公開(公告)號 | CN1930302A |
公開(公告)日 | 2007.03.14 |
申請(專利)號 | CN200380110979.8 |
申請日期 | 2003.12.09 |
專利名稱 | 用于檢測臨床樣品中的病原分枝桿菌的方法 |
主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 印度科學工業(yè)研究所 |
發(fā)明(設計)人 | 拉哈·哈里·達斯;阿賈伊·庫馬爾;梅格帕蒂·辛格 |
地址 | 印度新德里 |
頒證日 | |
國際申請 | 2003-12-09 PCT/IB2003/005767 |
進入國家日期 | 2006.07.07 |
專利代理機構 | 北京銀龍知識產權代理有限公司 |
代理人 | 鐘 晶 |
國省代碼 | 印度;IN |
主權項 | 檢測臨床樣品中病原分枝桿菌的方法,所述方法包括以下步驟: a.通過常規(guī)方法凈化臨床樣品,去除包括粘液的污染物, b.用改進的裂解緩沖液處理步驟(a)所得的經處理的臨床樣品以使活病原分枝桿菌失活,從而使過程對使用者安全, c.利用改進的方法,從步驟(b)所得的經處理的臨床樣品中提取基因組DNA,從而提高DNA的產量和質量, d.從步驟(c)所得的DNA設計用于檢測病原分枝桿菌的序列SEQ ID No.4,所述設計的序列包括步驟(c)所得DNA所選出的SEQ ID No.3的基因間區(qū)域、含SEQ ID No.l的mmaAl基因部分的側翼區(qū)域和SEQ ID No.2的mmaA2基因部分, e.設計并合成一套用于擴增SEQ ID No.4的反向引物的特異寡核苷酸引物,其中SEQ ID No.5的為正向引物,和SEQID No.6為用于聚合酶鏈式反應(PCR), f.開發(fā)用于特異性擴增(d)的SEQID No.4的PCR擴增過程,所述過程包括使用步驟(e)中設計并合成的特異性寡核苷酸引物,用于檢測臨床樣品中病原分枝桿菌的存在,和 g.通過限制酶片斷長度多態(tài)性(RFLP)分析PCR擴增產物,用于區(qū)分病原分枝桿菌菌種,用于快速評估HIV的共感染。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及檢測諸如痰、腦脊髓液、胃洗出物和組織活體檢測物等臨床樣品中的病原分枝桿菌,其特征在于,利用設計的寡核苷酸引物對來延伸本發(fā)明的新DNA,所述寡核苷酸引物對能特異擴增來自于臨床樣品的靶DNA,所述DNA位于甲基分枝菌酸合成酶基因mmaA1和mmaA2之間的基因間區(qū)域以及mmaA1和mmaA2基因中的側翼區(qū)域。 |
國際公布 | 2005-06-23 WO2005/056831 英 |