| 公開(公告)號 | CN1778913A |
| 公開(公告)日 | 2006.05.31 |
| 申請(專利)號 | CN200410084578.6 |
| 申請日期 | 2004.11.25 |
| 專利名稱 | 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的質(zhì)粒對頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化方法 |
| 主分類號 | C12N15/09(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/09(2006.01)I;C12N15/80(2006.01)I;C12N15/87(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 朱春寶;朱寶泉;徐 威;趙文杰 |
| 地址 | 200040上海市北京西路1320號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 中原信達知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 羅大忱 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化方法，包括以下步驟： (1)構(gòu)建重組載體質(zhì)粒； (2)通過電激法和三親雜交法將載體質(zhì)粒導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌中，構(gòu)建含有雙元載體系統(tǒng)的根癌農(nóng)桿菌； (3)將含有雙元載體系統(tǒng)的根癌農(nóng)桿菌與頂頭孢霉共培養(yǎng)，得到轉(zhuǎn)化子； (4)獲得的轉(zhuǎn)化子以耐抗生素進行篩選。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的頂頭孢霉的轉(zhuǎn)化。本發(fā)明提供了構(gòu)建適用于頭孢菌素C產(chǎn)生菌頂頭孢霉基因工程研究用的新型載體質(zhì)粒，并建立了根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化頂頭孢霉的新方法，無論是用菌絲體或是原生質(zhì)體，每107個受體細胞都可得到＞100個轉(zhuǎn)化子，與傳統(tǒng)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法1～4個轉(zhuǎn)化子相比，轉(zhuǎn)化率得到了明顯的提高。有望突破現(xiàn)有載體轉(zhuǎn)化頂頭孢霉效率率低這一瓶頸，促進這個重要的工業(yè)微生物菌種的基因工程改良，具有極大的工業(yè)價值。 |
| 國際公布 |
