| 摘要 | 鑒定、生產(chǎn)和應(yīng)用葡激酶衍生物的方法，其特征在于在對(duì)患者施用后免疫原性降低，并且能通過單次靜脈內(nèi)大劑量注射施用。本發(fā)明的衍生物的獲得方法包括，制備至少包含提供生物活性的葡激酶編碼序列部分的DNA片段；對(duì)該DNA片段進(jìn)行體外定點(diǎn)誘變，以將野生型氨基酸的一個(gè)或多個(gè)密碼子替換為另一種氨基酸的密碼子；在適當(dāng)?shù)妮d體中克隆突變的DNA片段；用該載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞；在適于表達(dá)該DNA片段的條件下培養(yǎng)該宿主細(xì)胞。將表達(dá)的葡激酶衍生物純化為均一的，并用硫醇基定點(diǎn)的聚乙二醇化學(xué)修飾置換的Cys；該DNA片段優(yōu)選地是質(zhì)粒pMEX602sakB(pMEX.sakSTAR)的453bp EcoRI-HindIII片段，通過剪接重疊延伸聚合酶鏈反應(yīng)進(jìn)行體外定點(diǎn)誘變，并在大腸桿菌株TG1或WK6中表達(dá)突變的DNA片段。本發(fā)明也涉及包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的葡激酶衍生物與適當(dāng)賦形劑的藥用組合物，用于動(dòng)脈血栓形成的治療。 |
| 國(guó)際公布 | 1999-08-12 WO1999/040198 英 |
