公開(公告)號(hào)
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CN1876176A
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公開(公告)日
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2006.12.13
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200610052400.2
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申請(qǐng)日期
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2006.07.11
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專利名稱
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ω-芋螺毒素M VII A突變體及制備和應(yīng)用
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主分類號(hào)
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A61K38/17(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K38/17(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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詹金彪;夏 錚;王 峰;徐小蓉;黃建松
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地址
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310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州求是專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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張法高;趙杭麗
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國(guó)省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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一種ω-芋螺毒素M VII A突變體,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列: Gly-Ser-Cys-Lys-Gly-Lys-Gly-Ala-Lys-Cys-Ser-Arg-Leu-Met-Tyr-Asp-Cys-Cys-Thr-Gly-Ser-Cys-Arg-Ser-Gly-Lys-Cys 27,該多肽有機(jī)化合物分子中Cys3與Cys18、Cys10與Cys22、Cys17與Cys27之間分別形成三對(duì)二硫鍵,C-端為非酰胺化Cys。
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摘要
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本發(fā)明提供一種重組ω-芋螺毒素M VII A(CTX M VIIA)突變體,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列,采用與谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)融合表達(dá)的方法,在已構(gòu)建的pGEX-2T/CTX M VIIA原核表達(dá)質(zhì);A(chǔ)上,在大腸桿菌中用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)GST-CTX M VIIA融合蛋白,經(jīng)GST親和層析的方法純化融合蛋白,用凝血酶進(jìn)行酶切產(chǎn)生CTX M VIIA的突變體,產(chǎn)物經(jīng)過凝膠柱進(jìn)行分離純化;為獲得正確的二硫鍵配對(duì),先用還原劑將突變體的二硫鍵配打開,再用PBS透析過夜,空氣氧化獲得目的產(chǎn)物。本發(fā)明方法,操作簡(jiǎn)單、質(zhì)量穩(wěn)定、成本較低,可在制備無成癮型的鎮(zhèn)痛藥物中應(yīng)用。
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國(guó)際公布
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