| 公開(公告)號 | CN1319988C |
| 公開(公告)日 | 2007.06.06 |
| 申請(專利)號 | CN200410067157.2 |
| 申請日期 | 2004.10.14 |
| 專利名稱 | 一種高親和力免疫球蛋白結(jié)合分子及其制備方法 |
| 主分類號 | C07K14/00(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/00(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;C07K14/315(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;G01N33/535(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海潤龍生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 潘 衛(wèi);徐 容;王金華;謝天培;李云華;王德貴;沈毅珺;揚 華;王錦紅;許浩坤 |
| 地址 | 200065上海市普陀區(qū)延長西路25號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海光華專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 余明偉;沈錫英 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種重組Ig結(jié)合分子文庫，其特征在于：所述文庫是由以不同的Ig結(jié)合分子葡萄球菌A蛋白的A、B、C、D、E結(jié)構(gòu)域，大消化鏈球菌L蛋白的B1、B2、B3、B4、B5結(jié)構(gòu)域，G群或C群鏈球菌G蛋白的G1、G2結(jié)構(gòu)域的單個抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域為結(jié)構(gòu)單元，以結(jié)構(gòu)單元隨機DNA重排形成的Ig結(jié)合分子組成，其中上述結(jié)構(gòu)域的核苷酸序列分別為：SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：12，單個結(jié)構(gòu)域之間以核苷酸GAGCTC連接，結(jié)構(gòu)單元隨機DNA重排形成的Ig結(jié)合分子通過如下方法獲得： (1)將Ig結(jié)合分子葡萄球菌A蛋白的A、B、C、D、E結(jié)構(gòu)域，大消化鏈球菌L蛋白的B1、B2、B3、B4、B5結(jié)構(gòu)域，G群或C群鏈球菌G蛋白的G1、G2結(jié)構(gòu)域的單個抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域分別經(jīng)PCR擴(kuò)增引入Sac I酶切位點作為連接點； (2)將PCR回收產(chǎn)物分別經(jīng)Sac I酶切消化； (3)將步驟(2)獲得的Sac I酶切消化產(chǎn)物混合，用T4連接酶將各單結(jié)構(gòu)域進(jìn)行隨機連接重組。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種重組免疫球蛋白結(jié)合分子文庫、其制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明是以來自不同種屬免疫球蛋白結(jié)合分子葡萄球菌A蛋白protein A的A、B、C、D、E結(jié)構(gòu)域、大消化鏈球菌proteinL的B1、B2、B3、B4、B5結(jié)構(gòu)域、C和G群鏈球菌蛋白G protein G的G1、G2為結(jié)構(gòu)單元，將上述結(jié)構(gòu)單元隨機連接，構(gòu)建重組Ig結(jié)合分子文庫，將該文庫展示在噬菌體表面；以免疫球蛋白對噬菌體展示重組Ig結(jié)合分子文庫進(jìn)行3-4輪親和篩選，獲得系列高親和力免疫球蛋白結(jié)合分子噬菌體文庫。上述文庫可用于篩選高親和力Ig結(jié)合分子。 |
| 國際公布 |
