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一種用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長的方法

公開(公告)號 CN1304565C  
公開(公告)日 2007.03.14  
申請(專利)號 CN200310113089.4  
申請日期 2003.12.26  
專利名稱 一種用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長的方法  
主分類號 C12N5/04(2006.01)I  
分類號 C12N5/04(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院過程工程研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 王玉春;葛 鋒;王曉東  
地址 100080北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京泛華偉業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 王鳳華  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種使用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長的方法,其特征在于,步驟如下: 1)誘導(dǎo)新疆紫草愈傷組織 將新疆紫草的外植體接種于含有植物激素的改良N6固體培養(yǎng)基I中進(jìn)行誘導(dǎo)培育,10-30天后長出新疆紫草愈傷組織; 所述的改良N6固體培養(yǎng)基I的組分和含量為:每1L的N6固體培養(yǎng)基中含有0.1-0.7mg的萘乙酸、0.1-0.7mg的2,4-二氯苯乙酸和0.5-4.0mg的激動素; 2)將步驟1)誘導(dǎo)培育獲得的新疆紫草愈傷組織置于改良N6固體培養(yǎng)基II中進(jìn)行繼代生長2-3個周期,每個周期的培養(yǎng)時間為10-30天; 所述的改良N6固體培養(yǎng)基II的組分和含量為:每1L的N6固體培養(yǎng)基中含有0.5-5mg/L激動素; 3)篩選高產(chǎn)紫草素及其衍生物的新疆紫草愈傷組織 將步驟2)中繼代生長2-3個周期的新疆紫草愈傷組織轉(zhuǎn)接到合成培養(yǎng)基III上,在24-26℃溫度和無光條件下培養(yǎng)16-25天后,測定并選出其紫草素及其衍生物含量比天然新疆紫草藥材含量高出1倍的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系; 所述的合成培養(yǎng)基III的配方為:KNO3680mg/L;NaH2PO4·2H2O 19mg/L;NaSO41917mg/L;CuCl2·2H2O0.1364mg/L;H3BO31.6mg/L;FeSO4·7H2O 1.1mg/L;NaEDTA·2H2O1.5mg/L;激動素0.5mg/L;肌醇100mg/L;蔗糖50g/L;瓊脂6g/L; 4)將步驟3)得到的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系置于步驟2)中所述的改良N6固體培養(yǎng)基II中進(jìn)行10-25天的預(yù)培養(yǎng); 5)將步驟4)中經(jīng)預(yù)培養(yǎng)的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系轉(zhuǎn)入含有稀土元素Nd或混合稀土的改良N6固體培養(yǎng)基IV中,培養(yǎng)10-30天; 所述的改良N6固體培養(yǎng)基IV中Nd或混合稀土含量為:每1L的N6固體培養(yǎng)基中Nd或混合稀土含量為0.01-0.5mmol;所述混合稀土的成分和含量為:71.5%La2O3+25.9%CeO2+2.4%Pr6O11+0.2%Sm2O3,w/w。  
摘要 本發(fā)明涉及使用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長的方法:首先從新疆紫草外植體誘導(dǎo)出愈傷組織,愈傷組織繼代若干次后,選出紫草素及其衍生物高產(chǎn)細(xì)胞系,通過將不同種類和不同濃度的稀土元素添加到固體培養(yǎng)基上,使新疆紫草的愈傷組織快速增殖,從而建立了從外植體出發(fā),快速獲得大量優(yōu)質(zhì)新疆紫草愈傷組織的培養(yǎng)體系,為實(shí)現(xiàn)工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)紫草素及其衍生物奠定了基礎(chǔ)。  
國際公布  
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