| 公開(公告)號(hào) | CN1757745A |
| 公開(公告)日 | 2006.04.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410017881.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.04.23 |
| 專利名稱 | 一種利用甲醇酵母系統(tǒng)高效表達(dá)tPA等外源蛋白的方法及其表達(dá)產(chǎn)物的純化制備技術(shù) |
| 主分類號(hào) | C12P21/00(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12P21/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 黃秀東;唐德江 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 黃秀東;李樹剛;于廷和 |
| 地址 | 201206上海市浦東新區(qū)碧云路333弄中天碧云苑18號(hào)603室 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 重慶市恒信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 劉小紅 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種通過基因工程菌株制備一大類目的蛋白或多肽的方法，通過此方法表達(dá)出的蛋白質(zhì)具有CP-LS-CS-IP樣的特征性結(jié)構(gòu)， 其中CP-代表伴侶蛋白(CP-，ChaperonProtein) LS-指連接肽的序列(LS-，LinkerSquence) CS-是蛋白酶法或化學(xué)法切割時(shí)的識(shí)別肽段序列(CS-，CleavageSquence) IP-表示目的蛋白或多肽(IP，InterestofProtein/Peptide)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種甲醇酵母通用表達(dá)載體PICZa-DoI的構(gòu)建，其關(guān)鍵是可以利用該表達(dá)系統(tǒng)以融合蛋白的方式生產(chǎn)一類常規(guī)方法難以高水平表達(dá)的外源重組蛋白。采用此表達(dá)系統(tǒng)已經(jīng)成功的表達(dá)了突變型人組織纖溶酶原激活物(rPA)、人膜聯(lián)蛋白V-尿激酶活性片段融合蛋白(Anx-scUK)和突變型人神經(jīng)生長(zhǎng)因子(mut-hNGF)等。該表達(dá)系統(tǒng)的產(chǎn)生的融合蛋白可以通過螯合層析(Chelating Sepharose FF)介質(zhì)從發(fā)酵液中直接捕獲，經(jīng)過脫鹽、酶切或化學(xué)切割開融合蛋白，再用常規(guī)的層析介質(zhì)就可以純化制備出純度合乎要求的目的蛋白作為醫(yī)藥用途。 |
| 國(guó)際公布 |
